王 坤，黃曉露，李寶財(cái)，梁文匯，李開(kāi)祥

(廣西林業(yè)科學(xué)研究院廣西特色經(jīng)濟(jì)林培育與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530002)

【研究意義】多穗柯(LithocarpusploystachyusRehd.)，又名甜茶[1]，系殼斗科櫟屬常綠喬木。多穗柯主要分布在我國(guó)廣西、湖南、江西、福建、安徽、廣東、四川等省區(qū)，資源非常豐富[2-3]。多穗柯作為一種藥食同源性植物，其含有豐富的黃酮類成分且具有很好的藥理作用[4-7]，因此其在藥用保健品及功能性食品開(kāi)發(fā)方面具有很大的利用價(jià)值。建立多穗柯種質(zhì)資源庫(kù)異地保存，可為不同種源的植物同時(shí)育苗、造林，評(píng)價(jià)其對(duì)于當(dāng)?shù)厣L(zhǎng)環(huán)境的適應(yīng)性，從而選育出適合在本地種植與推廣的優(yōu)良種源，因此，加強(qiáng)多穗柯種質(zhì)資源材料的收集和評(píng)價(jià)，對(duì)多穗柯的生產(chǎn)栽培和優(yōu)良選育意義重大。【前人研究進(jìn)展】多穗柯多生長(zhǎng)在光照好的低山密林中，適應(yīng)性強(qiáng)，生長(zhǎng)快速，為很好的經(jīng)濟(jì)樹種，近年來(lái)受到國(guó)內(nèi)學(xué)者的廣泛關(guān)注，關(guān)于多穗柯的研究多為黃酮類成分提取[8-10]、化學(xué)成分研究[11-13]及活性評(píng)價(jià)[14-16]等方面，并且多穗柯老葉中黃酮類成分主要為根皮苷，嫩葉中黃酮類成分主要為三葉苷[17]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前國(guó)內(nèi)關(guān)于多穗柯種質(zhì)資源收集與評(píng)價(jià)的研究未得到有效重視，針對(duì)多穗柯的種質(zhì)資源，特別是不同地區(qū)的多穗柯性狀差異研究較少?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】通過(guò)收集我國(guó)不同省區(qū)野生多穗柯種源，建立多穗柯種質(zhì)資源庫(kù)，初步篩選30個(gè)多穗柯種源進(jìn)行分析，對(duì)其主要經(jīng)濟(jì)性狀及活性成分進(jìn)行比較分析，篩選出適應(yīng)性強(qiáng)、生長(zhǎng)迅速、高產(chǎn)量、高品質(zhì)的種質(zhì)資源，以期為多穗柯選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料來(lái)自我國(guó)6個(gè)省(區(qū)、直轄市)30個(gè)多穗柯種源苗木，分別為：廣西種源12個(gè)(GXTL3、GXTL6、GXTL8、GXTL9、GXYJ3、GXYJ4、GXYJ11、GXYJ13、GXDB3、GXDB5、GXDB6和GXNP3)、重慶種源7個(gè)(CQJYS2、CQJYS4、CQJYS5、CQJYS7、CQLP1、CQLP2和CQLP4)、湖南種源6個(gè)(HNCX3、HNCX5、HNCX8、HNZJ5、HNZJ6和HNZJ7)、福建種源3個(gè)(FJWYS3、FJWYS5和FJWYS6)、浙江種源1個(gè)(ZJJN1)、江西種源1個(gè)(JXJGS12)。2014年同一批扦插苗，2016年3月帶土球起苗移栽到廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院老虎嶺試驗(yàn)苗圃。當(dāng)前植株長(zhǎng)勢(shì)良好。

1.2 試驗(yàn)方法

株行距1.0 m×1.5 m，每年5、11月進(jìn)行1次除草、同時(shí)進(jìn)行1次施肥，施肥量為N、P、K國(guó)產(chǎn)復(fù)合肥0.5 kg/株。對(duì)30個(gè)種源進(jìn)行調(diào)查，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)種源調(diào)查10株。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.3.1 生長(zhǎng)性狀指標(biāo) 移栽時(shí)選擇的同一批長(zhǎng)勢(shì)一致苗高一致的扦插苗，2018年10月隨機(jī)選取長(zhǎng)勢(shì)正常的多穗柯植株進(jìn)行測(cè)定。測(cè)量株高為植株從地面至最高點(diǎn)的高度；測(cè)量地徑用游標(biāo)卡尺在離地面10 cm高處主莖的直徑[18]；產(chǎn)量為每個(gè)植株全部葉片的重量。

1.3.2 活性成分含量測(cè)定 分別采集同一時(shí)期的多穗柯嫩葉和老葉，根皮苷和三葉苷的含量采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定[17]。將多穗柯葉干燥、粉碎，過(guò)篩。精確稱取多穗柯樣品，加20倍體積的甲醇超聲提取，重復(fù)提取4次，過(guò)微孔濾膜供測(cè)試用，色譜條件參照文獻(xiàn)中報(bào)道的條件[17]并稍有改動(dòng)，流動(dòng)相：乙腈-0.04 %甲酸(28∶72)，流速：1.0 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：285 nm，柱溫：室溫，進(jìn)樣量：5 μl。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2010軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行初步分析，利用SPSS 19.0軟件進(jìn)行Duncan多重比較及方差分析，然后對(duì)相關(guān)指標(biāo)值進(jìn)行主成分分析，對(duì)30個(gè)種源的經(jīng)濟(jì)性狀和主要活性成分含量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同多穗柯種源經(jīng)濟(jì)性狀及活性成分的方差分析

