(貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025)

豬偽狂犬病(Pseudorabies，PR)是由偽狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)引起豬的急性傳染病，病豬體溫升高，新生仔豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，可感染其他家畜和野生動物[1]。1902年匈牙利學(xué)者Aujeszky等首次發(fā)現(xiàn)該病[2]。1931年由美國科學(xué)家Shope從牛體內(nèi)分離到PRV，1934年Sabin等證實(shí)該病毒屬于皰疹病毒，隨后該病在很多養(yǎng)豬國家均有發(fā)生[3]。1947年，我國首次在貓?bào)w內(nèi)分離到PRV，隨后全國各地相繼出現(xiàn)大量病例，雖然進(jìn)行了疫苗接種，但仍呈現(xiàn)流行趨勢[4]。自2011年以來，PRV變種導(dǎo)致我國養(yǎng)豬場Bartha-K61疫苗接種豬群中PRV感染頻繁暴發(fā)，各年齡段豬死亡率高[5]。該病現(xiàn)已成為危害世界養(yǎng)殖業(yè)的災(zāi)難性疫病，被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為法定報(bào)告的動物疫病，我國將其列為二類動物傳染疫病[6，7]。目前，關(guān)于PRV變異毒株的報(bào)道越來越多，對其研究也日趨成為熱點(diǎn)[8]。

1 病原特征

PRV屬于皰疹病毒科，α-皰疹病毒亞科，為雙鏈DNA，全長約150 kb，基因組GC含量最高達(dá)73%，包括70多個(gè)開放性閱讀框，可以編碼70～100種病毒蛋白[9]。PRV是1種抵抗力較強(qiáng)的皰疹病毒[10]，有多種蛋白質(zhì)，在這些蛋白質(zhì)中，包膜成分蛋白質(zhì)gB、gC誘導(dǎo)細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答[11，12]，而gE作為豬的主要毒力決定因子。這3種基因通常用于監(jiān)測PRV的凈化[13]。

2 流行病學(xué)

PRV在全世界廣泛分布，自然條件下豬、牛、羊、犬、貓，兔、鼠等實(shí)驗(yàn)動物最易感，禽類也能感染，貂、貉、狐、熊等多種野生肉食動物也易感。馬屬動物對該病毒有較強(qiáng)抵抗力。偶爾感染人，局部發(fā)癢，但不引起死亡。目前在已知的自然宿主中，豬最具耐受性，豬和鼠類是自然界中病毒的主要貯存宿主和排毒者，是引起其他動物發(fā)病的疫源動物，在PRV的傳播上起著極為重要的作用。病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類是重要傳染源。PRV主要從病豬的分泌物、唾液、乳汁和尿中排出，豬感染后24周內(nèi)經(jīng)口鼻排毒，康復(fù)6個(gè)月后的豬三叉神經(jīng)節(jié)和扁桃體內(nèi)仍可分離到病毒，有的帶毒豬可持續(xù)排毒1年。其他動物的感染與接觸帶毒豬和鼠類有關(guān)。豬通過直接接觸或間接接觸病豬、帶毒豬傳染，可以通過飼喂被污染的飼料經(jīng)消化道感染，也可通過帶有PRV的空氣飛沫使9 km遠(yuǎn)的豬群經(jīng)呼吸道黏膜感染，還可通過配種經(jīng)生殖系統(tǒng)感染。妊娠母豬感染后可經(jīng)胎盤垂直傳染給胎兒，而母源抗體卻不能起到保護(hù)作用，所以對胎兒的感染是致命的。泌乳母豬感染后1周左右乳中即有病毒出現(xiàn)，可持續(xù)3～5天，此時(shí)仔豬可因哺乳而感染。貓、犬等其他動物主要由于吃食含病毒的尸體、內(nèi)臟及飼料經(jīng)消化道感染。該病通常呈地方性流行，冬、春等低溫季節(jié)易發(fā)，但在常年產(chǎn)仔的情況下季節(jié)性不明顯，分娩高峰期的母豬群通常先發(fā)病。有易感動物種類增多、傳播方式多樣、混合感染為主、病癥加重、隱性感染、免疫與野毒感染現(xiàn)象普遍等特點(diǎn)[14，15]。

