張立強(qiáng) 丁桂珍 鄧 平 余少梅 魏朝輝 羅楊志 喻運(yùn)珍 周偉東 艾桃山

近年來，隨著對蝦集約化養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展，水環(huán)境惡化，病害頻發(fā)，抗生素及其他藥物的使用已產(chǎn)生細(xì)菌抗藥性及藥物殘留等問題，嚴(yán)重影響了對蝦產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。為此，尋找無公害藥物替代品成為研究熱點(diǎn)。中草藥和益生菌因具有促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物生長、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能及抗病力等功效，廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。研究表明，姜黃素和益生菌共同使用具有協(xié)同增效作用，姜黃素可促進(jìn)益生菌增殖，益生菌可促進(jìn)生物體對姜黃素的吸收和利用。有關(guān)姜黃素和益生菌聯(lián)合使用在畜禽上的研究較多，在水產(chǎn)方面的研究僅見在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）、羅非魚（Oreochromis niloticus）和建鯉（Cyprinus carpio）方面的報(bào)道。本研究在凡納濱對蝦飼料中添加一定比例的姜黃素復(fù)合益生菌制劑，研究姜黃素復(fù)合益生菌制劑對凡納濱對蝦生長及成活率的影響，為姜黃素復(fù)合益生菌制劑在對蝦養(yǎng)殖業(yè)中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用凡納濱對蝦，同批次，同齡，同規(guī)格，體質(zhì)量（7.00±1）g，由泰國瑪希隆大學(xué)提供，挑選健康、規(guī)格均一、無特定病原體的對蝦暫養(yǎng)7d后用于試驗(yàn)，暫養(yǎng)條件：溫度（28.5±2）℃，鹽度為5，過濾、消毒海水。

姜黃素 姜黃素由武漢中博水產(chǎn)生物技術(shù)有限公司提供，粉碎，過孔徑180μm篩。

菌株 枯草芽孢桿菌由武漢中博水產(chǎn)生物技術(shù)有限公司提供。

基礎(chǔ)飼料，某品牌的凡納濱對蝦料，營養(yǎng)指標(biāo)（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）：水分10.53%，粗蛋白43.00%，粗脂肪8.41%，粗灰分0.95%，粗纖維2.66%。

1.2 益生菌制劑的制備

1.2.1 枯草芽孢桿菌制劑的制備

菌種活化：取枯草芽孢桿菌菌種，以體積分?jǐn)?shù)1%接種于營養(yǎng)肉湯中，于搖床中，在37℃、200r/min的條件下培養(yǎng)24h，再二次活化12h后，放置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 試驗(yàn)飼料制備

飼料A：將基礎(chǔ)飼料與枯草芽孢桿菌制劑混合，使枯草芽孢桿菌的含量為2×107cfu/g，與適量黏合劑、純凈水混勻，晾干，現(xiàn)配現(xiàn)用。

飼料B：將基礎(chǔ)飼料與枯草芽孢桿菌制劑和姜黃素混合，使枯草芽孢桿菌的含量為2×107cfu/g，姜黃素的含量為1%，與適量黏合劑、純凈水混勻，晾干，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將凡納濱對蝦隨機(jī)分成3個(gè)組，每個(gè)組設(shè)3個(gè)重復(fù)組。標(biāo)記為A、B、NC組，按表1所示分別飼喂基礎(chǔ)飼料和試驗(yàn)飼料。

1.4 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在泰國瑪希隆大學(xué)的對蝦養(yǎng)殖池塘中進(jìn)行，周期為56d。依照1.3的方案按體質(zhì)量的8%～10%投喂相應(yīng)飼料，投飼時(shí)間分別為6：00、10：00、19：00和23：00，早晚的投喂量占日投喂量的60%～70%。每周根據(jù)對蝦的生長狀況調(diào)節(jié)投飼量。試驗(yàn)期間不間斷充氣，每兩天換一次水。水溫為（28.5±2）℃。

表1 試驗(yàn)飼料

1.5 生長指標(biāo)測定

每兩個(gè)星期對對蝦稱重一次。

增重率＝（終末體質(zhì)量—初始體質(zhì)量）/初始體質(zhì)量×100%；

成活率＝終末對蝦數(shù)/初始對蝦數(shù)×100%。

2 結(jié)果

姜黃素益生菌制劑對凡納濱對蝦生長性能指標(biāo)的影響見表2。A、B組凡納濱對蝦的成活率和增重率均高于NC組，且B組對凡納濱對蝦生長性能指標(biāo)的影響效果優(yōu)于A組，說明飼料中添加益生菌制劑、姜黃素益生菌制劑均可以顯著促進(jìn)凡納濱對蝦生長，以添加姜黃素復(fù)合益生菌制劑的促生長效果為最佳。

表2 姜黃素益生菌制劑對凡納濱對蝦生長及成活率的影響

3 討論

益生菌可產(chǎn)生維生素、氨基酸、促生長因子、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等多種酶，促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生長。李曉英等在飼料中添加復(fù)合芽孢桿菌時(shí)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組中國對蝦（Fenneropenaeus chinensis）的平均生長速度為0.15g/d，顯著高于對照組（0.12g/d）；朱學(xué)芝等將乳酸桿菌（Lactobacillus sporogenes）、地衣芽孢桿菌+枯草芽孢桿菌（等比例）、復(fù)合菌蝦樂333添加于飼料中或投入養(yǎng)殖水體中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三者均可促進(jìn)凡納濱對蝦的生長。胡毅等研究飼料中添加單一益生菌和復(fù)合益生菌，結(jié)果表明，復(fù)合益生菌飼喂組凡納濱對蝦的特定生長率高于對照組（P＜0.05），而單一益生菌飼喂組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。于明超等研究表明，飼料中添加姜黃素和芽孢桿菌促進(jìn)了凡納濱對蝦的生長，且共同添加的效果優(yōu)于單獨(dú)添加。

本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果相一致，證明飼料中添加芽孢桿菌制劑、姜黃素復(fù)合益生菌制劑均可促進(jìn)凡納濱對蝦的生長，姜黃素益生菌制劑組的促生長效果優(yōu)于益生菌制劑組。這可能是因?yàn)榻S素和益生菌具有協(xié)同增效作用。一方面，姜黃素富含多種營養(yǎng)物和一些未知的誘食因子，可以增強(qiáng)養(yǎng)殖動(dòng)物的食欲，促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體代謝和消化酶的分泌，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率，從而加速養(yǎng)殖動(dòng)物生長發(fā)育，降低飼料系數(shù)；另一方面，益生菌制劑中的芽孢桿菌可產(chǎn)生多種消化酶類，可提高動(dòng)物消化道內(nèi)消化酶的生物活性，促使動(dòng)物機(jī)體更好地消化和吸收胃腸道中的營養(yǎng)物質(zhì)，提高飼料利用率。