呼蓓蓓

摘要：目的? 通過比較聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、顯色平板法兩種篩查方法，探討圍產(chǎn)期孕婦B族鏈球菌（GBS）感染的合適快速檢測方法。方法? 選取2016年5月～2018年5月我院152例常規(guī)產(chǎn)檢的圍產(chǎn)期孕婦，采集孕婦陰道分泌物后分別做PCR檢測與顯色平板法，并對結(jié)果進(jìn)行質(zhì)譜檢測確認(rèn)。比較兩種方法對GBS的陽性檢出率。結(jié)果? PCR檢測方法的陽性檢出率為 6.58%（10/152），靈敏度為77.27%（17/22），顯色平板法的陽性檢出率11.18%（17/152），靈敏度為50.00%（10/22）。結(jié)論? 兩種篩查方法均能檢測GBS，應(yīng)用顯色平板法對篩查圍產(chǎn)期孕婦的GBS感染靈敏度更高。臨床中對圍產(chǎn)期孕婦的GBS 篩查采用顯色平板培養(yǎng)的方法能提高GBS的檢出率。

關(guān)鍵詞：圍產(chǎn)期孕婦;B族鏈球菌;GBS檢查;顯色平板

中圖分類號：R714.7? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.10.057

文章編號：1006-1959（2019）10-0171-02

Abstract：Objective? A suitable rapid detection method for infection of group B streptococcus （GBS） in perinatal women was conducted by comparing two methods of polymerase chain reaction （PCR） and chromogenic plate method. Methods? From May 2016 to May 2018， 152 cases of perinatal pregnant women in our hospital were selected. The vaginal secretions of pregnant women were collected and PCR detection and chromogenic plate method were performed respectively. The results were confirmed by mass spectrometry. The positive detection rate of GBS was compared between the two methods. Results? The positive detection rate of PCR detection method was 6.58% （10/152）， the sensitivity was 77.27% （17/22）， the positive detection rate of chromogenic plate method was 11.18% （17/152）， and the sensitivity was 50.00%（10/22）. Conclusion? Both screening methods can detect GBS， and the chromogenic plate method is more sensitive to screening GBS infection in perinatal women. In clinical practice， GBS screening for perinatal pregnant women can improve the detection rate of GBS by using chromogenic plate culture.

Key words：Perinatal pregnant women;Group B streptococcus;GBS examination;Chromogenic plate

B族鏈球菌（group B streptococcus，GBS）亦稱無乳鏈球菌，為革蘭陽性菌，屬于條件致病菌，是一種可定植于孕產(chǎn)婦腸道和陰道的兼性厭氧菌。孕婦GBS感染可引起胎膜早破、流產(chǎn)以及絨毛膜羊膜炎等，也是新生兒早發(fā)型GBS感染的主要危險(xiǎn)因素，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，有40%～70%的攜帶GBS圍產(chǎn)期孕婦在生產(chǎn)過程感染新生兒，引起新生兒敗血癥、肺炎等嚴(yán)重疾病[1]。GBS首次被發(fā)現(xiàn)會導(dǎo)致圍產(chǎn)期孕婦死亡是在1938年，正常情況下非妊娠女性的陰道和肛門也有GBS定植的現(xiàn)象，但是致病風(fēng)險(xiǎn)很小，然而對于圍產(chǎn)期的孕婦來說，由于體內(nèi)激素水平、特殊的生理生化指標(biāo)的改變，GBS的致病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于非妊娠女性，此外，GBS也會以垂直傳播的方式使新生兒感染。由此可見，GBS的危害不容小覷[2]。本研究對我院152例常規(guī)產(chǎn)檢的圍產(chǎn)期孕婦采集孕婦陰道分泌物后分別做PCR檢測與顯色平板法，以期為圍產(chǎn)期孕婦人群做好GBS感染的篩查提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2016年5月～2018年5月來天津市和平區(qū)婦產(chǎn)科醫(yī)院進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)檢的152例圍產(chǎn)期孕婦。納入對本次研究內(nèi)容全部知曉且自愿參與者，無流產(chǎn)病例，排除有夫妻生活者以及使用抗生素者。本次研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會同意。孕婦孕周35～37周，平均孕周（36.23±0.68）周，年齡22～41歲，平均年齡（26.22±4.23）歲。首次妊娠者122例，有分娩史者30例，所有孕婦均接受GBS感染篩查。

1.2試劑? PCR儀：7500型，美國ABI;試劑：博爾誠（北京）科技有限公司;顯色平板：上海一研生物科技有限公司。質(zhì)譜檢測：由于本院沒有質(zhì)樸監(jiān)測的相關(guān)機(jī)器和技術(shù)，因此將質(zhì)譜檢測的項(xiàng)目送第三方實(shí)驗(yàn)室完成。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集? 在充分告知孕婦本次研究的全部內(nèi)容并取得孕婦同意后，由產(chǎn)科醫(yī)師仔細(xì)將拭子插入孕婦的陰道內(nèi)，并旋轉(zhuǎn)拭子采集陰道1/3處分泌物，標(biāo)本采集完成后放置在無菌試管中，將標(biāo)本送至我院檢驗(yàn)科進(jìn)行PCR檢測以及顯色平板法篩查GBS感染情況。

