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        注射用鹽酸萬古霉素與三種常用電解質(zhì)注射液的配伍穩(wěn)定性考察

        2019-05-21 12:30:30吳文華
        實(shí)用藥物與臨床 2019年4期
        關(guān)鍵詞:萬古霉素注射用容量瓶

        劉 鋼,秦 侃,袁 杰,吳文華

        0 引言

        萬古霉素(Vancomycin)屬糖肽類抗菌藥物,是目前治療耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、表皮葡萄球菌和耐藥腸球菌引起重癥感染的一線用藥[1-2],臨床主要用于上述致病菌引起的敗血癥、感染性心內(nèi)膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎、灼傷、手術(shù)創(chuàng)傷等淺表性繼發(fā)感染等的治療。萬古霉素臨床應(yīng)用中國專家共識(shí)(2011版)中推薦的臨床常用靜脈輸液配制方法為:注射用鹽酸萬古霉素0.5 g用10 ml滅菌注射用水溶解后,再用5%葡萄糖溶液或0.9%氯化鈉溶液載體稀釋成最終濃度為5 g/L的溶液,供靜脈滴注[3]。

        關(guān)于混合糖電解質(zhì)注射液(MSEI)、轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液(ISEI)、鈉鉀鎂鈣葡萄糖注射液(SPMCGI),臨床常通過非口服途徑為患者補(bǔ)充,以維持水分、電解質(zhì)和能量。重癥感染的患者容易出現(xiàn)電解質(zhì)紊亂,往往需要補(bǔ)充此類電解質(zhì)注射液[4],但是目前除了萬古霉素臨床應(yīng)用中國專家共識(shí)(2011版)中推薦的靜脈輸液配制方法外,尚沒有萬古霉素與上述3種電解質(zhì)注射液的相關(guān)配伍穩(wěn)定性報(bào)道,因此,本實(shí)驗(yàn)?zāi)M臨床用藥濃度,旨在不同條件下考察萬古霉素與上述3種電解質(zhì)注射液的配伍穩(wěn)定性,以期為臨床用藥提供參考。

        1 儀器與試藥

        1.1 儀器 Agilent 1260series四元梯度高效液相色譜儀和DAD檢測器(美國Agilent公司),PB-10型酸度計(jì)(德國Sartorius公司),XSE204型電子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司),H.H.S電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械五廠)。

        1.2 試藥 萬古霉素對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:130360-201302),注射用鹽酸萬古霉素(美國禮來公司,批號:C778985),混合糖電解質(zhì)注射液(江蘇正大豐海制藥有限公司,批號:1712252),轉(zhuǎn)化糖電解質(zhì)注射液(上海海尼藥業(yè)有限公司,批號:1801143),鈉鉀鎂鈣葡萄糖注射液(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司,批號:170421EK),磷酸二氫鉀(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號:20140114)。乙腈為色譜純,水為純化水,其余試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件 色譜柱:Thermo Scientific C18-ODS(100 mm×2.1 mm,3 μm);流動(dòng)相:乙腈-0.05 mol/L KH2PO4(pH 3.6)(6∶94);柱溫:30 ℃;檢測波長:236 nm;流速:0.8 ml/min;進(jìn)樣量:10 μl;萬古霉素對照品、空白溶液和供試品溶液的色譜圖見圖1。

        2.2 對照品溶液的制備 精密稱取萬古霉素對照品24.9 mg,置25 ml容量瓶中,流動(dòng)相溶解定容至刻度,搖勻即得對照品溶液。

        2.3 空白溶液的制備 向未含有注射用鹽酸萬古霉素的空白小瓶中加入10 ml注射用水,平行制備3份,再分別用MSEI、ISEI、SPMCGI溶解定容至100 ml容量瓶中,搖勻后在室溫下避光保存。

        2.4 供試品溶液的制備 模擬臨床用藥濃度,向含有注射用鹽酸萬古霉素0.5 g的小瓶中加入10 ml注射用水溶解,平行制備3份,再分別用MSEI、ISEI、SPMCGI溶解定容至100 ml容量瓶中,搖勻后在室溫下避光保存。

        2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取對照品溶液1 ml,置于10 ml容量瓶中,流動(dòng)相溶解定容至刻度,搖勻,HPLC分別自動(dòng)進(jìn)樣1、2、5、10、15、20 μl,按“2.1”項(xiàng)下方法測定萬古霉素的含量,以萬古霉素濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo),得回歸方程Y=1 548.8 X+4.201 4(r=0.999 9,n=6),表明萬古霉素在0.099 6~1.992 0 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

        2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一對照品溶液,按“2.1”項(xiàng)下方法分別進(jìn)樣6次,測定萬古霉素的含量,結(jié)果RSD=0.93%。

        2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)下方法分別進(jìn)樣6次,測定萬古霉素的含量,結(jié)果RSD=1.27%。

