程 果，趙美雪，朱前磊，張利平，宋 丹，楊海波，劉 敏，方先珍，閆若潛，班付國

（河南省動物疫病預(yù)防控制中心，河南鄭州 450000）

實驗室檢測能力比對是評價和提高實驗室技術(shù)能力及管理水平的重要手段[1]。為進一步加強河南省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室管理，提高全省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測診斷能力和水平，建立省、市、縣三級動物疫情監(jiān)測預(yù)警機制和風(fēng)險評估模型，實施定點、定量、跟蹤監(jiān)測模式，河南省畜牧局于2018年9月組織開展了全省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對。全省共有18個省轄市、10個省直管縣/市和117個縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室參加，并在規(guī)定時間內(nèi)完成了比對盲樣領(lǐng)取、實驗室檢測、報告出具和結(jié)果上報。比對結(jié)果客觀地反映了河南省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室的技術(shù)水平和存在的問題，為進一步完善獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室管理體系，健全動物疫情監(jiān)測預(yù)警機制和風(fēng)險評估模型提供政策建議[2]。

1 材料與方法

1.1 比對項目

按照河南省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對方案的有關(guān)要求，省轄市、省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對均設(shè)置了7個項目，分別為：禽流感、A型口蹄疫、豬偽狂犬gB抗體和牛布魯氏菌病抗體檢測，口蹄疫、禽流感和塞內(nèi)卡谷病毒核酸檢測；縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室比對共設(shè)置了5個項目，分別為：O型口蹄疫、A型口蹄疫、豬藍耳病、新城疫和布魯氏菌病抗體檢測。

1.2 比對方法和標準

省轄市、省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對項目涉及5種動物疫病、5種檢測方法（表1）。縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室比對項目涉及4種動物疫病、5種檢測方法（表2）。所選比對項目為國家參考實驗室或?qū)I(yè)實驗室推薦方法，比對試劑大部分由各實驗室自行準備。

1.3 比對樣品

每個檢測項目均在3～5個參考值不同的盲樣中，隨機抽取5份作為一組比對樣品，比對樣品由國家參考實驗室和河南省動物疫病預(yù)防控制中心分別進行制備，并由河南省動物疫病預(yù)防控制中心驗證、編號和分裝。省轄市、省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對樣品參考值見表3，縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室比對樣品參考值見表4。

表1 省轄市、省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對項目

表2 縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室比對項目

表3 省轄市、省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對樣品參考值

表4 縣（區(qū)）級獸醫(yī)實驗室比對樣品參考值

1.4 評判標準

相關(guān)比對樣品項目評判標準見表5。

2 比對結(jié)果

2.1 省轄市級獸醫(yī)實驗室結(jié)果

18個省轄市級獸醫(yī)實驗室中有12個實驗室所有比對項目的檢測結(jié)果正確率均100%。但個別實驗室檢測結(jié)果的正確率較低，1個實驗室禽流感抗體、1個實驗室禽流感病毒核酸和1個實驗室塞內(nèi)卡谷病毒核酸檢測結(jié)果正確率均低于60%（表6）。

表5 比對樣品項目評判標準

2.2 省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室結(jié)果

10個省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室中有3個實驗室所有比對項目的檢測結(jié)果均100%正確。但個別實驗室檢測結(jié)果的正確率較低，1個實驗室禽流感抗體和1個實驗室禽流感病毒核酸的結(jié)果正確率均低于60%（表7）。

2.3 縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室結(jié)果

117個縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室中有50個實驗室所有比對項目的檢測結(jié)果均100%正確。但個別實驗室檢測結(jié)果的正確率較低，其中17個實驗室新城疫抗體、7個實驗室O型口蹄疫抗體、6個實驗室A型口蹄疫抗體、5個實驗室布魯氏菌病抗體和3個實驗室豬藍耳病抗體檢測結(jié)果平均正確率均低于60%（表8）。

表6 省轄市級獸醫(yī)實驗室比對結(jié)果

3 討論

3.1 從參賽比率來看

省轄市、省直管縣/市和縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室均報名參加此次能力比對，參賽比率為100%。這說明省轄市、省直管縣/市和縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室均具備正常開展實驗室監(jiān)測和檢測的條件，為構(gòu)建省、市、縣三級動物疫情監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)奠定了基礎(chǔ)。

