陳 俊,葛曉瑾,付 鈺,陳隨清**
(1. 河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 鄭州 450046;2. 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所 鄭州 450008)
蘭花根為蘭科植物建蘭Cymbidium ensifolium (L.)Sw.、春蘭Cymbidium goeringii (Rchb. f.) Rchb. f.、蕙蘭Cymbidium faberi Rolfe 等的根。根據(jù)古籍《本草綱目》記載:“其氣清香,生津止渴,潤肌肉,治消渴膽癉”[1]。蘭科蘭屬植物通常為觀賞花卉,但研究認(rèn)為其根、葉、花、果及種子均有一定的藥用價值,其中蘭花根性辛、微寒,有清熱利濕、活血止血、解毒殺蟲之功效。有文獻(xiàn)指出,蘭花根可治療肺結(jié)核、肺膿腫扭傷等,亦可用于接骨[2-3]。
現(xiàn)代民間醫(yī)者有用蘭花根配伍治療疾病的經(jīng)驗及部分案例[4-5],例如:蘭花根配伍卷柏、野菊花,用以治療鼻咽癌后遺癥;蘭花配伍白茅根、山豆根、蒲公英,用以治療喉癌放療后遺癥;蘭花配伍夏枯草、靈仙、半枝蓮、白花蛇舌草,用以治療食道癌放療后患者;蘭花根配伍茅根、冬瓜皮,用以治療泌尿系統(tǒng)感染;蘭花配伍美人蕉、徐長卿,治療神經(jīng)衰弱;新鮮建蘭根,榨汁或水煎服用,用于治療肺結(jié)核咯血,等等。但現(xiàn)有文獻(xiàn)對蘭花根化學(xué)成分的研究報導(dǎo)屈指可數(shù)[6],對于蘭花根藥理活性的研究尚未見報導(dǎo)。
本實驗采用陰干的蕙蘭根為實驗材料,95%乙醇加熱回流提取得到蘭花根提取物,經(jīng)石油醚等萃取,對石油醚萃取部位采用多種柱色譜法進(jìn)行分離純化,并結(jié)合薄層檢識結(jié)果及核磁數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定;對兩種提取方法所得總提物及個別單體化合物進(jìn)行細(xì)胞活性研究,以MTT 法考察其對人肝癌細(xì)胞SMMC-7721 及小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1 的增殖抑制作用,以脂多糖(LPS)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞RAW264.7 為炎癥模型,檢測NO 釋放濃度,以考察所得石油醚部位總成分及單體成分抗炎活性。對蕙蘭根石油醚部位的化學(xué)成分及其體外細(xì)胞活性研究,為蘭花根的開發(fā)利用提供依據(jù)。
1.1.1 植物材料
本實驗所用蘭花根樣品采自河南省南陽市桐柏縣,經(jīng)河南中醫(yī)藥大學(xué)陳隨清教授鑒定,樣品為蘭科(Orchidaceae)蘭 屬(Cymbidium Sw.)植 物 蕙 蘭(Cymbidium faberi Rolfe.)的干燥根[7]。
樣品置于室內(nèi)陰干后,干燥試樣呈不規(guī)則彎曲或卷曲長圓柱狀,直徑約4 mm,表面呈淺棕色或黃棕色,具有不規(guī)則橫紋及縱紋。質(zhì)輕而脆,木部呈類白色或類白色,細(xì)長,直徑約1 mm,質(zhì)硬,皮部與木部幾乎完全分離。
1.1.2 細(xì)胞材料
巨噬細(xì)胞RAW264.7、小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1(購自上海中科院細(xì)胞庫),人肝癌細(xì)胞SMMC-7721(武漢普諾賽生命科技有限公司)。
1.1.3 儀器與試劑
