李恒 毛林夏

摘要[目的]建立了水果樣品前處理，毛細(xì)管柱氣相色譜法（GC-FPD）測定水果中6種有機(jī)磷農(nóng)藥含量的快速檢測方法。[方法]以6種有機(jī)磷農(nóng)藥為檢測對象，通過超聲波系統(tǒng)輔助提取水果中農(nóng)藥殘留，GC-FPD測定水果中6種有機(jī)磷農(nóng)藥的含量。[結(jié)果]在0.025～0.500 μg/mL濃度范圍內(nèi)，農(nóng)藥殘留濃度和峰面積有很好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r>0.995，回收率為71.2%～104.5%，精密度（RSD）為1.66%～5.23%，方法檢出限低于國家標(biāo)準(zhǔn)，適合大批量樣品檢測，能夠大幅縮短樣品前處理時(shí)間，提高檢測效率。[結(jié)論]該方法樣品前處理過程簡單、處理速度快，對欲測定農(nóng)殘組分的選擇性和回收率均能夠達(dá)到痕量分析要求，可以復(fù)制推廣至水果中其他有機(jī)磷農(nóng)殘的檢測。

關(guān)鍵詞氣相色譜法;有機(jī)磷農(nóng)藥;超聲波;殘留

中圖分類號(hào)S48 1+.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611（2019）03-0193-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.03.060

有機(jī)磷農(nóng)藥是指含磷元素的有機(jī)化合物農(nóng)藥，是一類廣譜、高效的化學(xué)殺蟲劑[1]，主要用于防治植物病、蟲、草害，所以其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中被廣泛使用，導(dǎo)致農(nóng)作物產(chǎn)品中發(fā)生不同程度的殘留。有機(jī)磷農(nóng)藥對人、畜的毒性較大，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，如果不按規(guī)定的用藥量、次數(shù)、方法或安全間隔期施藥，就會(huì)引起農(nóng)藥超標(biāo)或農(nóng)藥中毒，危害人類健康。世界各國都對食品中農(nóng)藥殘留最大限量[2]進(jìn)行了規(guī)定?，F(xiàn)代農(nóng)藥殘留分析方法通常包括樣品前處理和測定兩部分[3]，樣品前處理是核心。農(nóng)藥殘留的試樣前處理過程分為提取、濃縮、凈化等關(guān)鍵步驟[4]。高效快速的提取方法是農(nóng)藥殘留分析的核心，它決定著分析的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性，樣品前處理方法的選擇直接影響檢測的效率和最終分析結(jié)果，所以大力開展農(nóng)藥殘留量檢測技術(shù)以及相關(guān)的前處理技術(shù)的研究，發(fā)展簡單、快速、有效的前處理方法是非常必要的，對于保護(hù)人民群眾舌尖上的安全具有重要意義。目前，有機(jī)磷的檢測主要有氣相色譜法（GC）[5-7]、氣相色譜質(zhì)譜法（GC-MS）[8-9]和氣相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜法（GC-MS/MS）[10]等。GC-MS和GC-MS/MS靈敏度較高，但是價(jià)格昂貴，運(yùn)行成本高。氣相色譜法的主要特點(diǎn)是選擇性高、分離效率高、靈敏度高、分析速度快[11]，被廣泛應(yīng)用于食品安全中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測。筆者通過超聲波系統(tǒng)輔助提取水果中農(nóng)藥殘留，毛細(xì)管柱氣相色譜法（GC-FPD）測定水果中6種有機(jī)磷農(nóng)藥含量，建立水果樣品前處理檢測的快速方法。

1材料與方法

1.1主要儀器氣相色譜儀（Agilent 7890A，F(xiàn)PD檢測器，7683B自動(dòng)進(jìn)樣器，DB-17色譜柱）;GM200盤式粉碎磨;電子天平;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;渦旋混合器;超聲波清洗機(jī)（型號(hào)鼎泰恒盛DTC-27J）;所有用到的計(jì)量器具均檢定合格。

