王閃閃，黃文忠，曾廣智，李干鵬，朱 鴻，張 再，高雪梅

(1. 云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國家民族事務(wù)委員會-教育部重點實驗室，云南 昆明 650500；2. 昆明學(xué)院 化學(xué)科學(xué)與技術(shù)系，云南 昆明 650500)

神黃豆 (CassiaagnesBrenan) 系豆科 (Leguminosae) 決明屬喬木植物，生山地林中，原產(chǎn)云南、廣西等地并分布于中南半島.果有類似興奮劑的作用，種子入藥，可治胃痛、感冒、瘧疾、麻疹、水痘、便秘等[1].黃波、和東陽等[2-3]對神黃豆的化學(xué)成分進(jìn)行過研究，但對神黃豆藥理活性研究的文獻(xiàn)鮮有報道，為充分利用我國豐富的資源，進(jìn)一步尋找新的活性天然產(chǎn)物，文中對神黃豆莖葉部分的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從中分離得到10個單體化合物(見圖1)，其中1～9為黃酮類化合物，化合物1～6、8和10為首次從該植物中分離得到.

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

Bruker AM-400 超導(dǎo)核磁共振儀(德國 Bruker 公司)；VG Antospec-3000質(zhì)譜儀(國 VG公司)；旋光儀Jasco DIP-1000(日本 Spectroscopic 公司)；Perkin Elmer spectrum 100 FT-IR 紅外光譜儀(美國 Perkin Elmer 公司)；Agilent 1100高效液相色譜儀，色譜柱為Zorbax SB-C18柱(21.2 mm×25 cm).100～200、200～300 目硅膠和 GF254硅膠板，青島海洋化工廠產(chǎn)品；二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、石油醚、丙酮(工業(yè)級)，云南祥瑞化玻教儀研發(fā)有限公司；甲醇(分析純)，天津市瑞金特化學(xué)品有限公司； 薄層色譜法顯色，顯色劑為 5% H2SO4乙醇顯色劑，噴灑后適當(dāng)加熱即可；純凈水，娃哈哈飲用純凈水.

實驗用決明屬植物粉花山扁豆2014年5月采于云南省西雙版納州，經(jīng)中科院西雙版納植物園馬宏鑒定為豆科蘇木亞科決明屬植物神黃豆(CassiaagnesBrenan)的莖葉.

1.2 提取與分離

取曬干的神黃豆莖葉15 kg，粉碎過0.441 mm篩，然后用體積分?jǐn)?shù)為90%乙醇溶液室溫下提取 3 次，每次用量為 20 L，室溫浸泡、超聲 3 次(每次 30 min)，過濾，減壓濃縮，得到浸膏 2.2 kg，經(jīng)硅膠柱柱色譜粗分，用不同比例的V(二氯甲烷)∶V(甲醇)流動相進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)TLC指導(dǎo)合并相同組分，得到 8 個極性段 A～H (1∶ 0、20∶ 1、9∶ 1、8∶ 2、7∶ 3、6∶ 4、1∶ 1、0∶ 1)，C部分(V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=9∶ 1,90 g)經(jīng)200～300目硅膠柱色譜，V(二氯甲烷)∶V(乙酸乙酯)=(1∶ 0、20∶ 1、9∶ 1、8∶ 2、7∶ 3、6∶ 4、1∶ 1、1∶ 0)梯度洗脫，分成8個部分，C1～C8，其中組分C3～C7分別經(jīng)硅膠柱層析得亞組分，再經(jīng)硅膠柱色譜，凝膠色譜，高效液相色譜等方法，分離純化得到10個單體化合物，分別為化合物1～10.

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1黃色粉末，溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 433.1 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:7.73 (2H, ss, 2′-H, 6′-H), 6.91 (2H,ss, 3′-H, 5′-H), 6.33 (1H,d,J=1.55 Hz, 6-H),6.16(1H,d,J=1.55 Hz,8-H),5.35 (1H,s,1″-H),4.21(1H,s,2″-H),3.70 (1H,m,3″-H),3.29(2H,m,4″-H,5″-H),0.90 (3H,d,J=4.9 Hz, 6″-H);13C NMR(100 MHz, CDOD3)δ:179.7 (C-4),165.9 (C-2),163.2(C-4′),161.6 (C-9), 159.4(C-7),158.6(C-5),136.3(C-6),132.0(C-2′,C-6′),122.8(C-1′),116.7(C-3′,C-5′),106.1(C-10),103.6(C-1″),99.9(C-8),94.9(C-3),73.2(C-,5″),72.2(C-4″),72.2(C-3″),72.0(C-2″),17.8(C-6″), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報道基本一致，因此鑒定該化合物為山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷.