從表1可看出，30個(gè)多穗柯種源的樹高、產(chǎn)量、老葉根皮苷含量和嫩葉三葉苷含量的種間差異性均達(dá)到極顯著水平(P<0.01，下同)，地徑的種間差異性達(dá)到顯著性水平(P<0.05，下同)。

表1 多穗柯不同種源經(jīng)濟(jì)性狀及主要活性成分含量方差分析

2.2 主要經(jīng)濟(jì)性狀及活性成分含量分析

30個(gè)多穗柯種源經(jīng)濟(jì)性狀及主要活性成分含量見(jiàn)表2，其中樹高最高的種源為GXYJ13，為4.13 m，其次為GXNP3號(hào)種源，為3.57 m，隨后CQLP2、GXTL6、CQLP4、CQJYS2、GXTL5、JXJGS12、CQJYS4、GXYJ11的樹高都在3.00 m以上，30個(gè)種源中最矮的為HNCX3號(hào)種源，為1.73 m；其中地徑最大的為HNZJ5和HNCX5這2個(gè)種源，均為5.17 cm，種源CQLP2和CQLP4的地徑均在5 cm以上，地徑最小的種源為FJWYS3；產(chǎn)量最大的種源為CQLP2，為5.84 kg，GXDB5的產(chǎn)量第2，為4.24 kg，其中GXTL5和GXYJ11的產(chǎn)量均在3.00 kg以上，產(chǎn)量最小的種源為CQJYS7；GXDB6的老葉根皮苷含量最大，為16.29 %，同時(shí)嫩葉三葉苷的含量也較高，為17.85 %，其中GXYJ13、JXJGS12、FJWYS5、FJWYS6、GXDB3老葉根皮苷的含量均在13 %以上，老葉根皮苷含量最少的為GXYJ4，其嫩葉中三葉苷含量也相對(duì)較少，為7.69 %；GXYJ13嫩葉三葉苷含量最高，為31.41 %，其老葉根皮苷含量也較高為15.69 %，其中FJWYS6、GXNP3和FJWYS3嫩葉中三葉苷的含量均在20 %以上，嫩葉中三葉苷含量最少的為CQJYS2，為5.78 %。

表2 多穗柯不同種源主要經(jīng)濟(jì)性狀及活性成分含量分析

表3 3個(gè)主成分的貢獻(xiàn)率和累積貢獻(xiàn)率

表4 各主成分的得分系數(shù)矩陣

2.3 主成分分析

各主成分的貢獻(xiàn)率和累積貢獻(xiàn)率見(jiàn)表3，各主成分的得分系數(shù)矩陣見(jiàn)表4。以特征值大于0.7為標(biāo)準(zhǔn)，得到3個(gè)主成分，從表3可以看出，這3個(gè)主成分的累積貢獻(xiàn)率為82.541 %，可以代表30個(gè)多穗柯種源5個(gè)指標(biāo)82.541 %的綜合信息，符合我們進(jìn)行主成分分析的目的，故選取這3個(gè)主成分進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。從表3和表4可以看出，第1主成分的貢獻(xiàn)率最大，為39.916 %，得分系數(shù)中有3個(gè)正值，分別是樹高、地徑和產(chǎn)量，2個(gè)負(fù)值，分別是根皮苷含量和三葉苷含量，可以歸為經(jīng)濟(jì)性狀因子；第2主成分貢獻(xiàn)率為28.351 %，得分系數(shù)中全部都為正值，可以歸為綜合因子；第3主成分貢獻(xiàn)率為14.274 %，其中產(chǎn)量的系數(shù)值最大，為0.677，可以歸為產(chǎn)量因子。

2.4 綜合評(píng)價(jià)

對(duì)30個(gè)多穗柯種源的5個(gè)指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，將其轉(zhuǎn)化為3個(gè)主成分，這3個(gè)主成分可以代表原本5個(gè)指標(biāo)的82.541 %的綜合信息，并且通過(guò)3個(gè)主成分的得分系數(shù)，初步推斷出第1主成分為經(jīng)濟(jì)性狀因子，第2主成分為綜合因子，第3主成分為產(chǎn)量因子。用Z1、Z2和Z3分別代表3個(gè)主成分得分，用X1、X2、X3、X4、X5代表標(biāo)準(zhǔn)化后的變量，以GXTL3種源為例，各主成分得分線性方程為：

