盛振海，張玉榮，袁曉亮，何思陽(yáng)，連 茹，徐金倫，孫文娟

（上海市公安局 物證鑒定中心，上海 200083）

新精神活性物質(zhì)（New Psychoactive Substances，NPS）是指未被國(guó)際公約管制，但存在濫用現(xiàn)象并會(huì)對(duì)公眾健康造成威脅的物質(zhì)[1]。目前國(guó)內(nèi)外常見新精神活性物質(zhì)主要有合成大麻素類與卡西酮類[2]兩大類。這些化合物主要依據(jù)管制毒品化學(xué)機(jī)構(gòu)改造而得，且品種繁多更新快速，給禁毒防控體系帶來(lái)巨大挑戰(zhàn)[3]。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）是檢測(cè)合成大麻素類與卡西酮類新精神物質(zhì)的主要方法之一[4-7]，吳忠平等[8]報(bào)道了氣相色譜-質(zhì)聯(lián)結(jié)合準(zhǔn)確質(zhì)量測(cè)定快速鑒定17種合成大麻素。本文采用傅里葉變換紅外吸收光譜法（FTIR）、GC-MS和液相色譜-線性離子阱質(zhì)譜-串聯(lián)軌道阱高分辨質(zhì)譜法（UHPLC-LTQ-Orbitrap MS）以及核磁共振波譜法（NMR），對(duì)查獲的疑似新精神活性物質(zhì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，綜合分析獲得的檢測(cè)信息來(lái)鑒定新精神活性物質(zhì)。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

Nicolet iS10型傅立葉變換紅外光譜儀（FTIR，美國(guó)Thermofisher公司，配Smart OMNI采樣器及相關(guān)的紅外光譜圖譜庫(kù)）；Varian450GC/300MSD型氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS/MS，美國(guó) Varian公司產(chǎn)品，配自動(dòng)進(jìn)樣器）；Accela UHPLC液相色譜儀和 Thermo Scientific LTQ-Orbitrap XL組合型高分辨質(zhì)譜儀系統(tǒng)，配自動(dòng)進(jìn)樣器（UHPLC-LTQOrbitrap XL，美國(guó) ThermoFisher公司）；JNM-ECS400型核磁共振儀（NMR，日本電子公司，400MHZ）；SB5200DT型超聲清洗器（上海必能信超聲有限公司產(chǎn)品）；5415D型臺(tái)式高速離心機(jī)（美國(guó)Eppendorf公司，最大轉(zhuǎn)速14 000 r/min）；醫(yī)用離心機(jī)（國(guó)產(chǎn)，最大轉(zhuǎn)速4 000 r/min）；Vortex-Genie2型漩渦混合器（美國(guó)Scientific Industries公司）。

1.2 試劑與材料

甲醇（分析純）；乙腈（色譜純）；甲酸銨（優(yōu)級(jí)純）；甲酸（色譜純）；UHPLC試驗(yàn)用水為一級(jí)水；1.0 mg/mL SKF525a（美國(guó) Sigma-Aldrich公司，可溯源內(nèi)標(biāo)物質(zhì)）儲(chǔ)備溶液：精確稱取10 mg SKF525a于10 mL具塞玻璃容量瓶?jī)?nèi)，用甲醇溶解并稀釋至刻度，冰箱冷藏保存，有效期12個(gè)月；0.02mg/mL SKF525a內(nèi)標(biāo)工作溶液：吸取1.0 mg/mL SKF525a內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液，用甲醇稀釋，冰箱冷藏保存，有效期3個(gè)月。氘代二甲基亞砜（美國(guó) Sigma-Aldrich公司，核磁共振波譜用）；塑料及玻璃試管等。

1.3 儀器條件

1.3.1 GC-MS條件

色譜柱：CP-SIL8MS石英毛細(xì)柱（0.25mm×30m，0.25 μm）；柱溫：80℃，保持 1 min，以 20℃/min升至280 ℃，保持 24 min；氦氣（He）流速 1.0 mL/min，恒流；進(jìn)樣口溫度：260℃；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，0~1 min 不分流，1 min后分流比 50∶1；進(jìn)樣量 1.0 μL。

電子轟擊（EI）離子源；電子能量 70 eV；傳輸線溫度280℃；離子源溫度230℃；Manifold溫度：40 ℃；質(zhì)量掃描范圍 m/z 40～600；閾值：50；掃描方式：SCAN全掃描。

1.3.2 UHPLC-LTQ-Orbitrap MS條件

色譜柱：Hypersil Gold C18色譜柱（100 mm×2.1 mm×1.9μm）；流動(dòng)相A：2md/L甲酸銨和 0.05%甲酸的水溶液；流動(dòng)相B：2 md/L甲酸銨和0.05%甲酸的乙腈；流速 250 μL/min ；進(jìn)樣量：10 μL 。流動(dòng)相梯度洗脫系統(tǒng)平衡時(shí)間程序?yàn)?～18min，95%～30%（A），5%～70% （B）；18～20 min，30%～0 （A），70%～100%（B）；20～23 min，0～95%（A），100%～5%（B）。

