劉英超 趙磊明 張秋月 張麗娜 任更樸

聊城市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 聊城 252600

吸煙嚴(yán)重危害人類身體健康，是引起呼吸系統(tǒng)疾病、心血管系統(tǒng)疾病的重要危險(xiǎn)因素之一。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme, ACE)與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(angiotensin converting enzyme 2, ACE2)是RAS系統(tǒng)中的重要組成部分，研究表明，ACE、ACE2在呼吸系統(tǒng)疾病和心血管系統(tǒng)疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用[1-3]。本研究擬通過測(cè)定長期吸煙者血液ACE、ACE2的含量，觀察長期吸煙對(duì)血液ACE、ACE2表達(dá)的影響，并進(jìn)一步探討吸煙引起呼吸系統(tǒng)以及心血管系統(tǒng)疾病的機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年10月—2018年3月，在我院健康查體者100名，均為成年男性。其中不吸煙者50名，長期吸煙者50名，長期吸煙是指平均每天吸煙10支以上，時(shí)間連續(xù)10年以上，現(xiàn)仍在吸煙者[4]。通過問卷調(diào)查完善相關(guān)資料，比如吸煙史(包括吸煙時(shí)間，每日吸煙量等)，家族史等；測(cè)量身高、體重、血壓，并計(jì)算體重指數(shù)(BMI，kg/m2)。兩組入選者血壓、肝腎功能、血糖測(cè)定結(jié)果均在正常參考值范圍內(nèi)。血壓異常、嚴(yán)重肝腎功能不全、血糖異常，以及考慮其它疾病可能的查體者不被列入本研究。

1.2 ACE、ACE2含量及生化指標(biāo)測(cè)定

入選者均于上午7-9時(shí)空腹采靜脈血。全自動(dòng)生化儀測(cè)定肝功、腎功、血糖；留取血清，通過ELISA實(shí)驗(yàn)測(cè)定血清中ACE、ACE2的含量。ELISA實(shí)驗(yàn)過程完全按照試劑說明書要求進(jìn)行操作，顯色完成后用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度和吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)一步計(jì)算ACE、ACE2濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，吸煙組與不吸煙組兩組入選者在年齡、BMI、收縮壓、舒張壓、空腹血糖等方面，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，詳見表1；兩組入選者肝、腎功能等生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果均無明顯異常，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 兩組間基本資料比較(n=50)

2.2 ACE、ACE2測(cè)定結(jié)果

ELISA測(cè)定結(jié)果顯示，與不吸煙組比較，長期吸煙組血清ACE含量明顯升高，ACE2含量明顯降低，ACE/ACE2顯著失衡，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，詳見表2。

表2 兩組間ACE、ACE2測(cè)定結(jié)果比較

3 討 論

吸煙是世界性的公共衛(wèi)生問題。吸煙是一些呼吸系統(tǒng)疾病和心血管系統(tǒng)疾病的重要危險(xiǎn)因素，長期吸煙可能會(huì)引起肺癌、慢性阻塞性肺疾病、冠心病、高血壓等多種疾病。一般認(rèn)為吸煙造成的危害是由于煙草中的有害成分(如尼古丁、焦油等)引起的，另外吸煙產(chǎn)生的一氧化碳(CO)和煙堿也是主要有害因素。隨著研究的不斷深入，越來越多的學(xué)者開始從分子、蛋白水平進(jìn)一步解釋吸煙引起各類疾病的原因：Cantelli G等認(rèn)為吸煙會(huì)明顯改變肺組織結(jié)構(gòu)，也可以改變細(xì)胞的形態(tài)[5]；李巧榮認(rèn)為吸煙可導(dǎo)致支氣管黏膜組織 IL-8、TNF-α表達(dá)增加，PPAR-γ表達(dá)減少，進(jìn)而引起肺功能下降[6]；屠春平等認(rèn)為吸煙使血栓風(fēng)險(xiǎn)增高可能與血漿sEPCR水平升高有關(guān)[7]；張璐等認(rèn)為血清抗血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)參與吸煙誘導(dǎo)肺氣腫大鼠形成[8]。吸煙引起機(jī)體某些分子以及蛋白水平的改變，越來越被學(xué)者們關(guān)注，成為新的研究熱點(diǎn)。

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2是RAS系統(tǒng)中的重要組成部分。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為RAS由血管緊張素原、腎素、血管緊張素Ⅰ、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶，血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)等分子組成，ACE-AngⅡ-AT1通路可通過增加氧自由基釋放、促進(jìn)血栓形成、促進(jìn)凋亡、促進(jìn)增殖、加重炎癥反應(yīng)等形式對(duì)組織造成損傷。近年來研究發(fā)現(xiàn)，RAS系統(tǒng)還包括一些新的酶類和肽類物質(zhì)，它們形成另外一條與ACE-AngⅡ-AT1軸作用相反的通路：即ACE2-Ang(1-7)-Mas軸通路[9]。此通路中，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2可催化AngⅡ生成Ang(1-7)，Ang(1-7)與受體Mas結(jié)合后可拮抗AngⅡ，具有舒張血管、抗增殖、抗纖維化、抗炎等作用，對(duì)組織損傷起到保護(hù)作用[10]。ACE2主要表達(dá)在人體肺組織、心血管組織以及腎組織中。ACE、ACE2相互制約和動(dòng)態(tài)平衡，對(duì)人體正常功能發(fā)揮著重要作用。

研究表明，高血壓、腎臟疾病、糖尿病以及腫瘤患者，ACE、ACE2表達(dá)會(huì)發(fā)生變化[11-12]，因此，以上疾病患者不被列入本次研究；由于女性符合長期吸煙標(biāo)準(zhǔn)者相對(duì)較少，亦有研究表明，女性雌激素水平也會(huì)對(duì)ACE、ACE2表達(dá)產(chǎn)生影響，所以本研究沒有選擇女性作為研究對(duì)象[13]。排除以上因素影響，我們研究結(jié)果顯示：長期吸煙可以引起ACE表達(dá)升高，ACE2表達(dá)降低，ACE/ACE2比例失衡。ACE/ACE2表達(dá)失衡，ACE-AngⅡ-AT1軸功能亢進(jìn)，造成氧自由基釋放增多，促進(jìn)血栓形成，促進(jìn)凋亡，促進(jìn)增殖，加重炎癥反應(yīng)，進(jìn)而造成組織損傷。劉英超等[14]認(rèn)為ACE/ACE2的表達(dá)失衡與血壓改變密切相關(guān)，降低ACE或提高ACE2的表達(dá)可能對(duì)防治高血壓具有重要意義；劉珍君等[15]認(rèn)為高表達(dá) ACE2基因的大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞能有效降低肺動(dòng)脈高壓大鼠肺動(dòng)脈壓力，且其治療作用優(yōu)于內(nèi)皮祖細(xì)胞；吳劍等[16]認(rèn)為ACE2與Ang1-7、Mas受體構(gòu)成ACE2-Ang(1-7)- Mas軸，其與ACE-AngⅡ-AT1軸的相互制約和動(dòng)態(tài)平衡，在心血管疾病中發(fā)揮著重要作用。

綜上，我們認(rèn)為吸煙引起ACE/ACE2表達(dá)失衡，可能是其引起呼吸系統(tǒng)和心血管疾病的原因之一。目前隨著研究的進(jìn)一步深入，學(xué)者們開始探索將ACE2-Ang(1-7)-Mas軸作為治療一些心血管疾病的新靶點(diǎn)[17]，我們推測(cè)，新靶點(diǎn)的研究成功，可能會(huì)對(duì)一些疾病的治療與預(yù)防起到重要作用。