TRACE 1310/TSQ 8000 GC-MS聯(lián)用儀(三重串聯(lián)四級桿,美國Thermo Fisher Scientific 公司);超導(dǎo)核磁共振儀(DPX-400 型)(瑞士Bruker 公司);質(zhì)譜儀(LTQ-Orbitrap XL Hybrid 型)(美國Thermo Fisher Scientific 公司);1260 型半制備高效液相色譜儀(配有四元泵、在線脫氣機(jī)、自動進(jìn)樣器、自動餾分收集器、UV 檢測器和Chemstation 工作站,美國AgiLent 公司);LC-52 型半制備高效液相色譜儀(配有雙元泵,UV 檢測器);轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(N-1000 型)(上海愛朗儀器有限公司)。
Thermo Fisher Scientific 371 型CO2恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱(美國Thermo Fisher Scientific 公司),SW-CJ-2F 型超凈工作臺(廣州市深華生物技術(shù)有限公司),GR60DF 型高壓蒸汽滅菌鍋(廈門致微儀器有限公司),BSA 124 S、BT 25 S 型分析天平(賽多利斯科技儀器有限公司),2 μL、10 μL、200 μL、1000 μL 移液槍(德國Eppendorf 艾本德公司),TD 5 型低速離心機(jī)(上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司),Motic AE 2000 型倒置顯微鏡,BCD-315 TNGS 型低溫冰箱(青島海爾股份有限公司),VarioskanTMLUX 型全自動多功能酶標(biāo)儀(美國賽默飛世爾公司),MX-S 型渦旋混合儀(大龍興創(chuàng)實驗儀器有限公司),血球計數(shù)板(上海市求精生化試劑儀器有限公司)。
薄層層析硅膠G、GF254(顆粒范圍10-40μm),柱層析硅膠G(160-200 目、200-300 目)(購自青島海洋化工廠),分析純甲醇、正丁醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、石油醚等(購自天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司,天津市富宇精細(xì)化工有限公司)。
RPMI-1640 培養(yǎng)基、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)、脂多糖(LPS)、胰蛋白酶(0.25%EDTA)、青霉素-鏈霉素混合液(雙抗)(以上均購自索萊寶生物科技有限公司),DMSO(上海麥克林生化試劑有限公司、美國Sigma 公司),四季青胎牛血清(FBS)(浙江天杭生物科技有限公司),Corning DMEM 培養(yǎng)基(美國Corning 公司)、LONSERA 胎牛血清(FBS),萘乙二胺鹽酸鹽、磺胺、亞硝酸鈉(上海麥克林生化試劑有限公司)。
1.2.1 單體化合物提取分離方法
取蘭花根干燥藥材5.6 kg,加以95%乙醇連續(xù)回流提取3次(每次2 h),合并提取液,減壓抽濾,濾去藥渣。濾液經(jīng)真空減壓濃縮,至無醇味浸膏狀,得蘭花根95%乙醇總提物浸膏869.2 g。濃縮浸膏加以適量蒸餾水混懸,使用有機(jī)試劑(石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇),依試劑極性由低到高,進(jìn)行多次重復(fù)萃取,單次萃取液料比為1∶1,同一溶劑反復(fù)萃取5次以上(含5 次),至萃取液基本無色時更換為下一溶劑。將萃取所得石油醚部位進(jìn)行減壓濃縮,揮至干膏,共得石油醚部位萃取物(79.1 g)。
使用100 目硅膠,對石油醚部位萃取物拌樣、裝柱,以石油醚:氯仿體系梯度(100∶1,80∶1,50∶1,20∶1,10∶1,3∶1)順次洗脫,收集流出液。根據(jù)GF254 薄層板硅膠板檢識結(jié)果,對具有相同薄層行為的流出液合并,反復(fù)利用吸附色譜法(硅膠柱層析)、分配色譜法(凝膠)(二氯甲烷:甲醇)以及重結(jié)晶的方法,對該部分成分進(jìn)行分離純化。對單體化合物進(jìn)行薄層檢識及13C-NMR,1H-NMR等分析,確定結(jié)構(gòu)。
