許晶 韋建杏 李連珠 陳侯鑫

摘要：為研究伯樂(lè)樹(shù)種子物理性狀，和種子繁育及枝條扦插的影響因素，篩選最佳的種子繁育和枝條扦插方法。選取一定的伯樂(lè)樹(shù)種子，測(cè)定其長(zhǎng)寬、千粒重、含水量等生理指標(biāo)，并在河沙、紅土、表層土基質(zhì)中進(jìn)行了種子繁育及枝條扦插試驗(yàn)。結(jié)果表明，在沙土中種子發(fā)芽率最高，達(dá)到46.67%;去皮種子發(fā)芽率達(dá)36.7%，不去皮種子發(fā)芽率為0。在扦插試驗(yàn)中，紅土和全木質(zhì)化枝條是扦插成活率最高的2個(gè)條件。沙土和全木質(zhì)化枝條扦插是愈傷組織形成率最高的2個(gè)條件。

關(guān)鍵詞：伯樂(lè)樹(shù);種子;育苗;扦插

伯樂(lè)樹(shù)（Bretschneidera sinensis）是中國(guó)特有樹(shù)種、國(guó)家一級(jí)保護(hù)樹(shù)種，在研究被子植物的系統(tǒng)發(fā)育和古地理、古氣候等方面都有重要科學(xué)價(jià)值。2003年3月，伯樂(lè)樹(shù)在海南首次發(fā)現(xiàn)并記錄，僅發(fā)現(xiàn)7株，長(zhǎng)期以來(lái)，伯樂(lè)樹(shù)更新困難，處于瀕危狀態(tài)，急需對(duì)分布在海南的伯樂(lè)樹(shù)種群進(jìn)行原地和遷地保護(hù)。伯樂(lè)樹(shù)根系發(fā)達(dá)，可選作低山營(yíng)造混交林和行道綠化樹(shù)種，并且伯樂(lè)樹(shù)樹(shù)干通直，紋理直，色紋美觀，為優(yōu)良家具用材，具有潛在開(kāi)發(fā)價(jià)值。因此，在保護(hù)海南伯樂(lè)樹(shù)現(xiàn)有野生資源的基礎(chǔ)上，開(kāi)展伯樂(lè)樹(shù)的人工培育具有非常重要的科研價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外的研究者們開(kāi)展了大量的引種栽培及播種繁殖的研究工作。喬琦等研究了伯樂(lè)樹(shù)1年生更新幼苗的死亡原因和保育策略[1];郭治友等研究了伯樂(lè)樹(shù)組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)，篩選出伯樂(lè)樹(shù)最佳芽誘導(dǎo)、增值生根培養(yǎng)基及煉苗基質(zhì)[2]。伯樂(lè)樹(shù)種子育苗是重要的研究?jī)?nèi)容，李坊貞等研究伯樂(lè)樹(shù)種子萌發(fā)的基本參數(shù)及根的組織分化過(guò)程[3];康華靖等測(cè)定了3個(gè)不同地區(qū)的伯樂(lè)樹(shù)種子形態(tài)指標(biāo)，并分別設(shè)置3種貯藏方式，結(jié)果表明，以濕沙低溫下儲(chǔ)藏的種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)為最高[4];本文通過(guò)伯樂(lè)樹(shù)種子育苗與扦插育苗，以期增加伯樂(lè)樹(shù)資源，并為進(jìn)一步的種植應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 試驗(yàn)材料

伯樂(lè)樹(shù)種子種源在海南鸚哥嶺;試驗(yàn)器材：電子天平、Ⅰ型游標(biāo)卡尺、烘干箱和水浴鍋;試驗(yàn)試劑：TTC試劑、高錳酸鉀（有效成分：80%）;試驗(yàn)基質(zhì)：河沙、紅土、表層土。

伯樂(lè)樹(shù)在鸚哥嶺及湖南伯樂(lè)樹(shù)種苗的枝條，選取健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的枝條，按試驗(yàn)要求剪成相應(yīng)長(zhǎng)度（10～15cm），上切口平剪，下切口斜剪，剪口平滑，插條不留葉。15根/捆，為1個(gè)處理。

