蔡紅梅 田子玉
摘要:目的:建立草莓中總多糖含量測定方法。方法:以葡萄糖為對照品,采用苯酚一硫酸法,在490nm處測定吸光度。結果:葡萄糖濃度在10~100mg/L范圍內與吸光度呈良好的線性關系(r=0.9995);回收率在90.0%~101.5%范圍內,測得不同品種的草莓總多糖含量在3.43%~5.43%。結論:該方法簡便準確、穩(wěn)定可靠,可作為草莓中總多糖含量的測定方法。
關鍵詞:苯酚-硫酸法;草莓;總糖含量
中圖分類號:TS262.6 文獻標識碼:A DOI編號:10.140254.cnki.jlny.2019.04.011
草莓是薔薇科草莓屬植物,由于其營養(yǎng)豐富、含有多種營養(yǎng)物質、且有保健功效等特點廣受人們的喜愛。已報道的總糖含量測定方法有苯酚-硫酸、蒽酮-硫酸等,其中,苯酚-硫酸法的應用最多。本實驗建立苯酚-硫酸法測定草莓中總糖含量的方法,旨在為草莓品質分析提供理論基礎。
1材料與方法
1.1原料
不同品種的草莓,購自長春市的某超市和農貿市場。
1.2試劑
苯酚、葡萄糖、濃硫酸、乙腈等試劑均為國產分析純。
1.3儀器
電子天平(德國Sartorius);GSY-11型恒溫水浴箱(北京市醫(yī)療設備廠);分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);數控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);TDL-40B離心機(上海安亭科學儀器廠)。
1.4供試溶液的制備
草莓勻漿后,準確稱取1g(精確到0.001g)于25mL具塞試管內,加入10mL的乙腈一水(v:v=1:9)溶液,渦旋10s,超聲提取30rain,離心,取上清液,制得供試溶液。
1.5標準溶液的配制
取適量葡萄糖于105℃烘箱內烘至恒重,精確稱取0.1000g于100mL容量瓶,用蒸餾水溶解定容刻度,即得濃度為1.0000mg/mL的葡萄糖標準溶液。
1.6標準曲線的繪制
精確量取0.00 mL、1。00 mL、2.00 mL、4.00 mL、8.00mL、10mL葡萄糖標準溶液(1.5),分別置于100mL的容量瓶,加水定容至刻度,搖勻。精確量取上述各溶液2mL,加入lmL 5%苯酚試液,再加入5mL濃H2So4,靜置5rain,于40℃水浴上加熱30rain,取出,冷卻至室溫,490nm測吸光度值。以吸光度值A為縱坐標,濃度C(mg/mL)為橫坐標,繪制標準曲線。
2結果與討論
2.1方法學驗證
2.1.1標準曲線及線性范圍回歸曲線方程為;A=8.945C一0.0423;相關系數r=0.9995;線形范圍:10~100 mg/L。表明葡萄糖濃度在10~100 mg/L范圍內與吸光度呈現良好的線性關系。
2.1.2精密度實驗取質量濃度為20mg/L的葡萄糖標準溶液2mL,按照1.6方法測定吸光度值,連續(xù)測定6次,計算相對便準偏差為1.56%,符合實驗的要求。
2.1.3穩(wěn)定性實驗取質量濃度為20mg/L的葡萄糖標準溶液2mL,按照1。6方法,分別在0min、10min、20min、30rain、60min內分別測定吸光度值,結果吸光度值RSD值為2.37%,表明供試品溶液在60rain是穩(wěn)定的。
2.1.4重復性實驗取質量濃度為20mg/L的葡萄糖標準溶液6份,每份2mL,按照1。6方法測定吸光度值,計算吸光度值的RSD為3.85%,表明重復性良好。
2.1.5加標回收實驗精密量取1。8mL已知含量的供試品溶液6份,分別置25mL試管中,精密加入0.2mL對照品溶液,按1.6中的方法測定吸光度,計算回收率,結果見表1。
由結果可見,樣品的加標回收率在90.00%~101。5%范圍內,表明該方法測定草莓中的總糖含量準確可行。
2.2樣品含量測定
采用苯酚一硫酸法測定不同品種的草莓中總糖含量,結果見表2。
3結論
通過方法學考察及樣品含量測定,表明所建立的苯酚一硫酸法測定草莓中總多糖含量方便準確、實際應用性良好,可用于該產品的質量控制。