1.2.2 細(xì)胞活性研究方法
(1)細(xì)胞培養(yǎng)
巨噬細(xì)胞RAW 264.7、人肝癌細(xì)胞SMMC-7721、小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1 均為貼壁生長細(xì)胞。細(xì)胞復(fù)蘇后,傳代培養(yǎng)3代以上,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定,以適量濃度接種于培養(yǎng)皿中,根據(jù)細(xì)胞類型及生長要求不同,分別選擇加入含10%胎牛血清的DMEM 或RPMI-1640 完全培養(yǎng)基。將細(xì)胞培養(yǎng)皿置于37℃恒溫、5%CO2穩(wěn)定及濕度飽和的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)傳代培養(yǎng)觀察細(xì)胞生長狀態(tài),取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實驗。
(2)細(xì)胞抑制增殖實驗(MTT法)
取對數(shù)生長期細(xì)胞,以細(xì)胞濃度為2×105mL-1,每孔100 μL 接種于96 孔培養(yǎng)板中,培養(yǎng)12 h。取出培養(yǎng)板,吸出上清液棄去,設(shè)正常組與給藥組(石油醚萃取物總部位給藥濃度梯度為200μg·mL-1、100μg·mL-1、50 μg·mL-1、25 μg·mL-1、12.5 μg·mL-1、6.25 μg·mL-1,單體化合物給藥濃度梯度為100 μmol·L-1、50 μmol·L-1、25 μmol·L-1、12.5 μmol·L-1、6.25 μmol·L-1、3.125μmol·L-1),每個濃度設(shè)3 個復(fù)孔。給藥組各孔加入相應(yīng)濃度藥物200 μL,正常組加入不完全培養(yǎng)基200μL,培養(yǎng)24 h。吸出上清液棄去,每孔加入100μL 不完全培養(yǎng)基及20μL MTT(5mg·mL-1),孵育4 h。終止培養(yǎng),吸取孔內(nèi)上清,棄去。每孔加入150μL DMSO,搖床振蕩15 min,酶標(biāo)儀570 nm 測各孔OD 值,記錄結(jié)果。
(3)NO濃度標(biāo)曲測定
稱取亞硝酸鈉,按比例加入蒸餾水配制成100 mmol·L-1亞硝酸鈉溶液,以100 mmol·L-1亞硝酸鈉為母液,稀釋為100 μmol·L-1、50 μmol·L-1、25 μmol·L-1、12.5 μmol·L-1、6.25 μmol·L-1、3.125 μmol·L-1、1.5625μmol·L-1、0.7813 μmol·L-1、0.3906 μmol·L-1、0.1953μmol·L-1、0.0977 μmol·L-1、0.0488 μmol·L-1、0.0224μmol·L-1,共13 個不同濃度點。酶標(biāo)儀540 nm 測各孔OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4)抗炎活性測定(NO濃度)
取巨噬細(xì)胞RAW 264.7,以細(xì)胞濃度為1×106mL-1,每孔100μL接種于96孔培養(yǎng)板中,培養(yǎng)12 h。取出培養(yǎng)板,吸出上清液棄去,設(shè)立正常組,模型對照組(LPS,濃度1μg·mL-1,),陽性對照組(地塞米松,濃度10 μmol·L-1),給藥組(依MTT 結(jié)果設(shè)定濃度,藥物以含1 μg·mL-1LPS 的不完全培養(yǎng)基稀釋),每個濃度3個復(fù)孔,各孔加入相應(yīng)濃度藥物200 μL,培養(yǎng)24 h。終止培養(yǎng),取各孔上清100μL,加入Griess 試劑(試劑A[1%磺胺磷酸溶液(5%):試劑B(0.1%的萘基乙烯基二胺)]1:1)100 μL,反應(yīng)15 分鐘,酶標(biāo)儀540 nm 測各孔吸光值,代入標(biāo)曲計算NO濃度。