3 臨床癥狀

不同年齡段的豬發(fā)病程度不同，臨床表現(xiàn)存在差異。哺乳仔豬最易感，日齡越小病情越嚴(yán)重。7日齡以內(nèi)的仔豬常為最急性型，病程不超過72小時(shí)，病死率可達(dá)100%。主要臨床癥狀為體溫升高、腹瀉、嘔吐，以及四肢劃水樣動作、間歇性抽搐等神經(jīng)癥狀。2周齡以內(nèi)仔豬多表現(xiàn)為高熱不退、不愿采食、呼吸困難，繼而出現(xiàn)震顫、共濟(jì)失調(diào)、昏迷等神經(jīng)癥狀，最終死亡。斷奶仔豬和育肥豬病死率相對較低，主要表現(xiàn)輕微臨床癥狀，耐過后呈隱性感染。成年豬不表現(xiàn)臨床癥狀。妊娠母豬在感染后會發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或木乃伊胎。公豬感染后睪丸腫大、萎縮，喪失種用能力[16，17]。

4 檢測方法

4.1 抗原檢測方法首先利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測各階段豬血清中是否存在PR野毒抗體[18]。再使用PCR技術(shù)檢測抗原，該技術(shù)具有快速、敏感性高等特點(diǎn)，能同時(shí)檢測大批量的樣品，并且能進(jìn)行活體檢測，適合于臨床診斷[19]，OIE將其作為診斷PRV的首選方法。

4.2 抗體檢測方法目前最常用的是采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，是1種免疫酶測定試驗(yàn)，具有較好的特異性和重復(fù)性，為檢測PRV提供了1種簡便的血清學(xué)診斷方法，但是抗體水平會與豬的日齡和機(jī)體抵抗力有關(guān)，因此對仔豬進(jìn)行g(shù)E抗體檢測時(shí)應(yīng)考慮抗體水平程度[20]。

5 疫苗

5.1 傳統(tǒng)疫苗最開始應(yīng)用的是滅活疫苗，是把病毒用合適的滅活劑滅活后，加入適當(dāng)?shù)淖魟┤榛苽涠蒣21]。2001年陳煥春等應(yīng)用PRV分離株Ea株研制成功我國第1個(gè)全病毒油乳劑滅活疫苗[22]。

5.2 弱毒活疫苗弱毒活疫苗可以分為第1代和第2代弱毒活疫苗，但受到條件的限制(疫苗的儲存和運(yùn)輸?shù)?，必須在低溫條件下保存，現(xiàn)實(shí)很難保證，這就大大影響了疫苗的免疫效果[23]。

5.3 基因工程疫苗隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，PRV基因工程疫苗的研究也獲得了很大的進(jìn)展，包括：基因工程缺失弱毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組病毒疫苗。DNA疫苗最大的優(yōu)點(diǎn)是能克服PRV的潛伏感染，而且能激發(fā)細(xì)胞免疫，同時(shí)具有操作簡單、成本低廉和安全等特點(diǎn)，頗具開發(fā)潛力。

自2011年以來，我國北方地區(qū)免疫豬群中發(fā)生嚴(yán)重的豬偽狂犬病[24，25]，這意味著現(xiàn)有疫苗不能對當(dāng)前流行株提供完全的有效的保護(hù)，中國各地的生豬養(yǎng)殖業(yè)依然面臨著巨大風(fēng)險(xiǎn)[26]。所以僅僅依靠現(xiàn)有疫苗還不能實(shí)現(xiàn)該病的凈化。

