周俊

【摘要】目的：莪術(shù)揮發(fā)油對人宮頸癌裸鼠移植瘤的治療作用。方法：建立人宮頸癌Hela細(xì)胞荷瘤裸鼠模型，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測HIF-1α、IFN-γ的蛋白表達(dá)。結(jié)果：莪術(shù)油高、中、低劑量組HIF-1α的表達(dá)較模型組降低顯著，莪術(shù)油高、中劑量組IFN-γ的表達(dá)較模型組升高。結(jié)論： 莪術(shù)油可降低HIF-1α，上調(diào)IFN-γ的表達(dá)，產(chǎn)生抗宮頸癌血管生成的作用。

【關(guān)鍵詞】莪術(shù)油 ;血管生成HIF-1α IFN-γ

【中圖分類號】R197.3【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A【文章編號】1005-0019（2019）04-015-01

宮頸癌中的新生血管的形成對腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移具有重要意義。腫瘤新生血管的形成是一個連續(xù)的過程，腫瘤細(xì)胞必須具有血管生成表型后才能啟動血管生成，因此誘導(dǎo)血管生成因子過多的產(chǎn)生是血管生成的首要環(huán)節(jié)[1]。莪術(shù)油在抗腫瘤、抗血栓方面成效顯著 [2]。 本研究利用天然藥物化學(xué)的提取技術(shù)獲得莪術(shù)揮發(fā)油，通過人宮頸癌裸鼠移植瘤模型治療實驗，初步探討莪術(shù)油有效提取物的動物體內(nèi)抗宮頸癌的治療作用。

1材料與方法

1.1實驗材料 人宮頸癌Hela細(xì)胞株，購自武漢大學(xué)保藏中心。Balb/c-nu品系裸鼠，購自湖南斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司， 溫莪術(shù)藥材購于四川雙流縣溫郁金基地，經(jīng)鑒定為姜科植物溫郁金（Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling）的干燥根莖。采取壓榨粗油經(jīng)水蒸汽精制法制備莪術(shù)揮發(fā)油。HIF-1α兔抗人多克隆抗體，購于北京中杉金橋，IFN-γ兔抗人單克隆抗體，購于博士德生物公司。

1.2實驗方法

將Hela單細(xì)胞懸液接種于裸鼠皮下。對裸鼠隨機(jī)分為莪術(shù)油高、中、低、模型組、陽性對照組在和陰性對照組 6個實驗組。 取腫瘤組織標(biāo)本，采用PV二步法免疫組化技術(shù)檢測HIF-1α、IFN-γ的陽性表達(dá)均定位于宮頸癌細(xì)胞的胞漿，并呈棕黃色顆粒，根據(jù)平均透光度進(jìn)行測評。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計

采用SPSS17.0軟件系統(tǒng)對相關(guān)數(shù)據(jù)資料進(jìn)行分析，計量資料用x±s表示，各組間兩兩比較采用獨立樣本T檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，P<0.05時認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1HIF-1α的表達(dá)結(jié)果

莪術(shù)油高、中、低劑量組HIF-1α平均透光度的結(jié)果與模型組比較顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。（見表1）。

2.2IFN-γ的表達(dá)結(jié)果

莪術(shù)油高劑量組IFN-γ平均透光度的結(jié)果與模型組比較顯著增加;莪術(shù)油中劑量組IFN-γ平均透光度的結(jié)果與模型組比較明顯增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;莪術(shù)油低劑量組IFN-γ平均透光度的結(jié)果與模型組比較略有增加，差異無有統(tǒng)計學(xué)意義。（見表2）。

3討論

缺氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）廣泛存在于各種腫瘤組織中，對維持腫瘤細(xì)胞的能量代謝、腫瘤血管生成、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移起著重要作用。在低氧條件下藥物干預(yù)后，HeLa 細(xì)胞VEGF 的mRNA 和HIF-1α 的mRNA蛋白的表達(dá)較常氧狀態(tài)下明顯增加，這與下調(diào)宮頸癌HeLa 細(xì)胞HIF-1α 的合成與表達(dá)有關(guān)[3-4]。干擾素-γ（IFN-γ）的表達(dá)可使腫瘤血管生成活性受到抑制。采用的不同藥物濃度的IFN-γ均能抑制宮頸癌細(xì)胞Hela 的生長 [5]。本實驗研究中莪術(shù)油高、中、低劑量組HIF-1α平均透光度的結(jié)果與模型組比較顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;莪術(shù)油高、中劑量組IFN-γ的表達(dá)較模型組顯著增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。提示莪術(shù)油能抑制宮頸癌hela的增殖，其機(jī)制可能是降低上游HIF-1α和上調(diào)IFN-γ的表達(dá)，從而影響下游VEGF的表達(dá)，從而產(chǎn)生抗宮頸癌血管生成的作用，發(fā)揮其治療作用。調(diào)控血管生成的因子眾多，就VEGF通路上的其他因子的調(diào)控還有待研究。

參考文獻(xiàn)

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[2]王奇巍，楊國紅，林夢感等. 植物來源抑制血管生成的活性成分研究進(jìn)展[J].中草藥，2010，4（5）：3-8.

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