(5)數(shù)據(jù)處理
檢測及計算所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入GraphPad Prism 7.00 軟件,繪制柱狀圖,并以空白組或模型組作對照。對數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行t檢驗,根據(jù)P值衡量各藥物作用顯著性。
化合物1(25 mg)白色針晶,易溶解于三氯甲烷等。1%茴香醛-濃硫酸顯紫紅色,提示可能為甾體類化合物。1H-NMR(500 MHz,in DMSO)數(shù)據(jù)顯示,不飽和區(qū)δ 5.33(1H,s)為烯烴氫信號,δ 3.97(1H,d,J=2.3 Hz),δ 3.93(1H,m)為連氧叔碳?xì)湫盘枴?3C-NMR(125 MHz,in DMSO)譜顯示,不飽和區(qū)僅兩條譜線,即δ:(145.2,128.8),對應(yīng)兩個烯烴碳信號;δ:(72.2,66.1)對應(yīng)兩個連氧季碳?xì)湫盘?。其余碳信號為δ:[55.6,55.5,54.1,45.1,42.0,36.8,36.3,35.5,33.3,29.9,28.9,28.7,27.7,26.4,23.8,22.6,20.9,20.5,19.7,18.9,18.6,11.8(末端CH3),11.7(末端CH3)],以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]中NMR 數(shù)據(jù)進(jìn)行對比,本實驗碳譜中δ:[39.7(C-8),39.1(C-11)]兩處碳信號與溶劑峰重疊,其余信號基本一致,故確定該化合物為豆甾-4-烯-3β,6β-二醇。
化合物2(125 mg)白色片狀結(jié)晶,溶于二氯己烷、三氯甲烷、丙酮等有機(jī)溶劑。GF254 硅膠薄層層析檢識,碘蒸顯棕黃色斑點,1%茴香醛濃硫酸顯色呈紫紅色斑點。1H-NMR(500 MHz,in CDCL3)譜中,較明顯的質(zhì)子氫信號化學(xué)位移值為δ:[5.33(1H,d,J = 4.0 Hz),3.50(1H,m),2.26(2H,m),1.98(2H,m),1.51(br,(CH2)n),1.09(br.s,(CH2)n),0.66(3H,s),0.78(3H,d,J = 8.4 Hz),0.81(3H,d,J = 4.1 Hz),0.84(3H,d,J =8.8 Hz)]。13C-NMR(125 MHz,in CDCL3)譜圖中共顯示出28 條碳譜譜線,即表明該化合物結(jié)構(gòu)中共有28種碳原子,化學(xué)位移值為δ:(11.8,12.0,18.8,19.0,19.4,19.8,21.1,23.1,24.3,26.1,28.2,29.1,31.7,31.9,33.9,36.1,36.5,37.2,39.8,42.3,42.3,45.8,50.1,56.0,56.8,71.8,121.7,140.7),其中δ 31.9 處譜線積分值為其余譜線二倍,故推斷該化合物共有29 個碳原子,δ 121.7,δ 140.7 兩處為烯碳特征信號峰,證明該化合物結(jié)構(gòu)中含有不飽和雙鍵結(jié)構(gòu)。查閱文獻(xiàn)[9-10]NMR 數(shù)據(jù),進(jìn)行對比,確定該化合物為β-谷甾醇。
圖1 化合物1-5結(jié)構(gòu)圖
化合物3(20 mg)白色結(jié)晶,易溶解于二氯甲烷、三氯甲烷等低極性有機(jī)溶劑。1%茴香醛-濃硫酸顯色,加熱后呈紫紅色斑點,提示可能為甾體類化合物。:1H-NMR(500 MHz,in CDCL3)譜中,氫信號主要集中于高場區(qū),含有較多非連氧脂肪氫信號,在低場區(qū)δ 5.35(1H,d,J=3.8 Hz)處可見到烯烴質(zhì)子信號,另含一組δ 4.60(1H,m)處可見的連氧烷烴氫信號,高場區(qū)δ:[1.00(3H,s),0.66(3H,s)]為與季碳相連的甲基氫信號,δ 1.27(br.s,(CH2)n)顯示信號重疊的多個—CH2—結(jié)構(gòu)。