2 試驗(yàn)方法

2.1 種子物理性狀測(cè)定試驗(yàn)

去除伯樂(lè)樹(shù)果皮、假種皮和雜質(zhì)后，根據(jù)《林木種子檢驗(yàn)規(guī)程》（GB277

2.1 999），測(cè)定伯樂(lè)樹(shù)種子的物理性狀。

2.1.1 種子長(zhǎng)寬測(cè)定方法。隨機(jī)選取300粒種子，每個(gè)重復(fù)100粒。用型號(hào)為Ⅰ型游標(biāo)卡尺（GB/T1214.2-1996）分別測(cè)量其長(zhǎng)和寬，以種子縱軸長(zhǎng)度為長(zhǎng)，橫向最大寬為其寬，測(cè)量伯樂(lè)樹(shù)種子的長(zhǎng)寬。

2.1.2 種子千拉重測(cè)定方法。先對(duì)伯樂(lè)樹(shù)種子進(jìn)行凈種，除去果皮、假種皮和雜質(zhì)，隨后以對(duì)角取樣法分別從種子中隨機(jī)取5×100粒種子，每個(gè)重復(fù)100粒，分別稱(chēng)重，計(jì)算種子百粒重，乘以10求得千粒重。

2.1.3 種子含水量的測(cè)定。選取50粒伯樂(lè)樹(shù)種子稱(chēng)量后放入105℃烘箱中烘24h后，取出在干燥器里冷卻30～45min后稱(chēng)重，用前后重量差與樣品鮮重的比值求得種子含水量。重復(fù)3次。

2.1.4 種子活力的測(cè)定方法。測(cè)定方法采用TTC染色法：將各種源種子分別用溫水（3090）浸種12h，使種子充分吸脹后利于剝除假種皮。每個(gè)種源隨機(jī)取種子25粒，剝除假種皮后沿其種胚平行切開(kāi)，每25粒為1次重復(fù)，每種源重復(fù)3次。然后將準(zhǔn)備好的種子浸泡于TTC試劑中在恒溫培養(yǎng)箱中（359C，黑暗）保溫染色3h。染色結(jié)束后倒出TTC溶液，用清水將種子沖洗2次后觀察種胚被染色的情況，統(tǒng)計(jì)被染色的種子數(shù)。

染色標(biāo)準(zhǔn)：凡種子胚根、下胚軸及子葉全部染色或者胚根、下胚軸染色，子葉大部分染成紅色的即為具有活力的種子：種胚不被染色的為死種子。

2.2 種子繁育試驗(yàn)

2.2.1 種子發(fā)芽率的測(cè)定方法。選取500粒伯樂(lè)樹(shù)種子，去除雜質(zhì)，用多菌靈（有效成分：80%，濃度：5%）對(duì)種子進(jìn)行殺菌消毒12h，沖洗干凈后播種至盛放已用高錳酸鉀（有效成分：80%，濃度：10%）消毒河沙的規(guī)格為330mm花盆中，置于室內(nèi)，每7d觀測(cè)，以種子萌發(fā)后，長(zhǎng)出子葉為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)。然而連續(xù)14d內(nèi)每天發(fā)芽粒數(shù)不超過(guò)供試種子粒數(shù)的1%為結(jié)束發(fā)芽。設(shè)置3個(gè)重復(fù)，統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)。

發(fā)芽率（%）=正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100。

發(fā)芽勢(shì)（%）=種子發(fā)芽數(shù)達(dá)到高峰時(shí)的正常發(fā)芽種子的總數(shù)/供測(cè)種子總數(shù)×100。