        圖1 萬古霉素對照品、空白溶液和供試品溶液的色譜圖

        注:A.萬古霉素對照品,B.MSEI空白溶液,C.MSEI供試品溶液,D.ISEI空白溶液,E.ISEI供試品溶液,F(xiàn).SPMCGI空白溶液,G.SPMCGI供試品溶液;1、2、3、4均為萬古霉素

        2.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密吸取已知含量的萬古霉素供試品溶液0.5、1.0、1.5 ml和對照品溶液0.5、1.0、1.5 ml至100 ml容量瓶中,配制為低、中、高濃度各3份,按“2.1”項(xiàng)下方法測定萬古霉素的含量,結(jié)果見表1。

        表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

        2.9 配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)

        2.9.1 外觀、pH值變化 按“2.4”項(xiàng)下方法配制供試品溶液,于藥液配好后即刻(0 h)及1、2、4、6、8 h取樣,測定3種不同配伍液的pH值,同時(shí)觀察配伍液外觀及澄明度,結(jié)果見表2、表3。

        2.9.2 含量測定結(jié)果 按“2.4”項(xiàng)下方法配制供試品溶液。將3種配伍液分別置于25 ℃和40 ℃恒溫水浴鍋中,采取避光和光照2種儲(chǔ)存條件進(jìn)行處理。分別按上述儲(chǔ)存條件于藥液配好后即刻(0 h)及1、2、4、6、8 h取樣,測定3種不同配伍液中萬古霉素的含量變化,以配制后0 h的含量為100%,換算出其他時(shí)間點(diǎn)的百分含量,結(jié)果見表4、表5。

        表2 三種不同配伍液的pH值

        3 討論

        3.1 含量測定方法的選擇 《中國藥典》(2015年版)中萬古霉素項(xiàng)下的含量測定方法為抗生素微生物檢定法。其對于醫(yī)療機(jī)構(gòu)來說具有步驟繁瑣、耗時(shí)長、結(jié)果受多種因素影響等缺點(diǎn)。高效液相色譜法具有靈敏度高、重復(fù)性好、對微量濃度樣本具有高靈敏度等優(yōu)點(diǎn),更適合在實(shí)際工作中進(jìn)行操作使用[5-6],故本實(shí)驗(yàn)中選用高效液相色譜法進(jìn)行萬古霉素的含量測定。

        表3 三種不同配伍液的外觀及澄明度

        表4 25 ℃下3種配伍液的相對百分含量變化(%)

        表5 40 ℃下三種配伍液的相對百分含量變化(%)

        3.2 流動(dòng)相的篩選 本實(shí)驗(yàn)參考了多篇文獻(xiàn)中的方法進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),篩選了磷酸鹽緩沖液的pH值(3.2、3.4、3.6、3.8)和濃度(0.025、0.05、0.1 mol/L),結(jié)果顯示,酸性越大、鹽濃度越大,萬古霉素的保留越強(qiáng),分離越好;但酸性過大或鹽濃度過高對色譜系統(tǒng)影響較大,故最終選定0.05 mol/L KH2PO4(pH 3.6)作為流動(dòng)相中的磷酸鹽緩沖液。

        另通過預(yù)試驗(yàn)對2種流動(dòng)相的比例進(jìn)行了篩選,結(jié)果顯示,采用乙腈-0.05 mol/L KH2PO4(pH 3.6)(6∶94),溶劑峰和藥物峰分離完全,無雜質(zhì)干擾,峰形和主藥保留時(shí)間較佳[7-9]。

        3.3 對照品溶媒的選擇 預(yù)試驗(yàn)過程中,選用甲醇溶解萬古霉素對照品并進(jìn)行含量測定,發(fā)現(xiàn)甲醇溶劑峰對萬古霉素對照品主峰干擾較大,遂改用流動(dòng)相溶解萬古霉素對照品,對照品主峰峰形較好。

        3.4 三種配伍液的穩(wěn)定性 本實(shí)驗(yàn)通過對注射用鹽酸萬古霉素與3種常用電解質(zhì)注射液的配伍穩(wěn)定性考察,結(jié)果顯示,三種不同配伍液在室溫條件下8 h內(nèi)外觀及pH值均無明顯變化;25 ℃下8 h內(nèi)三種不同配伍液在避光、光照條件下萬古霉素含量與初始含量相比均無明顯變化;40 ℃下6 h后三種不同配伍液在避光、光照條件下萬古霉素含量與初始含量相比均有小幅降低。

        4 結(jié)論

        高效液相色譜法可以用于萬古霉素的含量測定,注射用鹽酸萬古霉素可以與三種常用電解質(zhì)注射液配伍使用,但應(yīng)控制環(huán)境溫度,一般情況下不應(yīng)在超過30 ℃的環(huán)境下配伍使用,并且配制后的溶液應(yīng)盡量在6 h內(nèi)使用。

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