質(zhì)量分析器：FTOrbitrap；離子化方式：ESI，正離子；噴霧電壓：4.0kv；管狀透鏡電壓：120v；鞘氣壓力：2.413×105Pa；輔助氣流量：160L/h；質(zhì)量范圍m/z50～500。靜電場(chǎng)軌道阱高分辨掃描（分辨率R=30000）。歸一化能量：35%。掃描事件（平行模式）事件1：靜電場(chǎng)軌道阱的高分辨掃描（R=30000）；事件2：事件1中最強(qiáng)離子強(qiáng)度二級(jí)碎片離子的線性離子阱掃描。

1.3.3 FTIR條件

光譜掃描范圍：4 000～680 cm-1；掃描次數(shù)：5次；分辨率：8 cm-1；采集時(shí)間：＜5 sec；檢測(cè)器：DTGS。

1.3.4 核磁條件

1H（400 MHz），以氘代二甲基亞砜（DMSO-d6）為溶劑。

1.4 樣品處理

實(shí)驗(yàn)樣品為查獲的白色粉末。

取粉末樣品約10mg，置于2mL的塑料高速離心試管內(nèi)，加入1mLSKF525a內(nèi)標(biāo)工作溶液（0.02mg/mL），離心半徑r=3.5cm，超聲萃取1min，14000r/min高速離心60s，吸取上清液移入自動(dòng)進(jìn)樣小瓶?jī)?nèi)，分別供GC-MS和 UHPLC-LTQ-Orbitrap MS檢測(cè)。

取適量樣品，直接置于傅里葉變換紅外光譜儀專用Smart OMNI采樣器樣品臺(tái)上，壓下反射柄后供FTIR檢測(cè)。

取樣品置于玻璃試管內(nèi)，加入氘代二甲基亞砜（DMSO-d6）溶液 0.5 mL，使樣品充分浸泡溶解，離心后取上清液置于核磁管中供NMR檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 GC-MS分析結(jié)果

在GC-MS檢測(cè)條件下，總離子流圖和質(zhì)譜圖見圖1~2。相關(guān)的質(zhì)譜庫(kù)檢索比對(duì)結(jié)果見圖3。

樣品總離子流色譜圖（圖1）中在 tR=18.954 min處出現(xiàn)未知 A組分的色譜峰，內(nèi)標(biāo)物（SKF525a）在tR=12.888 min處出峰。樣品中A組分的特征碎片離子 m/z 241（基峰）、326、145、242、55（圖 2）。 樣品中A組分及內(nèi)標(biāo)物的特征碎片離子與相應(yīng)豐度比數(shù)據(jù)信息見表1所示。

圖1 樣品GC-MS檢測(cè)總離子流色譜圖

圖2 樣品A組分（tR＝18.954min）的質(zhì)譜圖

圖3 SWGDRUG新精神活性物質(zhì)譜庫(kù)檢索 “MAB-CHMINACA”質(zhì)譜圖

表1 樣品中A組分及內(nèi)標(biāo)物的特征碎片離子與相應(yīng)豐度比

樣品中A組分質(zhì)譜圖經(jīng)Cayman Spectral Library-NIST質(zhì)譜庫(kù)進(jìn)行檢索，得到匹配檢索結(jié)果顯示，A組分與“MAB-CHMINACA”的質(zhì)譜圖比對(duì)一致（圖2）；樣品中A組分質(zhì)譜圖經(jīng)與國(guó)際毒品科學(xué)工作小組（SWGDRUG）新精神活性物質(zhì)質(zhì)譜圖庫(kù)中收錄的“MAB-CHMINACA”的質(zhì)譜圖（圖3）也比對(duì)一致。 MABCHMINACA的化學(xué)名稱為N-（1-amino-3，3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl）-1-（cyclohexylmethyl）-1H-indazole-3-carboxamide，分子式 C21H30N4O2，分子量370.5。

2.2 UHPLC-LTQ-Orbitrap MS分析結(jié)果

利用超高速液相色譜-線性離子阱-傅立葉轉(zhuǎn)換軌道阱質(zhì)譜聯(lián)用儀（UHPLC-LTQ-Orbitrap MS）在選定的測(cè)試條件下檢測(cè)到樣品A組分的精確質(zhì)量數(shù)[M+H]+為371.2441，檢測(cè)到A組分的數(shù)據(jù)信息見表2所示。

2.3 FTIR分析結(jié)果

在FTIR檢測(cè)條件下，得到的紅外光譜圖及譜庫(kù)檢索結(jié)果見圖4。SWGDRUG新精神活性物質(zhì)紅外光譜庫(kù)中的比對(duì)結(jié)果見圖5。

