陳峰杰

摘 要：肝纖維化是各種慢性肝損傷后的修復(fù)反應(yīng)。肝星狀細(xì)胞（HSC）是肝纖維化進(jìn)程中的主要細(xì)胞，它的活化被認(rèn)為是肝纖維化進(jìn)程中的關(guān)鍵事件。肝星狀細(xì)胞受到枯否細(xì)胞（KC）在內(nèi)的多種肝內(nèi)細(xì)胞分泌的多種細(xì)胞因子的影響。KC分泌的細(xì)胞因子對(duì)HSC活化作用是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)，各細(xì)胞因子也是抗肝纖維化的重要靶標(biāo)。

關(guān)鍵詞：肝纖維化;肝星狀細(xì)胞;枯否細(xì)胞;細(xì)胞因子

中圖分類(lèi)號(hào)：R575.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-2064（2019）02-0199-02

各種致病因子所致的肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，以細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過(guò)度沉積為特征的病理過(guò)程，稱(chēng)為肝纖維化。肝纖維化是各種慢性肝病共同的特征和向肝硬化轉(zhuǎn)歸的中轉(zhuǎn)站[1]，也被認(rèn)為是對(duì)慢性肝臟損傷的一種修復(fù)反應(yīng)。

HSC是肝纖維化進(jìn)程中的主要細(xì)胞，占肝內(nèi)細(xì)胞總數(shù)的5%-8%，具有靜止和激活兩種表型。正常情況下處于靜止?fàn)顟B(tài)，在各種病因的刺激下靜止HSC釋放出Vitamin A發(fā)生形態(tài)上的改變稱(chēng)為HSC活化?；罨蟮腍SC可產(chǎn)生大量ECM，這是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)[2]。KC是肝內(nèi)固有的巨噬細(xì)胞。在正常情況下KC能識(shí)別、吞噬、清除殺滅病原微生物與異物，有分泌、抗原提呈和參與免疫應(yīng)答等作用，是機(jī)體的一道防御屏障[3]。

1 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF-β）

TGF-β是一類(lèi)結(jié)構(gòu)相關(guān)、功能相似的活性多肽，參與多種細(xì)胞的增殖分化、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤發(fā)生及組織損傷修復(fù)等過(guò)程。肝內(nèi)主要為T(mén)GF-β1。TGF-β1是纖維化形成中最重要的始動(dòng)刺激因子，也是迄今為止已知得最強(qiáng)烈的肝纖維化促進(jìn)因子[4]。肝纖維化時(shí)，肝內(nèi)TGF-β1及其受體表達(dá)明顯增多。肝臟損傷和炎癥可使肝臟KC產(chǎn)生大量TGF-β1，TGF-β1與細(xì)胞膜受體結(jié)合，激活Smads蛋白形成復(fù)合物，轉(zhuǎn)入細(xì)胞核內(nèi)與各種轉(zhuǎn)錄因子相結(jié)合調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。TGF-β1可作用于多種細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)分化、誘導(dǎo)激活HSC、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成抑制其降解等多種作用。TGF-β1使HSC轉(zhuǎn)化為肌纖維母細(xì)胞并分泌膠原。活化后的HSCs又可以分泌大量的TGF-β1促進(jìn)肝纖維化進(jìn)程。TGF-β1促進(jìn)膠原蛋白、纖維結(jié)合蛋白、層黏連蛋白的合成并抑制其降解，抑制HSC合成膠原蛋白酶。Flisiak等[5]研究結(jié)果表明TGF-β1促使HSC對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的表達(dá)，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，減弱ECM的降解。因此在很大程度上，TGF-β1打破了細(xì)胞外基質(zhì)合成與降解之間的平衡關(guān)系，導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)合成大于降解，誘導(dǎo)肝纖維化的發(fā)生。

