劉孝利 李曉博 趙敬聰 王振利 李 曉

（1山東省科創(chuàng)食用菌產業(yè)技術研究院，山東鄒城273500；2山東福禾菌業(yè)科技有限公司，山東鄒城273500）

玉木耳是李玉院士團隊在白色毛木耳變種的基礎上多孢自交選育出的優(yōu)質高產菌株，在分類上與李麗嘉和劉波在我國西沙群島發(fā)現(xiàn)的白色木耳相似，命名為象牙白木耳（Auricularia eburnean）[1]。目前玉木耳近似種在臺灣、福建、山東、河北等地均有少量栽培，名稱包括白木耳、銀白木耳、雪耳、白玉耳、白玉木耳、白毛木耳等[2]。玉木耳味道鮮美，營養(yǎng)豐富，含有豐富的蛋白質、多糖、膳食纖維和不飽和脂肪酸，且具有抗腫瘤、免疫調節(jié)和抗氧化等作用[3]，是一個極具開發(fā)潛力的食用菌品種。國內只有少量的關于毛木耳液體菌種的研究，筆者進行玉木耳液體菌種配方培養(yǎng)基試驗，為玉木耳液體菌種培養(yǎng)提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

玉木耳菌株（玉木耳1號）由吉林農業(yè)大學食藥用菌教育部工程研究中心提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 母種擴繁

母種培養(yǎng)基為PDA。配方：土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1000 mL。分裝后，經121℃滅菌30 min后，待溫度降至45℃擺斜面，冷卻后接種。接種后在23℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，菌絲長滿管后備用。

1.2.2 搖瓶液體菌種培養(yǎng)

搖瓶液體培養(yǎng)基配方：土豆300 g，葡萄糖20 g，蛋白胨2 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂1 g，水1000 mL。用1000 mL搖瓶分裝，每瓶裝液量為600 mL，用棉塞封口，并用鋁箔紙包緊瓶口后滅菌，在121℃下滅菌35 min。滅菌完成后冷卻至室溫即可接種。接種量為每瓶6小塊菌種，接種后靜止24 h，隨后在23℃的恒溫搖床上培養(yǎng)，轉速為170 r/min，7～8 d后可使用。液體菌種以菌球一致，菌液清澈不渾濁，靜止10 min后分層小于5 mm，表面只有少量泡沫為好。

1.2.3 發(fā)酵罐液體菌種配方篩選

經初步試驗，確定玉木耳液體菌種的基礎配方為：豆粉 3 kg，玉米粉 3 kg，蔗糖 5 kg，葡萄糖 5 kg，KH2PO41.0 kg，MgSO40.5 kg。試驗發(fā)酵罐容量為1000 L，裝液量800 L，控制液體培養(yǎng)基濃度在2%～2.5%，調整豆粉、玉米粉、蔗糖和葡萄糖添加量，共設置7組配方，以配方4作為對照組。詳細配方見表1。每個試驗配方3次重復。試驗使用同一批次原料，準確按配方稱量，經配料、加料、滅菌、冷卻后備用。

表1 供試玉木耳液體菌種配方 kg

1.2.4 發(fā)酵罐接種及培養(yǎng)

液體菌種按無菌操作接種于冷卻的發(fā)酵罐中，接種量為600 mL，培養(yǎng)溫度為23℃，通過調壓閥控制通氣量一致。培養(yǎng)48 h和72 h取樣檢測是否污染，總培養(yǎng)時間為96 h。

1.2.5 觀察與統(tǒng)計

待培養(yǎng)96 h后，取樣測定每100 mL菌絲干重，菌球大小、pH，觀察菌球一致性、菌球顏色。取三次重復數(shù)據(jù)的平均值，異常數(shù)據(jù)不計。

2 結果與分析

試驗結果見表2。

表2 發(fā)酵罐液體菌種配方培養(yǎng)結果

菌絲干重是評價液體菌種質量優(yōu)劣的主要標準，其次是菌球一致性、pH、菌球顏色等。由表2可知，菌絲干重由大到小的順序是配方3＞配方4＞配方2＞配方5＞配方1＞配方6＞配方7，配方3菌絲干重最大，為0.85 g/100 mL，其次是配方4，為0.80 g/100 mL；菌球大小一致性最好的是配方3和配方4，最差的是配方7；pH和菌球顏色在各個配方中均無較大差異。綜上所述，供試配方中最優(yōu)配方是配方3，其次是配方4。

3 小結

玉木耳需求量隨著玉木耳市場逐步打開會不斷上升，玉木耳生產量也會提高。在大規(guī)模生產中，液體菌種較固體菌種優(yōu)勢極為明顯，雖然一次性投入成本高，但平均生產成本低，占地面積小，穩(wěn)定性好，發(fā)菌快且污染率低，是未來玉木耳菌種發(fā)展的必然趨勢。