13C-NMR(125 MHz,in CDCL3)譜中,不飽和區(qū)δ 173.3 為羰基碳信號,δ 139.7 和δ 122.5 處對應(yīng)烯碳信號,其余信號中δ 73.6 為連氧叔碳信號,δ:(11.8,11.9,14.1,18.8,19.0,19.3,19.8)為末端甲基碳信號,δ:(21.0,22.7,23.1,24.3,25.1,26.1,27.8,28.2,29.1,29.1,29.3,29.4,29.5,29.6,29.7,29.7,29.7 × 3,31.9,31.9,31.9,33.9,34.7,36.1,36.6,37.0,38.2,39.7,42.3,45.8,50.0,56.0,56.7)為飽和脂肪碳信號。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]中NMR 數(shù)據(jù)對照,確定該化合物為β-谷甾醇棕櫚酸酯。
化合物4(16 mg)無色油狀,易溶于三氯甲烷等有機(jī)溶劑。1H-NMR(500 MHz,in MeOD)數(shù)據(jù)顯示6 組氫信號,其中2 組不飽和區(qū)氫信號δ:[7.71(1H,d,J =9.0 Hz),7.60(1H,d,J = 9.0 Hz)]為鄰位芳?xì)湫盘?,?4.28(2H,t,J = 6.6 Hz)為連氧亞甲基氫信號,δ:[1.71(2H,m),1.45(2H,m)]為亞甲基氫信號,δ 0.94(3H,t,J = 7.5 Hz)為甲基氫信號。13C-NMR(125 MHz,in MeOD)顯示8 組碳信號,其中4 組不飽和區(qū)碳信號分別為δ:(169.3,133.6,132.3,129.9),δ 169.3 處為羰基碳信號,其余3 組為芳碳信號;飽和區(qū)δ 65.5 為連氧碳信號,δ 30.5,δ 19.1,δ 13.7(末端CH3)為飽和脂肪鏈碳信號。結(jié)合以上信息,判斷該結(jié)構(gòu)中含一個鄰位二取代苯環(huán),且兩個取代基結(jié)構(gòu)相同。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]中譜數(shù)據(jù)對比,確定該化合物為鄰苯二甲酸二丁酯。
化合物5(50 mg)白色片狀結(jié)晶,溶解于甲醇等有機(jī)溶液。1%茴香醛-濃硫酸顯色,加熱后呈紫紅色斑點;莫立許反應(yīng)呈陽性。1H-NMR(500 MHz,in DMSO)譜中,δ 5.32(1H,d,J = 4.9 Hz)為烯氫信號,δ 4.84-4.88(3H,br.m)為3 個—OH 活潑氫信號,δ 4.21(1H,d,J = 7.8 Hz)為β-D-葡萄糖端基氫信號。13CNMR(125 MHz,in DMSO)譜中,低場區(qū)δ 140.4 和δ 121.2 處為烯碳信號,δ 100.8 為氧苷端基碳信號,其余C譜數(shù)據(jù)為δ:(11.7,11.8,18.6,18.9,19.1,19.7)為末端甲基碳信號,δ:(20.6,22.6,23.8,25.4,27.8,28.7,29.2,
31.4 ,31.4,33.3,35.5,36.2,36.8,38.3,41.8,45.1,49.6,55.4,56.2)為飽和脂肪烴碳信號,δ 61.1 為連氧仲碳信號,δ:(70.1,73.5,76.8×2,76.9)為5 個連氧叔碳信號。結(jié)合HMBC譜及HSQC譜,查閱文獻(xiàn)[13]中NMR數(shù)據(jù),進(jìn)行對比,確定該結(jié)構(gòu)為胡蘿卜苷。
化合物結(jié)構(gòu)如圖1所示。
2.2.1 MTT結(jié)果
