亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        北京地區(qū)規(guī)?;膛?chǎng)副結(jié)核流行病學(xué)調(diào)查

        2019-04-16 10:23:14陳豐偉
        中國獸醫(yī)雜志 2019年9期
        關(guān)鍵詞:血清

        陳豐偉 , 曹 杰 , 馬 翀 , 張 巽

        (1.海南農(nóng)墾草畜產(chǎn)業(yè)集團(tuán)有限公司 , 海南 澄邁 571900 ; 2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ,北京 海淀 100193 ; 3.中牧實(shí)業(yè)股份有限公司 , 北京 豐臺(tái) 100071)

        奶牛副結(jié)核(Johne′s Disease,JD),是一種慢性肉芽腫胃腸道疾病,其致病菌為副結(jié)核分支桿菌(MycobacteriumaviumsubspeciesParatuberculosis,MAP)。牛只在感染MAP后,通常經(jīng)過1年以上的潛伏期后,會(huì)表現(xiàn)出臨床癥狀,主要癥狀包括腹瀉、體重迅速減輕、產(chǎn)奶量下降等。感染奶牛的體況評(píng)分最后會(huì)達(dá)到1分甚至更低,并最終因失去生產(chǎn)能力而被淘汰。感染牛在發(fā)病腹瀉過程中會(huì)將大量MAP排入環(huán)境,威脅易感牛群。2001年,加拿大的JD陽性牛場(chǎng)平均場(chǎng)內(nèi)陽性率達(dá)到8.5%[1],2005年澳大利亞全國奶牛的MAP血清抗體陽性率達(dá)到19%[2]。環(huán)境保護(hù)、飼養(yǎng)隔離工作不到位等原因,造成了MAP的高感染率[3]。2013年有學(xué)者報(bào)道美國91.1%的奶牛場(chǎng)存在JD牛[4]。由于當(dāng)前國際上缺乏針對(duì)JD的特效藥物和可用疫苗,各國都采取JD控制計(jì)劃逐漸降低感染率。

        本試驗(yàn)對(duì)北京地區(qū)7個(gè)規(guī)?;膛?chǎng)進(jìn)行調(diào)查,目的是為了確定這些牛場(chǎng)的場(chǎng)間血清抗體陽性率以及場(chǎng)內(nèi)血清抗體陽性率,以各場(chǎng)的MAP血清抗體陽性率為基礎(chǔ),為后續(xù)控制計(jì)劃的制定提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)對(duì)象 本試驗(yàn)收集的樣品采集于2014年9-10月,選擇北京地區(qū)7個(gè)規(guī)?;膛?chǎng)(>500頭存欄)。尾靜脈采血,分離血清0.5 mL,-20 ℃冰箱凍存?zhèn)錂z。為保護(hù)奶牛場(chǎng)的個(gè)體隱私,在此僅進(jìn)行場(chǎng)間陽性率對(duì)比分析,并在結(jié)果中取消區(qū)域性特征的描述。

        1.2 試驗(yàn)材料 MAP抗體ELISA試劑盒(IDEXX公司),2 mL注射器,離心管,96孔PCR板(用于儲(chǔ)存血清樣品),96孔空白孵育板,移液槍,槍頭,熱電Wellwash 4MK2型洗板機(jī)以及酶標(biāo)儀(ThermoFisher公司),去離子水。

        1.3 試驗(yàn)方法 采用MAP抗體ELISA檢測(cè)試劑盒(IDEXX公司)進(jìn)行檢測(cè)血清中的IgG。檢測(cè)按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

        1.4 數(shù)據(jù)處理 根據(jù)試劑盒說明書判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定,將可疑牛視為陰性。統(tǒng)計(jì)場(chǎng)間陽性率,場(chǎng)內(nèi)陽性率,牛只陽性率,以及陽性牛月齡分布等。

        2 結(jié)果

        去除掉信息不齊全和重復(fù)的樣品后,最終總計(jì)采集8 549頭牛的血清樣品。

        2.1 個(gè)體牛MAP血清抗體陽性率 7個(gè)牧場(chǎng)共檢測(cè)8 549頭牛,MAP血清抗體陽性牛數(shù)共791頭,個(gè)體牛MAP血清抗體陽性率達(dá)到9.25%(表1)。血清抗體陽性牛主要集中在成母牛,犢牛和育成牛的血清抗體陽性率均低于1%。因此以后進(jìn)行JD控制計(jì)劃時(shí),可以不采集小于等于12月齡牛的樣品。

