王 雪 ， 鄭雪瑩 ， 拱海鷗 ， 劉建雙 ， 王永強(qiáng)

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 北京 海淀 100193 ； 2.北京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ，北京 大興 102600 ； 3.北京寵福鑫動(dòng)物醫(yī)院 ， 北京 昌平 102200)

弓形蟲病(Toxoplasmosis)是由龔地弓形蟲(Toxophasmagondii)所引起的人獸共患病。人感染后一般無明顯臨床癥狀或輕微的流感樣癥狀，一旦機(jī)體的免疫功能受損或處于免疫抑制狀態(tài)，弓形蟲感染所致的腦病、肝病、肺病及眼病就會(huì)表現(xiàn)出來，嚴(yán)重者可致死[1]。此外，妊娠期婦女感染弓形蟲后可導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎兒發(fā)育畸形[2]。人畜和禽類等其他動(dòng)物為中間宿主，貓及貓科動(dòng)物既是弓形蟲的終末宿主，又是中間宿主，是重要的傳染源。隨著家庭飼養(yǎng)貓作為寵物的盛行，人類與貓的接觸機(jī)會(huì)大大增加，進(jìn)而使人通過已感染弓形蟲的貓而感染弓形蟲的幾率上升。本試驗(yàn)從北京地區(qū)采集貓血液樣本共265份，結(jié)合血清學(xué)檢測(cè)和問卷調(diào)查，以了解本地區(qū)貓弓形蟲感染情況，尋找貓感染弓形蟲的風(fēng)險(xiǎn)因素，旨在為貓弓形蟲病的防控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，從而提出有效的防控策略。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 動(dòng)物弓形蟲IgG抗體酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，珠海海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)。

1.2 主要儀器及器材 酶標(biāo)儀iMark，購自BIO-RAD公司；Centrifuge5810R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，購自德國Eppendorf公司。

1.3 樣本采集及處理 2018年11月-2019年3月，在北京寵物醫(yī)院中隨機(jī)選擇寵物貓，對(duì)寵物主人進(jìn)行寵物飼養(yǎng)相關(guān)行為問卷調(diào)查，并在其主人知情同意的情況下，采集寵物的血液樣品用于血清學(xué)檢測(cè)。每只動(dòng)物采取1.5～2 mL靜脈血，3 000 r/min離心5 min，分離出待測(cè)血清并置-20 ℃冷凍備用。

1.4 檢測(cè)方法 ELISA檢測(cè)方法按照珠海海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)說明書進(jìn)行操作。

1.5 數(shù)據(jù)分析 將血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果和問卷調(diào)查中收集到的相關(guān)信息輸入Microsoft Excel表，應(yīng)用SPSS 25軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用病例對(duì)照調(diào)查OR值與疾病關(guān)聯(lián)程度的判定表標(biāo)準(zhǔn)判斷所分析因素與貓感染弓形蟲的關(guān)聯(lián)性。

2 結(jié)果

1.1 弓形蟲感染情況 2018年11月-2019年3月，共采集到貓血清樣本265份。采用ELISA檢測(cè)方法進(jìn)行血清弓形蟲IgG抗體的檢測(cè)，共檢測(cè)出陽性樣品53份，陽性率為20.0%(95%CI：15.2～24.8%)。根據(jù)貓來源不同，陽性率存在差異：收養(yǎng)的流浪貓有79只，檢出陽性樣品14份，陽性率為17.7%；購買的寵物貓有155只，檢出陽性樣品33份，陽性率為21.3%；家養(yǎng)貓有31只，檢出陽性樣品6份，陽性率為19.4%(圖1)。用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，不同來源的貓弓形蟲抗體陽性率沒有顯著差異(P>0.1)。

圖1 不同來源的貓弓形蟲陽性率

2.2 貓弓形蟲感染和相關(guān)因素分析 結(jié)合問卷調(diào)查，統(tǒng)計(jì)分析不同情況下的貓弓形蟲陽性率，結(jié)果表明(見表1)：所在小區(qū)有流浪動(dòng)物家庭飼養(yǎng)的貓弓形蟲抗體陽性率顯著高于小區(qū)內(nèi)沒有流浪動(dòng)物的家庭飼養(yǎng)的貓；貓砂更換周期為2-3 d和3 d以上的家庭飼養(yǎng)的貓弓形蟲血清抗體陽性率均顯著高于每天更換貓砂的家庭飼養(yǎng)的貓陽性率；清理貓砂時(shí)不戴手套的家庭飼養(yǎng)的貓弓形蟲血清抗體陽性率顯著高于清理貓砂時(shí)戴手套的家庭所飼養(yǎng)的貓陽性率；以上均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.1)。

飼喂生魚生肉的貓弓形蟲抗體陽性率高于不飼養(yǎng)生魚生肉的貓；同時(shí)存在多只貓的家庭飼養(yǎng)的貓弓形蟲抗體陽性率高于單獨(dú)飼養(yǎng)的貓，但差異均不顯著。

以下因素對(duì)貓感染弓形蟲無關(guān)聯(lián)或關(guān)聯(lián)程度較弱，且差異均不顯著：貓有無流浪經(jīng)歷、所在家庭是否養(yǎng)犬、所在家庭是否生肉熟食菜板混用、主人是否接觸流浪動(dòng)物和清理貓砂頻率。