蘭花根提取物石油醚萃取部位、豆甾-4-烯-3β,6β-二醇對巨噬細(xì)胞RAW 264.7 無明顯細(xì)胞增殖抑制作用,細(xì)胞存活率均大于90%。作用于人肝癌細(xì)胞SMMC-7721 后,石油醚部位給藥濃度為25μg·mL-1時有極顯著增殖抑制作用,豆甾-4-烯-3β,6β-二醇給藥濃度為25μmol·L-1時有顯著增殖抑制作用,結(jié)果見圖2。作用于小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1 后,石油醚部位在25μg·mL-1仍有極顯著增殖抑制作用,豆甾-4-烯-3β,6β-二醇給藥濃度為25μmol·L-1時有顯著增殖抑制作用,結(jié)果見圖3。(圖表繪制使用GraphPad Prism 7.00軟件)。
圖2 提取物及單體對肝癌細(xì)胞增殖抑制活性
圖3 提取物及單體對小鼠乳腺癌細(xì)胞增殖抑制活性
圖4 NO濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.2.2 抗炎活性(NO釋放抑制)結(jié)果
蘭花根提取物石油醚總部位對脂多糖(LPS)所致巨噬細(xì)胞炎癥模型,有較強(qiáng)NO 釋放抑制活性,而豆甾-4-烯-3β,6β-二醇,NO 釋放抑制活性不明顯。NO標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖4,給藥結(jié)果見圖5。
蘭花作為我國著名觀賞花卉為高等植物,其生長進(jìn)化級別較高,成分比較復(fù)雜。石油醚萃取部位在蘭花根95%乙醇總提物中占比為9.10%。該部分化學(xué)成分極性較小且較為集中,分離純化有一定難度。本實驗主要分離得到5個單體成分,分別為:β-谷甾醇棕櫚酸酯(20 mg)、鄰苯二甲酸二丁酯(16 mg)、豆甾-4-烯-3β,6β-二醇(25 mg)、β-谷甾醇(125 mg)、胡蘿卜苷(50 mg),多為藥用植物中常見化學(xué)成分,其中豆甾-4-烯-3β,6β-二醇為蘭科植物首次分離得到。
本實驗體外活性研究結(jié)果顯示,石油醚部位及單體豆甾-4-烯-3β,6β-二醇,均在不同程度上具有抗炎及抗腫瘤(人肝癌SMMC-7721、小鼠乳腺癌4T1)活性,且石油醚部位活性優(yōu)于豆甾-4-烯-3β,6β-二醇。
圖5 提取物及單體化合物抗炎活性
有文獻(xiàn)報導(dǎo)顯示:β-谷甾醇對H22 荷瘤小鼠具有一定的抑瘤作用[14],對肺癌[15]、肝癌[16]、乳腺癌[17]、胃癌[18]、胰腺癌[19-20]和宮頸癌[21-22]等均有抑制增殖或誘導(dǎo)凋亡的作用,并有抗炎,降血脂等藥理活性,對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和變形桿菌四種細(xì)菌均有一定的抑制作用,且具有一定的抗氧化效果[23-24];胡蘿卜苷對HeLa 和HepG-2 細(xì)胞具有一定的細(xì)胞毒性作用[25-27],對大腸桿菌有輕微的抑制活性,具有一定的抗氧化、降低血糖[28]作用;鄰苯二甲酸二丁酯的生物活性主要體現(xiàn)在對植物病菌的抑制作用,例如對茄子根際黃萎菌具的抑制作用及對水稻紋枯病菌、小麥赤霉病菌病原菌都有一定的殺菌活性[29],但作用于人體,往往體現(xiàn)出一定的雌激素作用[30],促迸卵巢細(xì)胞凋亡,抑制卵巢的抗氧化能力[31],促進(jìn)雌激素依賴性乳腺癌MCF-7 細(xì)胞的增殖[32];β-谷甾醇棕櫚酸酯未顯示出對人肝癌細(xì)胞BEL-7402 有細(xì)胞毒活性[33]。蘭科藥用植物中,具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎作用的獨蒜蘭、貝母蘭、帶葉卷瓣蘭、杜鵑蘭中均含有β-谷甾醇、胡蘿卜苷等甾體類成分[34-37]。
結(jié)合前人研究及本實驗結(jié)果,我們認(rèn)為蘭花根基原種類較多,但目前進(jìn)行分離研究的僅限于蕙蘭根,且所得的化合物種類較少;蘭花根(蕙蘭根)石油醚部位具有明顯的抗炎及抗腫瘤活性,但蘭花根的具體藥效成分及作用機(jī)制尚不明確,因此具有進(jìn)一步研究和開發(fā)利用的藥用價值;加之蘭花觀賞性高,根系發(fā)達(dá),在大規(guī)模人工栽培、繁育和移植過程中,大量根及須根被廢棄,因此,對蘭花根的開發(fā)利用也有不容忽視的經(jīng)濟(jì)價值。