        表1 各養(yǎng)殖階段MAP血清抗體陽性率

        2.2 各場(chǎng)MAP血清抗體陽性率 7個(gè)牛場(chǎng)的場(chǎng)間MAP血清抗體陽性率達(dá)到100%(7/7),場(chǎng)內(nèi)MAP血清抗體陽性率為5.08%~12.62%(表2)。其中2號(hào)場(chǎng)、4號(hào)場(chǎng)、6號(hào)場(chǎng)抗體陽性率均大于10%。表明MAP感染普遍存在,不同牛場(chǎng)感染情況存在差異。

        表2 各場(chǎng)MAP血清抗體陽性率

        2.3 不同月齡牛MAP血清抗體陽性率 按照6個(gè)月為一個(gè)區(qū)間進(jìn)行劃分,對(duì)不同月齡區(qū)間牛MAP血清抗體陽性率分析。結(jié)果顯示,各月齡區(qū)間均存在血清抗體陽性牛,且主要集中在25-96月齡范圍內(nèi)(圖1)。24月齡以下的各個(gè)區(qū)間陽性率均低于4%,并呈現(xiàn)隨月齡上升的趨勢(shì)。24月齡以下共計(jì)檢測(cè)牛3 441頭,其中血清抗體陽性牛僅56頭,陽性率為1.63%。25-96月齡范圍內(nèi)各個(gè)區(qū)間的陽性率均大于10%,在該月齡范圍內(nèi)共計(jì)檢測(cè)牛4 872頭,其中陽性牛712頭,陽性率為14.61%。96月齡以上的各個(gè)區(qū)間陽性率有所起伏:97-102月齡區(qū)間陽性率小于4%;103-108月齡和109-114月齡區(qū)間陽性率分別為8.33%和8.16%;115月齡以后的陽性率均大于12%。本次96月齡以上共計(jì)檢測(cè)牛236頭,其中血清抗體陽性牛23頭,陽性率為9.75%。

        2.4 MAP血清抗體陽性牛S/P值分布情況 S/P值(Sample to positive value)反映了MAP抗體的滴度。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為樣品S/P≥0.55,即0.55為判定界限值(Cut-off)。Michael認(rèn)為可以根據(jù)S/P值進(jìn)行感染程度的分級(jí)[5-6],在此我們針對(duì)7個(gè)場(chǎng)陽性牛的S/P值進(jìn)行分級(jí)分析。

        結(jié)果顯示,在MAP血清抗體陽性牛中,強(qiáng)陽性牛占12.52%,中等陽性牛占55.50%,弱陽性牛占31.98%(表3)。使用R語言進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),結(jié)果表明,MAP血清抗體陽性牛的S/P值不呈現(xiàn)正態(tài)分布(圖2)。對(duì)S/P值使用GLM分析發(fā)現(xiàn),不同月齡的陽性牛,其S/P值存在極顯著差異(P<0.01)。進(jìn)一步Duncan檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),月齡高的陽性牛S/P顯著大于月齡低的陽性牛S/P(表4)。

        圖1 各月齡區(qū)間MAP血清抗體陽性率

        表3 MAP血清抗體陽性牛S/P值 (n=791)

        圖2 MAP血清抗體陽性牛S/P值正態(tài)性檢驗(yàn)圖

        表4 7場(chǎng)血清抗體陽性牛S/P月齡區(qū)間的Duncan檢驗(yàn) (n=791)

        3 討論

        JD作為一種慢性腸道疾病,較難做到早期診斷和防控,其臨床病程較為復(fù)雜,感染牛只可向環(huán)境中排菌,對(duì)易感牛群構(gòu)成威脅。國內(nèi)外近年報(bào)道全球JD牛檢出率一直保持上升趨勢(shì)。JD牛進(jìn)入臨床期后,會(huì)表現(xiàn)腹瀉、產(chǎn)奶量降低等癥狀,導(dǎo)致牛群淘汰率升高,同時(shí)影響全群牛型結(jié)核的檢疫結(jié)果。不僅影響牛場(chǎng)生產(chǎn)收入,也浪費(fèi)了大量的飼料、人工費(fèi)用。2008年因JD牛問題,美國牛場(chǎng)經(jīng)濟(jì)損失超過2.5億美元。