將收集的相關(guān)因素進(jìn)行邏輯回歸分析，結(jié)果顯示：飼養(yǎng)家庭所在的小區(qū)內(nèi)存在流浪動(dòng)物是貓感染弓形蟲的風(fēng)險(xiǎn)因素(P<0.1)(見表2)。

3 討論

本次弓形蟲抗體檢測(cè)結(jié)果為20%，與2016年于珊珊[3]的檢測(cè)結(jié)果基本相似;但與同年張啟龍[4]的檢測(cè)結(jié)果1.92%存在一定差異，可能與采樣區(qū)域、采樣策略以及檢測(cè)方法的不同有關(guān)。貓弓形蟲的流行有明顯的地理差異，世界平均感染率達(dá)30%～40%[5]，亞洲大部分地區(qū)弓形蟲感染率普遍低于世界平均水平，如韓國在2.2%～47.2%[6]，日本為9%～16.14%[7]。我國貓弓形蟲感染與世界平均感染率大致相當(dāng)，約在4%～79.4%之間，地理差異較明顯。中南部省份貓弓形蟲感染率高于西北、東北等地貓弓形蟲的感染率[8]。

邏輯回歸分析的結(jié)果顯示：飼養(yǎng)家庭所在的小區(qū)內(nèi)存在流浪動(dòng)物是貓感染弓形蟲的風(fēng)險(xiǎn)因素。其原因可能是主人在小區(qū)內(nèi)經(jīng)過感染弓形蟲的流浪動(dòng)物的生活區(qū)域時(shí)，帶有卵囊的土壤粘附在鞋底被帶入到家中，形成了家養(yǎng)寵物貓間接接觸室外環(huán)境的機(jī)會(huì)。弓形蟲卵囊被排出后可廣泛分布于自然環(huán)境中，孢子化卵囊在潮濕泥土中可以存活18個(gè)月仍具有感染力，因此貓與土壤接觸時(shí)誤食入泥土中的卵囊可導(dǎo)致弓形蟲的感染[9]。

單因素風(fēng)險(xiǎn)分析顯示：貓砂更換頻率和清理貓砂時(shí)的衛(wèi)生措施與貓感染弓形蟲相關(guān)。其原因可能是本次試驗(yàn)中39.2%的樣本都同時(shí)飼養(yǎng)了2只及以上的貓，加強(qiáng)貓砂的清理可以防止交叉感染。

表1 貓弓形蟲感染單因素風(fēng)險(xiǎn)分析

表2 二元Logistic回歸分析

續(xù)表

因?yàn)殡S糞便排出的弓形蟲囊合子需要在外界發(fā)育1-2 d或更長時(shí)間，才形成具有感染性的孢子化卵囊，所以每天更換貓砂、清理時(shí)戴手套都可以及時(shí)清除弓形蟲囊合子，避免發(fā)育后造成傳染[10]。

飼喂生食對(duì)貓感染弓形蟲有中等程度的關(guān)聯(lián)度，與Jokelainen[11]等的報(bào)道一致，可能因?yàn)樯庵写嬖诠蜗x的包囊或被卵囊污染。這也印證了 Gauss的觀點(diǎn)“飲食似乎極大地影響了感染水平，即使是嚴(yán)格保持在室內(nèi)的貓也可能由于其攝食習(xí)慣而與寄生蟲有明顯的接觸”[12]。

同時(shí)飼養(yǎng)多只貓對(duì)貓感染弓形蟲有中等程度的關(guān)聯(lián)度，與Ana Patrícia Lopes[13]等的報(bào)道一致，其原因可能是弓形蟲陽性貓作為傳染源排放卵囊而對(duì)同一家庭內(nèi)的其他貓?jiān)斐筛腥尽?/p>

本次調(diào)查認(rèn)為貓的來源和有無流浪經(jīng)歷與貓感染弓形蟲的關(guān)聯(lián)程度較弱，而Opsteegh[14]等認(rèn)為貓有流浪經(jīng)歷是貓感染弓形蟲的風(fēng)險(xiǎn)因素，得出不同結(jié)論可能與本次試驗(yàn)樣本量較小有關(guān)。

調(diào)查中得出的貓感染弓形蟲的有關(guān)因素，如貓砂的更換周期、清理貓砂時(shí)的衛(wèi)生措施、同時(shí)飼養(yǎng)多只貓，均與寵物主人的生活方式相關(guān)。Lopes[13]等認(rèn)為貓弓形蟲血清陽性相關(guān)的大多數(shù)風(fēng)險(xiǎn)因素是與生活方式相關(guān)的，可以通過阻止貓狩獵行為和關(guān)閉室外通道等方式減少貓的室外活動(dòng)而進(jìn)行防控。國內(nèi)的家養(yǎng)貓基本沒有室外活動(dòng)的機(jī)會(huì)，但在2012年調(diào)查家養(yǎng)貓的感染率為21.2%[15]，結(jié)合本次試驗(yàn)，分析家養(yǎng)貓的弓形蟲感染可能與動(dòng)物主人的生活方式有關(guān)，建議在弓形蟲的防控中綜合考慮貓和動(dòng)物主人兩方面綜合防控。