Z1=0.276X1+0.289X2+0.368X3-0.342X4-0.298X5

Z2=0.467X1+0.374X2+0.069X3+0.379X4+0.446X5

Z3=0.210X1-0.782X2+0.677X3-0.199X4+0.499X5

以第1、2和3主成分的方差貢獻(xiàn)率為系數(shù)，構(gòu)建綜合評(píng)分模型[19]：F=0.39916×Z1+0.28351×Z2+0.14274×Z3。多穗柯不同種源的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)F值見(jiàn)表5。通過(guò)數(shù)據(jù)分析可見(jiàn)，30個(gè)多穗柯種源中共有13個(gè)種源的F值為正值，17個(gè)種源的F值為負(fù)值，其中13個(gè)F值為正值的種源按F值從大到小依次為CQLP2、GXYJ13、GXTL5、GXNP3、CQLP4、GXTL6、GXYJ11、GXDB5、CQLP1、CQJYS2、GXYJ4、HNCX5、HNCX8。其中CQLP2的綜合評(píng)分(F值)最高為1.420094，其第1主成分的得分也最高，為2.49777，說(shuō)明其經(jīng)濟(jì)性狀表現(xiàn)最優(yōu)；GXYJ13的綜合評(píng)分(F值)為0.888433，綜合評(píng)分排名第2，其第2主成分的得分最高，為3.31682，第1成分得分為-0.57666，說(shuō)明其綜合評(píng)價(jià)最優(yōu)，但經(jīng)濟(jì)性狀表現(xiàn)比較差，綜合得分不如CQLP2；GXDB5的第3主成分的得分最高，為1.93982，說(shuō)明其產(chǎn)量最高，但其他指標(biāo)表現(xiàn)稍差，綜合評(píng)分第8。

3 討 論

本研究結(jié)果表明，30個(gè)多穗柯種源中，樹高最高的種源為GXYJ13，為4.13 m，樹高在3 m以上的種源有10個(gè)，最矮的為HNCX3號(hào)種源，為1.73 m；其中地徑最大的為HNZJ5和HNCX5，均為5.17 cm，地徑均在5 cm以上的種源有4個(gè)；產(chǎn)量最大的種源為CQLP2，為5.84 kg，產(chǎn)量均在3 kg以上的種源有4個(gè)；據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[17]，多穗柯嫩葉中主要含三葉苷，根皮苷含量很少，而老葉中主要含根皮苷，相反三葉苷含量很少，所以本研究只將老葉中根皮苷的含量和嫩葉中三葉苷的含量作為考察指標(biāo)，GXDB6的老葉根皮苷含量最大，為16.29 %，同時(shí)嫩葉三葉苷的含量也較高，為17.85 %，老葉根皮苷的含量均在13 %以上的種源有6個(gè)；GXYJ13嫩葉三葉苷含量最高，為31.41 %，其老葉根皮苷含量也較高為15.69 %，嫩葉中三葉苷的含量均在20 %以上的種源有4個(gè)。

表5 各主成分得分及綜合評(píng)價(jià)

通過(guò)主成分分析法將不相關(guān)的5個(gè)多穗柯指標(biāo)轉(zhuǎn)化為盡可能反映原有指標(biāo)的綜合指標(biāo)，從而篩選出了10個(gè)綜合評(píng)價(jià)最好的種源，為今后多穗柯優(yōu)良種源的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)，主成分分析的降維思想在篩選優(yōu)良種源的應(yīng)用上非常廣泛，比如許杰等[20]采用主成分分析法對(duì)14個(gè)三年桐種源的經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo)進(jìn)行分析，篩選出7個(gè)綜合評(píng)價(jià)最優(yōu)的種源，為油桐的品種選育鑒定基礎(chǔ)；雷偉俠等[21]采用通徑分析及主成分分析等方法對(duì)95份甘藍(lán)型油菜種質(zhì)資源的9個(gè)經(jīng)濟(jì)性狀進(jìn)行了分析，確定了影響油菜產(chǎn)量的相關(guān)指標(biāo)，為其高產(chǎn)育種提供理論依據(jù)。因時(shí)間所限，本研究對(duì)多穗柯葉片主要活性成分含量的測(cè)定，只選取一次抽稍的數(shù)據(jù)，未監(jiān)測(cè)不同季節(jié)多穗柯葉片活性成分含量的變化，且研究對(duì)象僅為30個(gè)多穗柯種源，今后還需對(duì)同一種源在不同季節(jié)的生長(zhǎng)狀況及活性成分含量進(jìn)行測(cè)定分析，并且加強(qiáng)不同產(chǎn)地多穗柯種源的收集并對(duì)其進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，為選育出優(yōu)良多穗柯品種并進(jìn)行推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

4 結(jié) 論

綜合評(píng)價(jià)30個(gè)多穗柯種源，表現(xiàn)最優(yōu)的10個(gè)品種為CQLP2、GXYJ13、GXTL5、GXNP3、CQLP4、GXTL6、GXYJ11、GXDB5、CQLP1、CQJYS2，其中重慶種源4個(gè)、廣西種源6個(gè)，相比其他地區(qū)，廣西種源和重慶種源的多穗柯品質(zhì)最佳。根據(jù)每個(gè)主成分得分的高低，評(píng)價(jià)不同多穗柯種源主要性狀的差異，可為今后的多穗柯選育提供依據(jù)。