2 血小板源生長(zhǎng)因子（PDGF）

多因素如病毒、化學(xué)物質(zhì)、損傷等均可引起枯否細(xì)胞在內(nèi)的肝內(nèi)多種細(xì)胞合成并釋放PDGF。PDGF是目前發(fā)現(xiàn)的HSC最強(qiáng)的有絲分裂原，肝纖維化進(jìn)程中PDGF與其受體的表達(dá)明顯高于正常的的肝組織，PDGF表達(dá)的量與肝纖維化程度呈顯著正相關(guān)[6]。PDGF可通過(guò)與HSC細(xì)胞膜上特異性受體結(jié)合，激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)分子轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)入核，促進(jìn)靶基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，進(jìn)而使HSC增殖活化并轉(zhuǎn)化為肌樣成纖維細(xì)胞，分泌大量ECM。PDGF可活化HSC內(nèi)多條信號(hào)傳導(dǎo)通路。PDGF與其受體結(jié)合后，引起受體的自動(dòng)磷酸化，增多第二信使磷脂酸產(chǎn)生，使細(xì)胞外信號(hào)激酶（ERK）活化，ERK進(jìn)一步作用于DNA轉(zhuǎn)錄因子，促進(jìn)HSC增殖活化。同時(shí)PDGF可以促進(jìn)誘導(dǎo)HSC合成TGF-β1等細(xì)胞因子，上調(diào)TIMP-1而抑制膠原酶活性，促進(jìn)膠原合成并減少ECM的降解。

3 腫瘤壞死因子（TNF-α）

KC是產(chǎn)生TNF-α的主要來(lái)源。TNF-α可以通過(guò)加強(qiáng)HSC的趨化性，促進(jìn)HSC的增殖，促進(jìn)肝纖維化的形成。TNF-α處理的HSC 24h后膠原含量可以增加3倍以上。TNF-α 還有明顯的抑制活化的HSC凋亡的作用。研究表明，TNF-α的促纖維化作用與其抑制活化的HSC凋亡有關(guān)[7]。肝纖維化過(guò)程中TNF-α可促使 TGF-β刺激細(xì)胞外基質(zhì)的合成增多。TNF-α可促進(jìn)肝內(nèi)膠原合成。TNF-α是有免疫活性的細(xì)胞因子，與IL-6、IL-1形成重要的炎癥介質(zhì)，刺激HSC細(xì)胞的增殖，促進(jìn)HSC產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)。對(duì)HSC的增殖、活化及合成細(xì)胞外基質(zhì)等方面有著重要的影響。減少TNF-α的合成或拮抗TNF-α的作用可以顯著降低肝臟損傷程度。

4 NF-κB

NF-κB主要由p50和p65兩個(gè)亞基組成。細(xì)胞在靜息狀態(tài)下，NF-κB與其抑制因子相結(jié)合形成NFκB/IκB復(fù)合體。研究發(fā)現(xiàn)，NF-κB參與并調(diào)控肝纖維化過(guò)程的多個(gè)環(huán)節(jié)。在肝纖維化形成過(guò)程中，激活的NF-κB可上調(diào)對(duì)KC對(duì)炎性介質(zhì)的表達(dá)，激活未活化KC中的NF-κB，產(chǎn)生更多的炎性介質(zhì)造成肝臟損傷，促進(jìn)HSC增殖活化后形成肝纖維化。在肝纖維化損傷過(guò)程中，NF-κB既參與調(diào)控肝細(xì)胞的凋亡和增殖，又可以刺激KC產(chǎn)生各種炎性因子，同時(shí)還促進(jìn)HSC的活化[8]。NF-κB不僅參與HSC早期激活，而且對(duì)HSC的持續(xù)激活也有重要作用。NF-κB可促使HSC中的COX2、IL-6及IL-8基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)相應(yīng)的產(chǎn)物，加重肝臟炎癥，并通過(guò)自由基、TGF-β等炎性介質(zhì)，從而維持 HSC活化促成肝臟纖維化的發(fā)生。NF-κB活化又可以阻斷TNF-α介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡效應(yīng)[9]。

5 白介素

IL-1在多環(huán)節(jié)上參與了肝纖維化過(guò)程。IL-1可通過(guò)刺激HSC活化來(lái)合成ECM及多種細(xì)胞因子。分泌的細(xì)胞因子和沉積的ECM又有持續(xù)活化肝星狀細(xì)胞的作用。IL-1通過(guò)促進(jìn)組織金屬蛋白酶抑制劑的產(chǎn)生，抑制金屬蛋白酶對(duì)ECM的降解，增強(qiáng)TGF-β1致纖維化作用。IL-6可直接刺激HSC增殖及合成膠原、層粘連蛋白和蛋白多糖，抑制膠原酶活性，減少膠原蛋白降解，促進(jìn)膠原沉積加速肝纖維化進(jìn)程。IL-6又可刺激KC分泌更多的細(xì)胞因子，如TGF、PDGF等產(chǎn)生更多的ECM。IL-10為肝臟中重要的炎癥抑制因子，有減輕肝纖維化的作用。Thompson K等研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性IL-10對(duì)肝纖維化有明顯抑制作用。翁山耕等[10]表明，IL-10主要通過(guò)減少KC分泌TNF-α，阻斷KC和HSC間的協(xié)同作用，從而抑制HSC的激活。IL-10在多環(huán)節(jié)參與了肝纖維化過(guò)程。IL-10可通過(guò)多種途徑抑制肝星狀細(xì)胞的激活和增殖，抑制NF-κB的活性。IL-10能直接阻斷NF-κB與不依賴(lài)NF-κB核轉(zhuǎn)位的結(jié)構(gòu)結(jié)合，從而抑制HSCs的激活對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的重塑中有作用。IL-10能下調(diào)MMP-2和TIMP-1的表達(dá)，減少膠原沉積。IL-10可通過(guò)抑制細(xì)胞因子如TGF-β1、TNF-α的表達(dá)，來(lái)抑制TIMP-1的表達(dá)[11]。IL-10抗纖維化作用與抑制PDGF-BB表達(dá)與IGF-1表達(dá)的下調(diào)有關(guān)[12]。