1.2主要試劑敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺撲磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（均為100 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）。乙腈、丙酮、甲醇為色譜純;氯化鈉為分析純;試驗(yàn)用水為GB/T 6682規(guī)定的 Ⅰ 級水。

1.3混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制分別將裝有敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺撲磷的標(biāo)準(zhǔn)品（100 μg/mL）的安瓿瓶從冰箱中（2 ℃）取出，在室溫下放置15 min后打開，分別將安瓿瓶中1 mL標(biāo)準(zhǔn)品全部轉(zhuǎn)入10 mL容量瓶中，用丙酮清洗安瓿瓶3次，定容至刻度，即得10 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，采用逐級稀釋法將10 μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制成濃度分別為0.025、0.050、0.100、0.200、0.300、0.400、0.500 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4方法

1.4.1試驗(yàn)原理。試樣中有機(jī)磷類農(nóng)藥經(jīng)乙腈提取，提取溶液經(jīng)過濾、濃縮后，用丙酮定容，注入氣相色譜儀，農(nóng)藥組分經(jīng)色譜柱分離，用火焰光度檢測器（FPD）檢測。用色譜柱的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量[12]。

1.4.2試驗(yàn)步驟。將水果樣品切碎，使用盤式粉碎磨制成勻漿。準(zhǔn)確稱取10.0 g經(jīng)過勻漿制備好的試樣于帶塞塑料瓶中，加入乙腈25 mL，加入2 g氯化鈉，置于超聲波恒溫清洗機(jī)中，將水溫調(diào)至20 ℃后超聲提取10 min后靜置，使乙腈和水相分層。吸取上層提取液于茄形瓶中，在45 ℃水浴減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸餾至近干，加入2.0 mL丙酮后在渦旋混勻器上充分清洗混勻后轉(zhuǎn)移至自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶中，上機(jī)測試。

1.4.3提取條件的選擇。有機(jī)磷農(nóng)藥在乙腈中有良好的溶解性，在超聲波加速反應(yīng)系統(tǒng)輔助下提取殘留農(nóng)藥，減小了樣品和提取液與容器接觸的面積，農(nóng)藥殘留損失小。在超聲波輔助提取過程中，超聲波產(chǎn)生的沖擊波對樣品直接反復(fù)高頻沖擊，能破壞樣品和農(nóng)藥的表面吸附，且超聲波產(chǎn)生的沖擊力能起到一定的攪拌作用，使樣品表面能不斷與新鮮的溶劑接觸，加速農(nóng)藥在提取液中的溶解，同時(shí)使用一定的溫度，更是加快了樣品中殘留農(nóng)藥的擴(kuò)散速度。根據(jù)樣品的性質(zhì)、提取效果、塑料瓶體積、提取時(shí)效和檢測成本等方面因素綜合考慮，最終確定用25 mL體積乙腈提取液，于20 ℃保持10 min進(jìn)行農(nóng)藥殘留提取。該提取方法實(shí)際使用效果良好，大大縮短了水果中農(nóng)殘?zhí)崛〉臅r(shí)間，加快了分析的速度。

1.4.4樣品濃縮過程條件的控制。在做回收率試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法對農(nóng)殘?zhí)崛∫哼M(jìn)行濃縮過程中，如果水浴溫度過高和濃縮至干后定容都會(huì)使大多數(shù)農(nóng)藥的回收率明顯偏低，這可能是溫度過高引起有機(jī)磷農(nóng)藥的分解，溶劑揮干后使有機(jī)磷分解或蒸干的緣故，所以在試驗(yàn)過程中，水浴溫度不宜過高，控制在45 ℃，提取液濃縮至近干即可。

1.4.5色譜分析條件。改變色譜柱、程序升溫條件及載氣流速、氫氣與空氣比例，考察待測農(nóng)藥色譜分離情況及信號(hào)強(qiáng)度。色譜柱、程序升溫、載氣流速和氫氣與空氣比例不同，待測農(nóng)藥的分離情況及信號(hào)強(qiáng)度也不同。根據(jù)在最短時(shí)間獲得最佳分離效果的原則，得到如下色譜分析條件：氣相色譜柱DB-17（30 m×0.25 mm×0.25 μm），載氣為氮?dú)?/p>

