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        高效液相色譜同時(shí)測(cè)定游泳池水中二甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸的方法研究

        2019-03-23 10:53:30
        醫(yī)藥前沿 2019年36期
        關(guān)鍵詞:海因氯乙酸二甲基

        吳 飛 陳 晨

        (揚(yáng)州市疾病預(yù)防控制中心 江蘇 揚(yáng)州 225002)

        對(duì)游泳池水進(jìn)行嚴(yán)格的消毒殺菌,是防止各種疾病的傳播,保障游泳者健康與池水水質(zhì)的必要措施。我國(guó) GB26370-2010《含溴消毒劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[1]規(guī)定,溴氯海因和二溴海因適用于游泳池水、污水和一般物體表面消毒。GB/T36758-2018《含氯消毒劑衛(wèi)生要求》[2]規(guī)定,二氯海因可用醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)、公共場(chǎng)所和水的消毒。

        二氯海因、溴氯海因和二溴海因均屬乙內(nèi)酰脲類衍生物,在水中水解生成5,5-二甲基乙內(nèi)酰脲、次溴酸和次氯酸,起消毒殺菌作用。但其在消毒過程中可與水中有機(jī)物發(fā)生反應(yīng),生成對(duì)人體有害的鹵代消毒副產(chǎn)物。大量研究表明,鹵乙酸僅次于三鹵甲烷的第二大類 DBPs,其濃度約占DBPs總量的13%,但致癌風(fēng)險(xiǎn)占總致癌風(fēng)險(xiǎn)的91.95%以上。常見的HAAs 有 一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸、一溴乙酸、二溴乙酸、三溴乙酸、溴氯乙酸、一溴二氯乙酸、二溴一氯乙酸9 種[3]。目前文獻(xiàn)報(bào)道的測(cè)定乙內(nèi)酰脲的方法有液相色譜法[4];9種鹵乙酸的檢測(cè)方法有液相色譜-質(zhì)譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、氣相色譜法[3,5-6],前兩種方法儀器設(shè)備價(jià)格昂貴,難以在基層實(shí)驗(yàn)室開展檢測(cè),后一種方法需要衍生,操作繁瑣,本實(shí)驗(yàn)在保證目標(biāo)化合物峰型對(duì)稱性和分離效果的條件下,通過適當(dāng)加大進(jìn)樣量,建立了同時(shí)測(cè)定游泳池水中二甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸的高效液相色譜分析方法

        1.實(shí)驗(yàn)部分

        1.1 儀器

        1290型高效液相色譜儀,配自動(dòng)進(jìn)樣器和二極管陣列檢測(cè)器(美國(guó)Agilent公司)。

        1.2 試劑

        二甲基乙內(nèi)酰脲、9種鹵乙酸標(biāo)準(zhǔn)品(上海安譜公司);甲醇 (上海安譜公司CNW);磷酸氫二鈉、磷酸(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

        1.3 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

        分別取適量的二甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸標(biāo)準(zhǔn)品(精確到0.01mg)用純水溶解定容至50ml,配制濃度為1000mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,置于冰箱中保存。精密吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用純水逐級(jí)稀釋成0.02mg/L~20.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。

        1.4 實(shí)驗(yàn)方法

        1.4.1 樣品前處理 均勻水樣經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后,收集約1.5ml按色譜條件進(jìn)行測(cè)定。

        1.4.2 色譜條件 PICKERING-C8 色譜柱(4.6 mm×250mm,5μm);柱溫30℃;流量1.0ml/min;進(jìn)樣體積100μL;檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm,流動(dòng)相:A為甲醇,B為0.01mol/L磷酸氫二鈉(PH7.5)。梯度洗脫程序:0~6min時(shí),A為5%;6~20min時(shí),A由5%升至20%,20~25min時(shí),A由20%降至5%,保持5min。

        圖1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

        2.結(jié)果

        2.1 流動(dòng)相條件的選擇

        為確定合適的流動(dòng)相和梯度洗脫程序,分別采用乙腈-水、甲醇-水、甲醇-0.02mol/L乙酸銨、甲醇-0.01mol/L磷酸氫二鈉作為流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并比較了在不同pH條件下的分離度,在柱溫30℃;流量1.0ml/min;流動(dòng)相:A為甲醇,B為0.01mol/L磷酸氫二鈉(PH7.5),0~6min時(shí),A為5%;6~20min時(shí),A由5%升至20%,20~25min時(shí),A由20%降至5%,保持5min的條件下甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸能達(dá)到有效分離且峰型對(duì)稱性好,游泳池水中尿素在此條件下不保留,不對(duì)檢測(cè)產(chǎn)生干擾,故選用上述流動(dòng)相比例作為本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)條件。

        2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

        利用二極管陣列檢測(cè)器在190nm~400nm之間進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,在本流動(dòng)相條件下二甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸最大吸收波長(zhǎng)在200nm~216nm之間,綜合考慮10種化合物的檢測(cè)靈敏度和不同檢測(cè)波長(zhǎng)下基線噪聲因素,選擇 210nm作為本方法的檢測(cè)波長(zhǎng)。

        2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

        用純水稀釋混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制成0.02、0.05、0.10、0.25、0.50,1.00,5.00,10.0,20.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,按實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明:僅一氯乙酸0.5~20.0mg/L范圍,二甲基乙內(nèi)酰脲和其余9種鹵乙酸的質(zhì)量濃度均在0.02~20.0mg/L范圍內(nèi)與其峰面積呈線性關(guān)系,見表1。

        2.4 精密度與回收實(shí)驗(yàn)

        分別向自來(lái)水樣中添加低、中、高三個(gè)濃度的二甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,按上述實(shí)驗(yàn)條件分別進(jìn)行6次測(cè)定,見表2。

        表1 線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限

        表2 精密度和回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)

        3.結(jié)論

        本實(shí)驗(yàn)建立了采用高效液相色譜同時(shí)測(cè)定游泳池水中二甲基乙內(nèi)酰脲和9種鹵乙酸的檢測(cè)方法.方法的建立對(duì)了解游泳池水中的有毒有害物質(zhì),進(jìn)行有毒有害物質(zhì)的篩查,保障游泳者、游樂者、藝術(shù)表演者的身體健康提供了可靠的科學(xué)依據(jù)。

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