2.2.2 不同基質(zhì)的發(fā)芽率試驗(yàn)。選取120粒伯樂(lè)樹(shù)種子，去除雜質(zhì)，用多菌靈（有效成分：80%，濃度：5%）對(duì)種子進(jìn)行殺菌消毒12h，沖洗干凈后播種至盛放已用高錳酸鉀（有效成分：80%，濃度：10%）消毒河沙的規(guī)格為330mm花盆中，置于溫室內(nèi)，每7d觀測(cè)，以種子萌發(fā)后，長(zhǎng)出子葉為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)。然而連續(xù)14d內(nèi)每天發(fā)芽粒數(shù)不超過(guò)供試種子粒數(shù)的1%為結(jié)束發(fā)芽。統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)。

2.2.3 伯樂(lè)樹(shù)枝條扦插試驗(yàn)。本試驗(yàn)15根全木質(zhì)化枝條為1個(gè)處理，插入培養(yǎng)箱中，土質(zhì)分別為表土、沙土、紅土。扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/3，插后用手壓實(shí)，澆透水。觀察其成活率、愈傷組織形成率。

再采用15根枝條為1個(gè)處理，不同處理枝條分別為嫩枝、半木質(zhì)、全木質(zhì)。插入培養(yǎng)箱中，土質(zhì)分別為紅土。扦插深度為插穗長(zhǎng)度的1/3，插后用手壓實(shí)，澆透水。觀察其成活率、愈傷組織形成率。

成活率（%）=存貨枝條數(shù)/總枝條數(shù)×100;愈傷組織形成率（%）=形成愈傷組織的枝條數(shù)/總枝條數(shù)×100。

3 結(jié)果與分析

3.1 伯樂(lè)樹(shù)種子物理性狀

伯樂(lè)樹(shù)種子千粒重為1234.5～1408.8g，伯樂(lè)樹(shù)去假種皮千粒重為973.4～1121.9g，其種子平均長(zhǎng)度為15.98mm，種子平均寬度為12.45mm，平均含水率47.31%，種子活力測(cè)定出種子正常的百分比為95%～100%。

3.2 種子繁育試驗(yàn)

3.2.1 帶假種皮種子和去假種皮種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)的比較。帶假種皮伯樂(lè)樹(shù)種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率均為0，去皮種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為36.67%和50.00%（表2），經(jīng)方差分析表明，去皮與帶皮種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均具有顯著性差異，表明伯樂(lè)樹(shù)去假種皮有助于種子的萌發(fā)。

3.2.2 不同基質(zhì)下種子發(fā)芽率的比較。不同基質(zhì)條件下，種子發(fā)芽率均在49～63天達(dá)到穩(wěn)定。其中，河沙內(nèi)播種的種子發(fā)芽率最高，達(dá)到46.67%。表土發(fā)芽率較低，達(dá)到16.67%。紅土最低，只有3.33%。經(jīng)方差分析表明，3種基質(zhì)內(nèi)的扦插率相互之間均具有顯著性差異。

3.3 枝條扦插試驗(yàn)

3.3.1 不同基質(zhì)條件類(lèi)型時(shí)扦插存活率的影響。不同基質(zhì)類(lèi)型條件下，伯樂(lè)樹(shù)在紅土的扦插成活率最高，為73%;表土的扦插成活率最低，為61%。多重比較中，表土、沙土和紅土3種條件沒(méi)有顯著性差異，說(shuō)明表土、沙土和紅土對(duì)伯樂(lè)樹(shù)的扦插成活率沒(méi)有顯著性影響。

3.2.2 不同木質(zhì)化的枝條對(duì)扦插成活率的影響。嫩枝的伯樂(lè)樹(shù)扦插成活率（0%）<半木質(zhì)化（61%）<全木質(zhì)化（75%），顯然全木質(zhì)化的伯樂(lè)樹(shù)成活率最高。多重比較中，嫩枝與半木質(zhì)化和全木質(zhì)化有顯著性差異，而半木質(zhì)化與全木質(zhì)化無(wú)顯著性差異，所以半木質(zhì)化和全木質(zhì)化對(duì)伯樂(lè)樹(shù)扦插的成活率有顯著性影響。

