莊素媚 倪影月

作者單位：325400 平陽縣人民醫(yī)院婦科

宮頸癌是一種女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)生率僅次于乳腺癌，對患者生命質(zhì)量及生活質(zhì)量造成影響[1]。高危型人乳頭狀瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染為引起宮頸癌主要危險(xiǎn)因素之一，其發(fā)病過程屬于長期過程，相關(guān)研究認(rèn)為HPV為導(dǎo)致宮頸癌的重要前期事件，是一種潛在風(fēng)險(xiǎn)，其進(jìn)展較為緩慢，且病變多存在動(dòng)態(tài)變化[2]。研究顯示，人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus,HPV)為一種上皮性病毒，能特異性的感染人體黏膜、皮膚組織，而人體作為唯一宿主，與此同時(shí)，女性生殖道易感染HPV，故及時(shí)地對女性生殖道HPV感染進(jìn)行早期篩查并清除是抑制宮頸上皮內(nèi)瘤變產(chǎn)生、形成的主要環(huán)節(jié)，對臨床有效防治宮頸癌具有重要意義。近些年，我國女性宮頸癌發(fā)生呈上升趨勢，且有研究指出2020年時(shí)每年全球范圍內(nèi)宮頸癌新發(fā)病例將高達(dá)66萬例[3]。而大量研究表明，感染低危型HPV可造成部分中度宮頸上皮內(nèi)瘤樣變和輕度宮頸上皮內(nèi)瘤樣變，而感染高危型HPV將造成CIN2、CIN3及浸潤性宮頸癌，且其亞型分布存在一定的區(qū)域性[4]?；诖?，本研究對在我院行生殖道感染篩查的婦女500例展開研究，旨在進(jìn)一步分析宮頸高危型人乳頭狀瘤病毒感染患者生殖道微生態(tài)狀況。具體信息如下。

1 資料來源與方法

1.1 資料來源

將2015年3月至2017年9月在我院行生殖道感染篩查的婦女500例納入研究，均自愿參與本研究并簽署知情同意書。500例研究對象年齡16～67歲，平均年齡(34.56 ± 8.87)歲；教育程度：初中及以下264例，高中及以上236例；孕產(chǎn)次：≤ 1次185例，≥ 2次315例。本研究已獲得我院倫理委員會審核通過。

納入標(biāo)準(zhǔn):①有性生活史，經(jīng)宮頸液基細(xì)胞學(xué)等檢查顯示為炎癥；②年齡≤70歲；③未出現(xiàn)陰道異常出血情況[5]；④接受檢查前24 h無性生活；⑤無陰道灌洗放藥史。

排除標(biāo)準(zhǔn):①宮頸發(fā)育異常或先天性子宮缺失者[6]；②全身免疫性疾病者；③有宮頸手術(shù)、腫瘤等病史者；④藥物過敏史患者或易過敏體質(zhì)；處于妊娠期、哺乳期女性；⑤淋病奈瑟菌、滴蟲、真菌及衣原體感染者。

1.2 方法

1.2.1婦科檢查

對陰道分泌物顏色、性狀及宮頸表面情況進(jìn)行觀察，采集陰道壁上1/3分泌物及宮頸管分泌物，使用超高倍顯微鏡檢測細(xì)菌性陰道病、陰道毛滴蟲、乳酸干凈等微生物。在超高倍鏡檢下計(jì)數(shù)1 000倍鏡下每視野乳酸桿菌的數(shù)量，0～<1個(gè)為+；1～4個(gè)為++；5～30個(gè)為+++；>30個(gè)為++++。陰道乳酸桿菌數(shù)量>++為正常。

1.2.2HPV檢測

在非月經(jīng)期，在宮頸口內(nèi)插入宮頸刷1.5～3 cm，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)4周，在留有2 ml細(xì)胞保存液的取樣管中漂洗取下的標(biāo)本，將宮頸刷沿刷柄折痕處折斷，將取樣管密封，保存于-20℃專業(yè)標(biāo)本冷藏箱中。采用上海宏石醫(yī)療科技有限公司SLAN-96s實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測儀器經(jīng)PCR熒光檢測法檢測HPV，并使用湖南圣湘生物有限公司提供的試劑盒，且嚴(yán)格根據(jù)試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.3 評價(jià)指標(biāo)