可疑樣品的FTIR光譜圖經(jīng)紅外光譜庫(kù)檢索與“MAB-CHMINACA”得到一致結(jié)果（圖 4）。 與國(guó)際毒品科學(xué)工作小組（SWGDRUG）新精神活性物質(zhì)庫(kù)中“MAB-CHMINACA”FTIR光譜圖比較一致（圖 5）。FTIR特征吸收峰數(shù)據(jù)比較見表3。

表2 樣品A組分精確質(zhì)量數(shù)檢測(cè)結(jié)果

圖4 樣品FTIR光譜圖和譜庫(kù)檢索圖

圖5 SWGDRUG新精神活性物質(zhì)庫(kù)中“MAB-CHMINACA”FTIR光譜圖

表3 樣品和SWGDRUG庫(kù)中“MAB-CHMINACA”的FTIR特征吸收峰數(shù)據(jù)

由表3可以看出樣品紅外特征吸收峰波數(shù)與“MAB-CHMINACA”紅外特征吸收峰波數(shù)基本一致。在2 000～680 cm-1區(qū)域內(nèi)比對(duì)特征明顯，1 649 cm-1處出現(xiàn)明顯的酰胺基團(tuán)中的C=O吸收峰。

2.4 1H NMR分析結(jié)果

在NMR檢測(cè)條件下，得到的1H NMR圖譜及樣品結(jié)構(gòu)解析圖分別見圖6～7。SWGDRUG新精神活性物質(zhì)庫(kù)中“MAB-CHMINACA”的1H NMR圖見圖8。

可疑樣品用氘代二甲基亞砜（DMSO-d6）溶液浸泡溶解后，核磁共振檢測(cè)得到1H NMR譜圖（圖6）和樣品結(jié)構(gòu)解析圖（圖7），與國(guó)際毒品科學(xué)工作小組（SWGDRUG）新精神活性物質(zhì)庫(kù)中“MABCHMINACA”的1H NMR譜圖比對(duì)一致（圖8）。

進(jìn)一步解析樣品1H NMR譜圖，圖6中 δ（ppm）2.510為氘代二甲基亞砜（DMSO-d6）的溶劑峰，δ（ppm）3.351為 H2O的峰。核磁譜圖對(duì)樣品的結(jié)構(gòu)解析以及與標(biāo)準(zhǔn)核磁譜圖比對(duì)，進(jìn)一步驗(yàn)證了該可疑樣品是“MAB-CHMINACA”。

圖6 1H NMR圖譜

2.5 新精神活性物質(zhì)“MAB-CHMINACA”的分子結(jié)構(gòu)

經(jīng)過(guò) GC-MS法、UHPLC-LTQ-Orbitrap MS法、FTIR法和1H NMR法檢測(cè)綜合分析后，此樣品鑒定為合成大麻素類新精神活性藥物 “MAB-CHMINACA”?！癕AB-CHMINACA”分子結(jié)構(gòu)與另一種合成大麻素類新精神活性藥物 “AB-CHMINACA”的分子結(jié)構(gòu)極為相似，具有相同母體結(jié)構(gòu)，兩者分子結(jié)構(gòu)圖比較見圖9。

2.6 新精神活性物質(zhì)“MAB-CHMINACA”的鑒定

合成大麻素類新精神活性藥物“MAB-CHMINACA”目前并未列入我國(guó)《非藥用類麻醉藥品和精神藥品管制品種增補(bǔ)目錄》（2015年版），但這種物質(zhì)在我國(guó)和國(guó)外已經(jīng)開始濫用，西方國(guó)家普遍將其列入違禁藥品目錄?！癕AB-CHMINACA”結(jié)構(gòu)上類似于另一種新精神活性藥物“AB-CHMINACA”，均屬于合成大麻素類新精神活性物質(zhì)，其藥理作用與大麻毒品類似，且精神活性更高[9]。攝入大麻素類物質(zhì)會(huì)使人產(chǎn)生興奮愉悅感并改變?nèi)说母兄到y(tǒng)。攝入大麻素類物質(zhì)過(guò)量會(huì)導(dǎo)致高血壓焦慮等中毒癥狀[10]。我國(guó)已于2013年將12種大麻素類物質(zhì)如JHW-018、JHW-250、AM-2201 等列為第一類精神藥品管制[11]。

圖7 結(jié)構(gòu)解析圖

圖8 SWGDRUG新精神活性物質(zhì)庫(kù)中“MAB-CHMINACA”的1H NMR圖

圖9 “MAB-CHMINACA”與“AB-CHMINACA”新精神活性物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)圖

3 結(jié)論

對(duì)于未知新精神活性物質(zhì)的鑒定，采用GCMS、UHPLC-LTQ-Orbitrap MS、FTIR 結(jié)合核磁共振波譜技術(shù)檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單快捷、分析結(jié)果準(zhǔn)確，適用性好，為新精神活性物質(zhì)提供了科學(xué)、準(zhǔn)確的鑒定手段。