3.2.3 不同基質(zhì)類(lèi)型對(duì)扦插愈傷組織形成率的影響。表土條件下的伯樂(lè)樹(shù)愈傷組織形成率表土（5.7%）<紅土（7.3%）<沙土（14.7%），由此可見(jiàn)，沙土條件下伯樂(lè)樹(shù)愈傷組織的形成率最大且為14.7%，而表土條件愈傷組織形成率較低僅為5.7%。多重比較中，表土條件和紅土條件無(wú)顯著性差異，而與沙土條件存在顯著性差異，說(shuō)明沙土條件對(duì)愈傷組織形成率有顯著性影響。

3.2.4 不同木質(zhì)化枝條對(duì)扦插愈傷組織形成率的影響。嫩枝的伯樂(lè)樹(shù)扦插成活率（0%）<半木質(zhì)化（13.3%）<全木質(zhì)化（14.7%），嫩枝的愈傷組織形成率為0，而全木質(zhì)化的愈傷組織形成率為14.7%。多重比較中，半木質(zhì)化與全木質(zhì)化無(wú)顯著性差異，而木質(zhì)化與嫩枝有顯著性差異，說(shuō)明半木質(zhì)化和全木質(zhì)化對(duì)伯樂(lè)樹(shù)愈傷組織形成率有顯著影響。

4 結(jié)論與討論

4.1 種子成分含量測(cè)定

張東生等研究發(fā)現(xiàn)伯樂(lè)樹(shù)新鮮果實(shí)平均重量為139，最大重量為18.92 g，最小為8.398;種子（含假種皮）橢圓形，平均長(zhǎng)度為1.84cm，平均寬度為1.3 3cm;新鮮種子平均粒重為2.679，最大重量為5.529，最小重量為1.61g;千粒重為2 679g[5]。通過(guò)本試驗(yàn)，測(cè)得伯樂(lè)樹(shù)種子千粒重為1234.5～1408.89，伯樂(lè)樹(shù)去假種皮千粒重為973.4～1121.08，其種子平均長(zhǎng)度為15.98mm，種子平均寬度為12.45mm，平均含水率47.31%，種子活力測(cè)定出種子正常的百分比為95%～100%。本試驗(yàn)測(cè)量的樣本量較少，測(cè)量指標(biāo)不夠，應(yīng)該繼續(xù)研究。

4.2 種子發(fā)芽試驗(yàn)

帶假種皮伯樂(lè)樹(shù)種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率均為。，去皮種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為36.67%和50.00%（表），伯樂(lè)樹(shù)去假種皮有助于種子的萌發(fā)。不同基質(zhì)條件下，表土內(nèi)播種的種子發(fā)芽率最高，達(dá)到46.67%。沙土最低，只有3.33%。表明表土有利于種子發(fā)芽。而吳彩新研究發(fā)現(xiàn)，伯樂(lè)樹(shù)種子內(nèi)缺乏萌發(fā)促進(jìn)物質(zhì)和酶活性低致其種子具深休眠特性，自然條件下萌發(fā)率僅2%～4%[6]。故而為了提高發(fā)芽率，伯樂(lè)樹(shù)種子需要催芽。武銘凱等研究發(fā)現(xiàn)機(jī)械破裂種皮、清水浸泡36h、種臍向下的方式最好，出土?xí)r間最早（10d）、出土天數(shù)最少（3d），種子發(fā)芽率最高，平均發(fā)芽率為86%1'10相較而言，本試驗(yàn)設(shè)置的考慮因素不夠，忽視了種臍朝向，可能會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。

4.3 枝條扦插試驗(yàn)

不同扦插基質(zhì)中紅土的扦插成活率最高，達(dá)73%。沙土的愈傷組織形成率最高達(dá)14.7%。不同木質(zhì)化枝條扦插中，全木質(zhì)化枝條成活率和愈傷組織形成率都是最高，分別達(dá)75%和14.7%。嫩枝的扦插成活率和愈傷組織形成率都為0。而陳輝等研究發(fā)現(xiàn)，扦插時(shí)根莖粗度以0.5cm以下為好，發(fā)根率高，萌芽率也強(qiáng)[8]。本試驗(yàn)中未將根莖粗度作為變量參考，可能會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生一些影響。

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