（99.999%），燃燒氣體為高純氫氣和空氣（99.999%，氫氣與

空氣比例為75∶100）;流速為4 mL/min，進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度230 ℃，F(xiàn)PD檢測器溫度250 ℃，柱溫由150 ℃

（保持2 min）升至250 ℃（8 ℃/min），保持6 min，進(jìn)樣量1 μL。

2結(jié)果與分析

2.1系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)按照“1.4.5”色譜分析條件，對敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺撲磷6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行上機(jī)測試，待測農(nóng)藥分離情況見圖1。從圖1可以看出，在“1.4.5”條件下，混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖中敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺撲磷6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間分別為1.866、8.490、9.641、10.155、10.399、12.829 min，其色譜峰與相鄰色譜峰分離度良好（與相鄰峰的分離度均大于1.5），符合氣相色譜法定量分析的要求。

2.2線性范圍、相關(guān)系數(shù)和檢出限準(zhǔn)確配制0.025～0.500 μg/mL不同濃度的各種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)品工作溶液系列，按照“1.4”中方法和條件進(jìn)行測定，以峰面積對濃度做線性回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到待測農(nóng)藥的線性方程及相關(guān)系數(shù)，檢出限按信噪比3∶1 計(jì)算，結(jié)果見表1。從表1可以看出，敵敵畏、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺撲磷6種有機(jī)磷農(nóng)藥在0.025～0.500 μg/mL線性關(guān)系良好，說明峰面積和濃度之間有很好的相關(guān)性，能夠達(dá)到實(shí)驗(yàn)室快速檢測的要求，滿足進(jìn)出口水果農(nóng)藥殘留檢測分析的要求。

2.3方法的加標(biāo)回收率和精密度試驗(yàn)為了考察該方法的回收率和精密度，以桔子樣品為背景分別添加3個(gè)水平的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照“1.4.5”方法進(jìn)行提取濃縮測定，每個(gè)添加水平做7次平行試驗(yàn)，計(jì)算各待測組分的回收率和精密度（RSD）。結(jié)果表明（表2），6種有機(jī)磷類農(nóng)藥的加標(biāo)回收率為71.2%～104.5%，精密度（RSD）為1.66%～5.23%，回收率和精密度均符合痕量分析的要求，能夠滿足實(shí)驗(yàn)室對進(jìn)出口水果有機(jī)磷農(nóng)殘的檢測需求。

2.4水果樣品檢測應(yīng)用該試驗(yàn)所建立的處理方法和條件，對實(shí)驗(yàn)室常檢樣品葡萄、石榴、蘋果、梨和桔子中6種有機(jī)磷進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，葡萄、蘋果和梨中毒死蜱有檢出，毒死蜱檢測結(jié)果均在食品中農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)允許范圍，其他5種農(nóng)藥殘留無檢出，石榴和桔子中均無這6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢出。

3結(jié)論

該研究通過超聲波系統(tǒng)輔助提取水果中農(nóng)藥殘留，毛細(xì)管柱氣相色譜法（GC-FPD）測定水果中6種有機(jī)磷農(nóng)藥含量。此方法在水果樣品浸漬提取的同時(shí)，輔以超聲波提取，在合適的溫度下完成樣品的前處理工序，操作簡單，提取效果好，快速節(jié)能、節(jié)省樣品前處理的溶劑，污染小，可同時(shí)處理多組樣品，省時(shí)高效，顯著提高了樣品前處理效率，進(jìn)一步提高了實(shí)驗(yàn)室檢測工作效率，適合進(jìn)出口水果中有機(jī)磷農(nóng)殘的快速檢測工作，能夠更好地為檢驗(yàn)檢疫執(zhí)法提供技術(shù)支持。

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