        本次JD流行病學(xué)調(diào)查在北京市不同區(qū)縣的7個(gè)規(guī)?;膛?chǎng)開展。結(jié)果顯示,場(chǎng)間血清抗體陽性率達(dá)到100%(7/7),場(chǎng)內(nèi)血清抗體陽性率為5.08%~12.62%,個(gè)體牛血清抗體陽性率為9.25%。上述結(jié)果表明,JD是北京乃至整個(gè)華北地區(qū)牛場(chǎng)的普遍性問題(考慮北京防疫工作),且感染牛群基數(shù)較大,提示JD已經(jīng)存在于各個(gè)牧場(chǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。其原因主要是此前國內(nèi)牛場(chǎng)并未關(guān)注JD,牛只腹瀉未經(jīng)過系統(tǒng)診斷,直接采用抗生素輸液治療,因此感染牛逐漸增多并發(fā)展到如今的狀態(tài)。這些牛場(chǎng)均需要開展JD控制計(jì)劃,同時(shí)應(yīng)當(dāng)注意避免向其他牛場(chǎng)輸出MAP血清抗體陽性牛。

        本試驗(yàn)結(jié)果顯示,犢牛和育成牛的MAP血清抗體陽性率分別為0.43%和0.49%,青年牛的陽性率達(dá)到2.47%。感染了MAP的犢牛和育成牛,機(jī)體主要是以細(xì)胞免疫為主,此階段進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)的敏感性低。表明感染牛通常在12月齡以后表現(xiàn)MAP血清抗體陽性??紤]到采樣難度和血清抗體陽性檢出率不同階段差異的特點(diǎn),對(duì)于實(shí)施JD控制計(jì)劃的牛場(chǎng),我們建議僅對(duì)大于12月齡牛群采集血樣。

        犢牛作為MAP最易感群體,是JD控制計(jì)劃的最重要環(huán)節(jié)。牛場(chǎng)應(yīng)當(dāng)針對(duì)犢牛管理和產(chǎn)房管理進(jìn)行調(diào)整,確實(shí)切斷各種可能的傳播途徑。

        本試驗(yàn)中,24-96月齡范圍內(nèi)的奶牛的陽性率較高(14.61%),與犢牛期間感染MAP,并在24月齡以后表現(xiàn)抗體陽性的感染特點(diǎn)相吻合。24月齡以上奶牛作為控制計(jì)劃的主要對(duì)象,牛場(chǎng)要對(duì)血清抗體陽性牛進(jìn)行標(biāo)記,并棄用初乳,若出現(xiàn)臨床癥狀應(yīng)立即淘汰。96月齡以上各區(qū)間血清抗體陽性率波動(dòng)較大,可能與樣本數(shù)量有關(guān),因?yàn)楦啐g牛通常無法達(dá)到生產(chǎn)要求或者因?yàn)楦黝惣膊?、流產(chǎn)已經(jīng)淘汰。同時(shí)高齡牛因?yàn)槊庖吣芰Φ南陆?,其更容易感染MAP。對(duì)于這類牛只尤其是有臨床癥狀的建議盡早淘汰。Nielsen S S[7]等人關(guān)于奶牛的MAP排菌狀態(tài)的研究,提示感染牛一般在24月齡后開始以體液免疫應(yīng)答,與本試驗(yàn)結(jié)果基本吻合,而關(guān)于感染狀態(tài)和排菌情況之間關(guān)系有待進(jìn)一步深入研究。