3.2 從總體結(jié)果來看

省轄市級、省直管縣/市級、縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室所有比對項目檢測結(jié)果平均正確率分別為97.30%、93.68%、91.97%。說明全省大部分獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室均已具備相應(yīng)的檢測能力，能夠為河南省動物疫情風(fēng)險評估提供技術(shù)支撐，但市、縣兩級實驗室檢測水平存在一定的差距，特別是縣級獸醫(yī)實驗室檢測診斷能力和水平有待進一步提高。

3.3 從不同項目檢測結(jié)果來看

省轄市、省直管縣/市和縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室定量檢測結(jié)果與參考值的平均正確率均低于定性檢測結(jié)果。因定量檢測更精確，易受人員操作、儀器和環(huán)境的影響，說明獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室專業(yè)技術(shù)人員需進一步提升實際操作技能，加強儀器設(shè)備的更新、保養(yǎng)和維護，避免人為和儀器等因素對檢測結(jié)果的影響，確保結(jié)果的準確性。

3.4 從參加比對項目設(shè)置來看

省轄市級獸醫(yī)實驗室已全部具備血清學(xué)和病原學(xué)檢測能力，省直管縣/市和縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室均已具備血清學(xué)檢測能力，但只有部分省直管縣/市和縣/區(qū)級實驗室具備病原學(xué)檢測能力。說明省直管縣/市和縣/區(qū)級獸醫(yī)實驗室病原學(xué)檢測能力較弱，雖然具備病原學(xué)檢測能力的縣級實驗室逐年增加，但跟實際工作需要還有一定差距，要進一步加快提升分子生物學(xué)檢測能力，配備相應(yīng)的儀器設(shè)備。

3.5 從檢測試劑和比對樣品來看

本次大部分比對項目的檢測試劑由各實驗室自行準備，雖然生產(chǎn)廠家一致，但存在試劑盒批次不同的問題；另外，因為沒有條件將比對樣品制成凍干樣，樣品經(jīng)過分裝、暫存和運輸，最終到達實驗室的穩(wěn)定性不能確保[3]。上述內(nèi)容也是造成比對結(jié)果有偏差的原因。

表7 省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對結(jié)果

表8 省直管縣/市級獸醫(yī)實驗室比對結(jié)果

3.6 從檢測人員來看

縣級獸醫(yī)實驗室專業(yè)技術(shù)人員普遍嚴重不足，特別是高學(xué)歷專業(yè)技術(shù)人員缺乏，且存在人員老齡化和一人多崗現(xiàn)象，加之任務(wù)重、風(fēng)險高、待遇低，導(dǎo)致實驗室專職人員流動性大，影響了縣級獸醫(yī)實驗室檢測結(jié)果的準確性。

3.7 從儀器設(shè)備來看

由于縣級實驗室經(jīng)費投入有限，實驗室基本均購買為國產(chǎn)儀器設(shè)備，加之儀器設(shè)備閑置率較高，不經(jīng)常維護保養(yǎng)，這也是導(dǎo)致結(jié)果有偏差的原因。

4 建議

一是加大實驗室資金投入，強化各級動物疫控機構(gòu)實驗室建設(shè)，迅速配置必需儀器設(shè)備，全面提升檢驗檢測能力，切實做到主動監(jiān)測、全面監(jiān)測、科學(xué)監(jiān)測，以更好發(fā)揮動物疫情預(yù)警預(yù)報的職能。二是增強實驗室內(nèi)外部管理水平，全面貫徹實驗室質(zhì)量管理、生物安全管理等各項制度，規(guī)范實驗活動，健全實驗室記錄檔案，強化能力比對，確保實驗室規(guī)范運行。三是提升技術(shù)人員專業(yè)素養(yǎng)，有計劃引進高素質(zhì)的專業(yè)人才充實壯大實驗室檢測隊伍，并對現(xiàn)有的實驗室技術(shù)人員加強培訓(xùn)，使其不斷更新知識體系，提高實際工作能力。四是加強技術(shù)支撐，完善檢測標準體系，建議農(nóng)業(yè)農(nóng)村部盡快協(xié)調(diào)組織參考實驗室和各省動物疫病預(yù)防控制中心加快檢測方法、標準和標準物質(zhì)的研究，盡快建立動物疫病檢測標準體系，確保檢測質(zhì)量。