6 干擾素（IFN）

臨床試驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均證實(shí)，IFN對(duì)肝纖維化有抑制作用且有良好的遠(yuǎn)期療效。干擾素減輕肝纖維化的作用機(jī)制可能與IFN-A抑制HSC增殖，通過(guò)抑制膠原的RNA表達(dá)、降低中TGF-β1水平[13]及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1的水平以及抑制PDGF-BB表達(dá)[14]從而達(dá)到抗肝纖維化的作用。IFN可抑制TGF-β活性降低ECM的含量，明顯改善CCL4所致大鼠肝纖維化模型的炎癥反應(yīng)，有逆轉(zhuǎn)肝纖維化的作用。IFN有α和γ兩種類(lèi)型。IFN-α可促進(jìn)肝星狀細(xì)胞凋亡，減少ECM分泌并促進(jìn)其降解，減少基質(zhì)金屬蛋白酶抑制物。IFN-γ能抑制HSC增殖、活化，降低α-SMA、Ⅰ、Ⅳ膠原的表達(dá)，促進(jìn)KC生成 IL及TNFα。IFN-γ具有較強(qiáng)的抑制HSC活化與ECM的生成的作用，可促進(jìn)Ⅰ、Ⅲ型膠原降解。

7 胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）

胰島素樣生長(zhǎng)因子可影響許多器官內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化及代謝的調(diào)節(jié)。IGF及其受體參與肝纖維化的形成。胰島素樣生長(zhǎng)因子有IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ兩種類(lèi)型，二者都具有胰島素樣活性。IGF-1可抑制HSC的活化，具有抗肝纖維化的作用，可能與提高超氧化物歧化酶及過(guò)氧化氫酶的活性，減少引起HSC活化的刺激因素有關(guān)。

8 活性氧分子（ROS）

KC能產(chǎn)生大量活性氧，通過(guò)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，加重肝纖維化程度。氧化應(yīng)激是肝纖維化及HSC激活中重要的致病因素。HSC活化狀態(tài)和氧化應(yīng)激的水平相關(guān)。氧化應(yīng)激在誘導(dǎo)HSC的增殖和促進(jìn)膠原合成在肝纖維化中有著重要的作用。KC釋放的ROS通過(guò)旁分泌的方式刺激HSC，激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，促進(jìn)HSC的膠原合成。

各種損傷因子引起肝損傷，刺激KC分泌多種細(xì)胞因子。KC連同肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞以及自身分泌分泌多種細(xì)胞因子，使靜息狀態(tài)的HSC活化并轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維細(xì)胞，合成大量ECM。KC分泌的多種細(xì)胞因子還可以參與免疫調(diào)節(jié)、調(diào)控組織和基質(zhì)修復(fù)等過(guò)程，促進(jìn)了肝纖維化的形成和發(fā)展。Duffield等研究顯示，肝纖維化進(jìn)展期阻斷KC可抑制肝纖維化的發(fā)展，肝纖維化恢復(fù)期阻斷KC可抑制ECM的降解。

闡明KC分泌的細(xì)胞因子與肝纖維化進(jìn)程的關(guān)系，深人探討KC、HSC之間的相互影響，對(duì)研究肝纖維化的發(fā)病機(jī)理、防治及發(fā)現(xiàn)抗肝纖維化分子作用靶點(diǎn)有重要意義。KC有可能成為逆轉(zhuǎn)肝纖維化新的靶細(xì)胞，為肝纖維化和肝硬化的防治帶來(lái)新的突破。

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