6 國內(nèi)外凈化現(xiàn)狀

6.1 國外凈化現(xiàn)狀糖蛋白E可以從病毒中消除而不損害病毒復(fù)制或免疫原性。使用疫苗接種策略根除AD-DIVA測試已成功地在包括德國和美國在內(nèi)的幾個(gè)國家進(jìn)行[27]。英國、法國、德國等歐洲國家已經(jīng)采取相應(yīng)的控制措施，包括疫苗免疫、撲殺和根除政策，成功凈化了PR，比如美國于2002年宣布凈化PR成功。其采取的主要措施有：加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、免疫檢測、淘汰病豬、及時(shí)更新豬群、嚴(yán)格控制豬群流動等。其凈化經(jīng)驗(yàn)主要包括：制定并嚴(yán)格執(zhí)行控制凈化措施、強(qiáng)制性的豬群凈化、嚴(yán)密監(jiān)控與監(jiān)督等[28，29]。

6.2 我國常用的防控凈化措施目前我國針對PR采用的凈化措施主要有以下4種。

6.2.1淘汰擴(kuò)群法：根據(jù)當(dāng)?shù)刎i價(jià)與氣候，選擇最適宜的季節(jié)淘汰豬場內(nèi)所有的PRV陽性豬，然后對豬場、設(shè)備以及周圍環(huán)境進(jìn)行徹底消毒2次，中間留有適當(dāng)時(shí)間間隔。最后引進(jìn)PRV陰性種豬。這種方法簡單、成功率高，但是費(fèi)用較高，適合陽性率高的豬場。

6.2.2后代隔離法：仔豬及早斷奶，并轉(zhuǎn)移到無PRV的區(qū)域。這種方法可以阻斷環(huán)境對仔豬的影響，但要求母豬必須不感染PRV或者不排毒，對管理要求高，難操作。

6.2.3檢測淘汰法：對豬場進(jìn)行PRV抗體檢測，淘汰野毒抗體陽性的豬，引種時(shí)只引進(jìn)PRV陰性豬進(jìn)行擴(kuò)群。這種方法實(shí)施方便，但是檢測費(fèi)用高，需要反復(fù)檢驗(yàn)，不適合陽性率較高的豬場。

6.2.4管理免疫法：即綜合凈化的方法，大多數(shù)豬場均適合。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，引進(jìn)豬時(shí)確保全部為PRV陰性，同時(shí)對全場豬群進(jìn)行PRV基因缺失滅活疫苗免疫接種。這種方法操作簡單，費(fèi)用低[30]。

7 小結(jié)與展望

目前我國豬場PR疫情有進(jìn)一步擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)，主要原因是當(dāng)前使用的凈化技術(shù)方案存在諸多盲點(diǎn)和漏洞，凈化難度大。PR已被列為“中國中長期動物疫病防控規(guī)劃(2012—2020年)重點(diǎn)豬病之一。該方案自2012年開始實(shí)施，列出了27種動物疫病，其中的任務(wù)之一是到2020年徹底消除國內(nèi)生豬養(yǎng)殖場的豬偽狂犬病[31]。PR已經(jīng)成為我國養(yǎng)豬區(qū)域中最常見的疾病之一，嚴(yán)重影響豬群的健康生長，作為一種被強(qiáng)制凈化的傳染病勢在必行。另外從種豬銷售方面來講，凈化PR也迫在眉睫，引種時(shí)都要求供種單位提供PR陰性的檢測報(bào)告?？傊_展對PR凈化的研究具有現(xiàn)實(shí)意義，應(yīng)深入探索該病的流行特點(diǎn)、流行趨勢，研究病毒毒株類型、野毒株變異情況、疫苗毒株搭配，建立1套包括豬場硬件建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)、生物安全管理措施等在內(nèi)的成熟的PR凈化技術(shù)體系，為該病在國內(nèi)種豬場的徹底凈化奠定基礎(chǔ)。