化合物2棕色固體，溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 449.1[M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:7.25 (1H, s, 3′-H), 7.22 (1H, d,J= 8.4 Hz, 5′-H), 6.83 (1H, d,J= 8.1 Hz, 6′-H), 6.29 (1H, s, 8-H, 6.12 (1H, s, 6-H), 5.26 (1H, s, 1″-H), 4.60 (1H, s, 2″-H), 4.14 (1H, s, 3″-H), 3.67 (1H, d,J= 7.8 Hz, 4″-H), 3.33 (1H, dd,J= 9.4,15.4 Hz, 5″-H), 0.86 (3H, d,J= 5.9 Hz, 6″-H);13C NMR(100 MHz, CDOD3)δ:179.4 (C-4), 166.1 (C-7), 163.2 (C-5), 158.5 (C-2), 157.9 (C-9), 150.8 (C-4′), 147.5 (C-2′), 136.3 (C-3), 122.5 (C-1′), 122.4 (C-6′), 117.4 (C-3′), 116.8 (C-5′), 105.7 (C-10), 104.3 (C-1″), 100.0 (C-6), 94.8 (C-8), 73.6 (C-3″), 72.8 (C-2″), 72.4 (C-4″), 72.3 (C-5″), 18.7 (C-6″), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報道基本一致，因此鑒定該化合物為桑色素-3-O-α-鼠李糖苷.

化合物3黃色粉末，溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 287.1[M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:8.07 (2H, ss, 2′-H, 6′-H), 6.89 (2H, ss, 3′-H, 5′-H), 6.38 (1H, s, 6-H), 6.17 (1H, s, 8-H);13C NMR(100 MHz, CDOD3)δ:177.5 (C-4), 165.7 (C-7), 162.6 (C-5), 160.7 (C-4′), 158.4 (C-9), 148.2 (C-2), 137.3 (C-3), 130.8 (C-2′, 6′), 123.9 (C-1′), 116.5 (C-3′, 5′), 104.6 (C-10), 99.4 (C-6), 94.6 (C-8), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報道基本一致，因此鑒定該化合物為山奈酚.

化合物4黃色粉末，溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 287.1[M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ: 7.36 (1H, s, 8-H), 7.35 (1H, s, 6-H), 6.87 (1H, d,J= 8.5 Hz, 2′-H), 6.51 (1H, s, 6′-H), 6.41 (1H, d,J= 1.6 Hz, 3-H), 6.18 (1H, d,J= 1.5Hz, 5′-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:184.3 (C-4), 166.5 (C-7), 166.2 (C-2), 163.4 (C-9), 159.6 (C-5), 151.2 (C-4′), 147.2 (C-3′), 123.8 (C-1′), 120.1 (C-6′), 116.9 (C-5′), 114.3 (C-2′), 105.2 (C-10), 104.0 (C-3), 100.3 (C-6), 95.2 (C-8), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報道基本一致，因此鑒定該化合物為5, 7, 3′, 4′-四羥基黃酮.

化合物5黃色晶體, 溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 317.1 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:3.75 (3H, s, H-11), 6.17 (1H, s, 6-H), 6.37 (1H, s, 8-H), 6.87 (1H, d,J= 8.4 Hz, 5′-H), 7.50 (1H, d,J= 8.4 Hz, 6′-H), 7.60 (1H, s, 2′-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:180.4 (C-4), 166.1 (C-7), 163.2 (C-5), 158.6 (C-9), 158.1 (C-2), 150.1 (C-4′), 146.6 (C-3′), 139.7 (C-3), 123.1 (C-1′), 122.5(C-6′), 116.6 (C-5′), 116.5 (C-2′), 106.0 (C-10), 99.9 (C-6), 94.9 (C-8), 60.7 (C-11), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報道基本一致，因此鑒定該化合物為3-甲氧基槲皮素.

化合物6黃色粉末，溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 303.0 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:6.16 (1H, d,J= 2.0 Hz, 8-H), 6.38 (1H, d,J= 2.0 Hz, 6-H), 6.89 (1H, d,J= 3.4 Hz, 5′-H), 8.06 (1H, dd,J= 8.4, 2.4 Hz, 6′-H), 8.08 (1H, d,J= 2.2 Hz, 2′-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:177.5 (C-4), 165.7 (C-7), 162.6 (C-5), 158.4 (C-9), 148.2 (C-3′), 147.2 (C-2), 137.3 (C-3), 123.8 (C-6′), 116.5 (C-2′, C-5′), 105.1 (C-10), 99.4 (C-6), 94.6 (C-8), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報道基本一致，因此鑒定該化合物為3, 5, 7, 3′, 4′-五羥基黃酮.