①HPV檢測及基因分型結(jié)果：肉眼直視下可見紫藍(lán)色圓點(diǎn)為陽性，反之為陰性。根據(jù)免疫膜條分布圖對HR-HPV的擴(kuò)增DNA標(biāo)本進(jìn)行判斷；統(tǒng)計(jì)不同HR-HPV亞型分布情況[7]。②多重感染分布特征：記錄二重感染、三重感染及四重感染分布特征[8]。③年齡分布情況：記錄不同年齡段單一病毒感染及多重感染情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 HR-HPV檢測及基因分型結(jié)果

500例中共檢出HR-HPV陽性90例，占18.00%，其中HPV52、HPV16、HPV58亞型所占比例最高。見表1。

表1 HR-HPV各亞型分布特征

2.2 多重感染分布特征

90例HR-HPV感染中多重感染64例，占71.11%；其中二重感染44例，占68.75%；三重感染16例，占25.00%；四重感染4例，占6.25%。見表2。

表2 HR-HPV多重感染分布特征

2.3 年齡分布情況

20～30歲及31～40歲為單一感染和多重感染的高峰年齡段，高于其他年齡段，其中以20～30歲HR-HPV感染及多重感染的比例最高。見表3。

表3 不同年齡HR-HPV感染及多重感染情況[n(%)]

3 討論

HPV感染主要通過性行為傳播，且多部分女性均為感染HPV，特別是性行為活躍的婦女，其終生HPV累積概率高達(dá)80%[9]。青春期少女或大學(xué)階段女性的HPV-DNA檢測呈陽性約占20%～25%，而性行為開始后高危型HPV感染發(fā)生率將增高，且3年內(nèi)將感染HPV，若不能及時(shí)采取有效措施將增加10年宮頸癌患者病死率[10]。因此，早期明確特定區(qū)域和種族中流行的HPV亞型，研制出針對性價(jià)值的疫苗對改善患者預(yù)后顯得尤為重要。

作為一種無包膜的雙鏈閉環(huán)DNA病毒，HPV主要感染人的皮膚或黏膜上皮細(xì)胞，造成感染部位良、惡性病變。目前已鑒別出HPV亞型高達(dá)200多種，主要可分為HR-HPV和LR-HPV兩種生物學(xué)特征[11-12]。本研究500例中檢出HR-HPV陽性90例，占18.00%，其中HPV52、HPV16、HPV58型所占比例最高，可見HR-HPV陽性檢出率較高。感染后6～8月機(jī)體可清除以游離形式存在的HPV-DNA，而當(dāng)HPV-DNA出現(xiàn)單拷貝或宿主細(xì)胞基因整合后，機(jī)體將無法清除，發(fā)展為持續(xù)感染[13]；不同亞型的HPV病毒具有不同的細(xì)菌轉(zhuǎn)化能力，而當(dāng)發(fā)展為持續(xù)性HR-HPV時(shí)極易發(fā)生多重感染[14-15]。本研究顯示，90例HR-HPV感染患者中多重感染占71.11%，并以二重感染為主，其中HPV52、HPV16、HPV58為常見的亞型感染。20～30歲及31～40歲為單一感染和多重感染的高峰年齡段，分析其原因?yàn)樵撃挲g段人群性活躍人群較多，且性生活較為頻繁，進(jìn)而增加HPV感染風(fēng)險(xiǎn)。而由于HR-HPV感染可明確發(fā)展為宮頸癌，有助于通過注射疫苗、篩查，以及早診斷、早治療等綜合措施減少宮頸癌發(fā)生[16]。

綜上所述，20～40歲為HR-HPV感染的高峰年齡段，多表現(xiàn)為多重HR-HPV感染，并以HPV52、HPV16、HPV58為常見感染亞型，故為有效預(yù)防宮頸病變應(yīng)研發(fā)針對性疫苗預(yù)防。