1.3.2檢驗(yàn)方法? 本次研究涉及到的檢驗(yàn)方法全部按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中的臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)方法進(jìn)行。PCR法檢測以及顯色平板法的檢測嚴(yán)格按照廠家關(guān)于產(chǎn)品說明書的操作步驟進(jìn)行，檢驗(yàn)科的檢驗(yàn)人員記錄全部實(shí)驗(yàn)過程、所用到的儀器、試劑、過程、結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 本研究數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以（%）表示，采用？字2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1檢測結(jié)果? 在152例圍產(chǎn)期孕婦樣本中，經(jīng)顯色平板法檢測GBS感染為17例，PCR法檢測GBS感染為10例，經(jīng)第三方實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)譜檢測結(jié)果確認(rèn)后，本次152例樣本中，最終確認(rèn)GBS陽性22例，陽性率14.47%。PCR檢測方法的陽性檢出率為6.58%（10/152），顯色平板法的陽性檢出率11.18%（17/152），見表1、表2。PCR檢測方法與顯色平板法的GBS檢測陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2靈敏度結(jié)果? PCR檢測法的靈敏度為77.27%（17/22），顯色平板法的靈敏度為50.00%（10/22），顯色平板法的靈敏度高于PCR檢測法，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（？字2=4.697，P=0.030）。

3討論

GBS屬于條件致病菌，常寄生于下消化道及泌尿生殖道。有文獻(xiàn)報(bào)道，由于地區(qū)和種族的差異性，圍產(chǎn)期孕婦GBS帶菌率在6.5%～36.0%波動，我國則為10.1%～32.4%[3]。在GBS的標(biāo)本選取方面，國內(nèi)報(bào)道文獻(xiàn)多取自陰道后穹隆分泌物，由于被檢查GBS的圍產(chǎn)期孕婦的孕周不同、檢測方法也存在差異性，故而本研究對PCR檢測和顯色平板法進(jìn)行了對比，本次兩種檢測方法檢出GBS陽性率分別為6.58%和11.18%，可以看出是低于上述關(guān)于我國圍產(chǎn)期孕婦GBS帶菌率的范圍的，這可能與樣本量不夠大以及標(biāo)本損失有關(guān)系。

GBS是圍產(chǎn)期孕婦群體最常見的感染致病菌，被感染后可以很輕松穿過絨毛膜，若孕婦在GBS篩查中檢出GBS陽性，在威脅自身的生命的同時(shí)，對新生兒也存在極大的生命威脅。曾有文獻(xiàn)報(bào)道對死亡新生兒肺部組織進(jìn)行GBS檢測，檢出率近70%，表明圍產(chǎn)期孕婦感染GBS是導(dǎo)致新生兒患肺部疾病死亡的重大威脅[4]。圍產(chǎn)期孕婦對GBS的篩查方法靈敏度高，可以很大程度上幫助臨床醫(yī)師確診GBS的感染，并積極采取抗感染治療，有效降低孕婦與新生兒的治病率?；谥拔墨I(xiàn)報(bào)道，本次研究通過對比PCR檢測法和顯色平板法，比較二者敏感度及陽性率。PCR法全稱聚合酶鏈反應(yīng)，原理即通過擴(kuò)增GBS特異性基因——CAMP[4]。本次研究中的孕婦樣本從醫(yī)生采樣到送檢驗(yàn)科的過程中可能要經(jīng)過等待期1～2 d的時(shí)間，在等待時(shí)間里，標(biāo)本中的細(xì)菌可能會發(fā)生降解或者死亡，因此在最終用的檢查結(jié)果中，GBS的檢出率可能會出現(xiàn)偏差。

關(guān)于GBS感染和耐藥性的相關(guān)研究表明，圍產(chǎn)期孕婦預(yù)防GBS感染的理想抗生素是青霉素、氨芐青霉素，若對以上藥物過敏的孕婦可以使用克林霉素或紅霉素，但近年來GBS對以上藥物的耐藥性逐年增加，固有或誘導(dǎo)耐藥以及GBS的ermB基因介導(dǎo)是主要的耐藥機(jī)制，因而臨床對與GBS耐藥應(yīng)加大監(jiān)測，改善治療方案。

GBS已是醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的導(dǎo)致羊膜腔感染及胎膜早破的致病菌[5]，孕婦出現(xiàn)這些并發(fā)癥之后，極易引發(fā)子宮腔感染，促進(jìn)子宮收縮，繼而導(dǎo)致晚期流產(chǎn)或早產(chǎn)等問題。因此要重視對孕婦的GBS篩查，運(yùn)用PCR檢測或顯色平板均可篩查，但值得注意的是，臨床運(yùn)用顯色平板篩查的靈敏度要顯著高于PCR檢測[6，7]。

綜上所述，在臨床工作中應(yīng)該對圍產(chǎn)期孕婦加強(qiáng)GBS篩查的教育，增加此類人群的篩查力度，如利用顯色平板法，由于較PCR法對GBS的篩查靈敏度明顯升高。

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收稿日期：2018-12-29;修回日期：2019-2-13

編輯/楊倩