化合物7白色針狀, 溶于甲醇.ESI-MS (m/z)274.2 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:7.28 (2H, d,J= 8.4Hz, 2′, 6′-H), 6.76 (2H, d,J= 8.5 Hz, 3′, 5′-H), 5.93 (1H, s, 6-H), 5.90 (1H, s, 8-H), 4.83 ((1H, s, 2-H), 4.14 (1H, s, 3-H), 2.85 (1H, dd,J=4.5, 16.8 Hz, 4-H), 2.71 (1H, dd,J= 16.8, 4.5 Hz, 4-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:158.1 (C-4′), 157.9 (C-10), 157.7 (C-7), 157.5 (C-5), 131.7 (C-1′), 129.3 (C-2′,6′), 115.9 (C-3′,5′), 100.2 (C-9), 96.6 (C-6), 96.1 (C-8), 80.0 (C-2), 67.5 (C-3), 29.5 (C-4), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報道基本一致，因此鑒定該化合物為表阿夫兒茶精.

化合物8棕色固體, 溶于甲醇.ESI-MS (m/z)291.1 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:6.92 (1H, s, 2′-H), 6.74 (1H, d,J= 8.4 Hz, 5′-H), 6.70 (1H,d,J= 8.1, 6′-H), 5.89 (1H, s, 8-H), 5.87 (1H, s, 6-H), 4.75 (1H, s, 2-H), 4.11 (1H, s, 3-H), 2.81 (1H, dd,J= 16.8, 4.5 Hz, 4-H), 2.68(1H, dd,J=16.8, 2.1 Hz, 4-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:158.1 (C-5), 157.7 (C-7), 157.4 (C-9), 146.0 (C-3′), 145.8 (C-4′), 132.3 (C-1′), 119.5 (C-6′), 116.0 (C-2′), 115.4 (C-5′), 100.2 (C-10), 96.5 (C-6), 96.0 (C-8), 79.9 (C-2), 67.5 (C-3), 29.3 (C-4), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報道基本一致，因此鑒定該化合物為表兒茶素.

化合物9棕色膠狀物, 溶于甲醇.ESI-MS (m/z)579.1 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:7.36 (2H, d,J= 8.4 Hz, 16-H, 16′-H), 6.81 (2H, d,J= 8.4 Hz, 13-H, 13′-H), 6.75 (2H, d,J=7.6 Hz, 15-H, 15′-H), 6.09 (3H, m, 6, 6′, 8-H), 5.05 (1H, s, 2-H), 4.87 (1H, s, 2′-H), 4.67 (1H, s, 4-H), 4.31 (1H, s, 3-H, 5″-H), 3.96 (1H, s, 3′-H), 2.82 (2H, m, 4′-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:158.5 (C-7, 7′), 157.6 (C-5, 5′), 156.2 (C-9, 9′), 155.6 (C-14, 14′), 131.8 (C-11, 11′), 129.2 (C-12, 12′, 16, 16′), 115.9 (C-13, 13′, 15, 15′), 100.6 (C-10, C-10′), 96.7 (C-6, 6′), 96.0 (C-8, C-8′), 79.9 (C-2′), 77.1 (C-2), 72.8 (C-3), 67.2 (C-3′), 36.9 (C-4), 29.4 (C-4′), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]報道基本一致，因此鑒定該化合物為Epicatechin-(4β→8′)-表兒茶素.

化合物10棕色晶體, 溶于甲醇.ESI-MS (m/z) 155.0 [M+H]+;1H NMR (400 MHz, CDOD3)δ:7.32 (1H, s, 2-H), 7.30 (1H, d,J= 8.0 Hz, 6-H), 6.68 (1H, d,J= 8.0 Hz, 5-H);13C NMR (100 MHz, CDOD3)δ:170.5 (C=O), 51.6 (C-4), 146.2 (C-3), 124.0 (C-6), 123.3 (C-1), 117.9 (C-5), 115.9 (C-2), 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報道基本一致，因此鑒定該化合物為原兒茶酸.

3 結(jié)語

對神黃豆莖葉體積分?jǐn)?shù)為90%乙醇提取物進(jìn)行了化學(xué)成分研究，分離得到10個單體化合物，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)及查閱相關(guān)文獻(xiàn)，分別將其鑒定為山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷 (1),桑色素-3-O-α-鼠李糖苷 (2), 山奈酚 (3), 5, 7, 3′, 4′-四羥基黃酮 (4), 3-甲氧基槲皮素 (5), 3, 5, 7, 3′, 4′-五羥基黃酮 (6), 表阿夫兒茶精 (7), 表兒茶素 (8),表兒茶素-(4β→8′)-表兒茶素 (9), 原兒茶酸(10).其中，1～6、8和10為首次從該植物中分離得到.