        IDEXX公司生產(chǎn)的MAP抗體ELSIA試劑盒,其檢測(cè)原理是以包被MAP特異性抗原為基礎(chǔ)的間接ELISA試驗(yàn),最終通過終止反應(yīng)體系的光密度(OD值)來獲得樣品中的抗體滴度。此試劑盒的特異性為99.42%[8],敏感性為45%[9]。由于不同批次試驗(yàn)的差異,該試劑盒對(duì)此進(jìn)行數(shù)據(jù)校正,即通過計(jì)算獲得S/P值(樣品陽性比率),其計(jì)算公式為:S/P=(樣品OD值-陰性對(duì)照OD值)/(平均陽性對(duì)照OD值-陰性對(duì)照OD值)。根據(jù)公式可知在消除批次差異的同時(shí),S/P與樣品OD值、抗體滴度,呈正向線性關(guān)系。我們對(duì)791頭血清抗體陽性牛進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),月齡越高,S/P值越高。這說明了牛只感染MAP的時(shí)間越長(zhǎng),其病程階段更嚴(yán)重,對(duì)環(huán)境的污染和牛群的健康更加不利。本試驗(yàn)基于S/P值分級(jí),發(fā)現(xiàn)強(qiáng)陽性牛(S/P≥2)占12.52%(99/791)。Michael等人建議,對(duì)強(qiáng)陽性牛停止配種工作以防止其進(jìn)入下一個(gè)泌乳期。對(duì)于中等陽性和弱陽性牛,牛場(chǎng)應(yīng)當(dāng)做好經(jīng)濟(jì)效益與牛群健康關(guān)系的權(quán)衡,一旦這些牛只出現(xiàn)臨床癥狀應(yīng)立即淘汰[6]。

        上述7個(gè)牛場(chǎng),在近年的牛型結(jié)核皮試檢疫工作中,曾出現(xiàn)大量假陽性牛。例如2號(hào)奶牛場(chǎng)曾經(jīng)在一次牛型結(jié)核檢疫中出現(xiàn)皮試陽性和可疑牛共計(jì)600頭,但是經(jīng)過牛型結(jié)核IFN-γ試驗(yàn)篩查后僅1頭為陽性。本試驗(yàn)認(rèn)為,JD會(huì)干擾牛型結(jié)核檢疫結(jié)果,其干擾率有待進(jìn)一步試驗(yàn)證明。

        綜上所述,北京規(guī)模化奶牛場(chǎng)MAP感染情況不容樂觀,為有效控制感染率,以及避免感染對(duì)牛場(chǎng)生產(chǎn)帶來的負(fù)面影響,建議陽性牛場(chǎng)開展JD控制計(jì)劃。

        猜你喜歡
        血清
        血清免疫球蛋白測(cè)定的臨床意義
        中老年保健(2021年3期)2021-08-22 06:50:04
        Meigs綜合征伴血清CA-125水平升高1例
        慢性腎臟病患者血清HIF-1α的表達(dá)及臨床意義
        慢性鼻-鼻竇炎患者血清IgE、IL-5及HMGB1的表達(dá)及其臨床意義
        血清H-FABP、PAF及IMA在冠心病患者中的表達(dá)及其臨床意義
        血清IL-6、APC、CRP在膿毒癥患者中的表達(dá)及臨床意義
        血清HBV前基因組RNA的研究進(jìn)展
        血清馴化在豬藍(lán)耳病防控中的應(yīng)用
        LC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定養(yǎng)血清腦顆粒中14種成分
        中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:18:47
        血清胱抑素C與小動(dòng)脈閉塞型卒中的關(guān)系
        国产精品久久国产精麻豆99网站| 国产在线观看网址不卡一区| 亚洲伊人av综合福利| 国产精品国产三级国产专播下| 波多野结衣爽到高潮大喷| 亚洲另类精品无码专区| 亚洲综合网站精品一区二区| 中国精学生妹品射精久久| 成人无码a级毛片免费| 亚洲精品二区在线观看| 一区二区三区中文字幕在线播放| av一区二区三区在线| 337p西西人体大胆瓣开下部 | 日本一区午夜艳熟免费| 国产精品乱子伦一区二区三区| 国产精品亚洲二区在线| 国产精品天干天干| 99视频30精品视频在线观看| 91久久青青草原线免费| 亚洲av偷拍一区二区三区| 亚洲一二三四区免费视频| 中国少妇内射xxxx狠干| 久久狠狠第一麻豆婷婷天天| 狼人av在线免费观看| 亚洲黄色精品在线播放| 国产乱人对白| 中文字幕人妻偷伦在线视频| 中文字幕日韩人妻高清在线| 亚洲成年国产一区二区| 亚洲中文字幕无码中文字在线| 成人区视频| 国内国外日产一区二区| 色偷偷偷在线视频播放| 欧美性猛交xxxx富婆| 亚洲av色无码乱码在线观看| 无码国产一区二区色欲| 日本一本一道久久香蕉男人的天堂| 97久久超碰国产精品旧版| 欧美黑人性色黄在线视频| 亚洲国产av精品一区二| 很黄很色很污18禁免费|