周莉 秦娟 陸安偉
(貴陽(yáng)市婦幼保健院,貴州 貴陽(yáng) 550001)
宮頸癌發(fā)病率很高,給病人生命帶去嚴(yán)重威脅,其成為目前少數(shù)可經(jīng)早期篩查的一種惡性腫瘤。宮頸癌在臨床上是一種常見的婦科惡性腫瘤,為患者的生命安全造成直接威脅。相關(guān)研究顯示:晚期宮頸癌患者的發(fā)生率有一定下降趨勢(shì),晚期宮頸癌患者與癌前病變的發(fā)生率呈上升的發(fā)展趨勢(shì)。宮頸患者容易出現(xiàn)合并HPV感染的情況,宮頸炎合并人乳頭瘤病毒(HPV)感染是引發(fā)宮頸癌變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,而及時(shí)有效的診治方案以消除HPV感染是保證患者健康的關(guān)鍵。本次研究中,隨機(jī)納入本院20例宮頸癌和30例慢性宮頸炎患者作為觀察對(duì)象,患者入院接受診治的時(shí)間段為2015年1月至2018年1月,通過對(duì)比分析來探究宮頸組織中P-Akt的表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性。報(bào)告如下。
1.1一般資料 本次實(shí)驗(yàn)研究中,隨機(jī)納入本院20例宮頸癌和30例慢性宮頸炎患者作為觀察對(duì)象,患者入院接受診治的時(shí)間段為2015年1月至2018年1月,根據(jù)患者的病理類型進(jìn)行分組,宮頸癌患者為觀察組(n=20),慢性宮頸炎患者為對(duì)照組(n=30)。觀察組中,年齡最小的24歲,年齡最大的68歲,平均(45.2±5.56)歲;最短病程3個(gè)月,最長(zhǎng)病程2年,平均病程(1.06±0.26)年。對(duì)照組中,年齡最小的23歲,年齡最大的66歲,平均(45.1±6.21)歲;最短病程5個(gè)月,最長(zhǎng)病程2年,平均病程(1.26±0.35)年。兩組患者平均病程等基本資料的對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),實(shí)驗(yàn)可行。
1.2方法 取兩組患者的宮頸組織,采用免疫組化SP法來進(jìn)行檢測(cè)并采用PCR技術(shù)檢測(cè)HPV感染情況。免疫組化SP:烤片,68 ℃,20分鐘,常規(guī)二甲苯脫蠟,梯度酒精脫水;二甲苯Ⅰ 20 min二甲苯Ⅱ 20 min~100%酒精Ⅰ 10 min~100% Ⅱ 10 min-95% 5 min-~80% 5 min~70% 5 min;滅活內(nèi)源性過氧化物酶:3%H2O237 ℃孵育10 min,PBS沖洗3X 5 min;使用DAB/ H2O2反應(yīng)染色,觀察P-Akt的表達(dá)情況。PCR檢測(cè):所有標(biāo)本接受病毒核酸檢測(cè),遵循試劑盒說明執(zhí)行RNA提取與反莊體系,運(yùn)用SDS軟件操作實(shí)時(shí)熒光PCR系統(tǒng),設(shè)立陽(yáng)性與陰性對(duì)照,反應(yīng)程序分為以下:(1)5個(gè)循環(huán):50 ℃定為30 min、95 ℃定為3 min、95 ℃定為15 s、50 ℃定為30 min、72 ℃定為1 min;(2)40個(gè)循環(huán):95 ℃定為10 s、55 ℃定為40 s。設(shè)定熒光素為FAM,當(dāng)55 ℃時(shí),收集熒光信號(hào),觀察P-Akt的表達(dá)情況。觀察指標(biāo):(1)觀察宮頸癌和宮頸炎患者的P-Akt的表達(dá)情況,(2)觀察對(duì)比P-Akt在HPV陽(yáng)性與陰性中的表達(dá)情況。
2.1宮頸癌與慢性宮頸炎患者的P-Akt的表達(dá)率比較 觀察組中,P-Akt的表達(dá)率為90.0%(18/20),對(duì)照組患者的P-Akt的表達(dá)率為20.0%(6/30)觀察組患者的P-Akt表達(dá)率明顯高于對(duì)照組,組間比較的結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.3654;P<0.05)。
2.2HPV陽(yáng)性與HPV陰性患者的P-Akt的表達(dá)率比較 經(jīng)檢測(cè),HPV陽(yáng)性患者30例,P-Akt的表達(dá)率為80.0%(24/30),HPV陰性患者20例,P-Akt的表達(dá)率為15.0%(3/20),HPV陽(yáng)性患者的P-Akt表達(dá)率要顯著高于陰性患者,二者之間進(jìn)行比較的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.2658;P<0.05)。
表1 兩組的P-Akt表達(dá)
注:與對(duì)照組比較*P<0.05
近年來,宮頸病變組織的檢驗(yàn)受到越來越多的關(guān)注,由于自身生理因素的影響,女性其宮頸黏膜多呈皺襞狀,如果有病原體侵入皺壁裝粘膜,將會(huì)增加疾病根治的難度,導(dǎo)致病情遷延難愈,從而誘發(fā)慢性的宮頸炎癥疾病。這種疾病具有諸多致病因素,多由于手術(shù)操作、分娩等因素對(duì)女性宮頸造成損傷,而傷口極易被葡萄球菌、鏈球菌等諸多細(xì)菌侵襲,從而誘發(fā)感染。近年來眾多醫(yī)學(xué)研究表明,宮頸疾病與HPV存在密切的關(guān)系。HPV感染屬于臨床上比較常見的傳染性疾病,而HPV病毒具有很高的特異性,導(dǎo)致這類病毒對(duì)于人體上皮黏膜感染的病程較長(zhǎng),且在人體中具有較長(zhǎng)時(shí)間的潛伏期,如果女性免疫力下降,將會(huì)引發(fā)諸多類型婦科疾病。本次研究中,隨機(jī)納入本院20例宮頸癌和30例慢性宮頸炎患者作為觀察對(duì)象,通過對(duì)比分析來探究宮頸組織中P-Akt的表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性,結(jié)合實(shí)驗(yàn)觀察的結(jié)果,宮頸癌患者的P-Akt表達(dá)率明顯高于宮頸炎患者,組間比較的結(jié)果,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);同時(shí),HPV陽(yáng)性患者的P-Akt表達(dá)率要顯著高于陰性患者,二者之間進(jìn)行比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
綜上所述,P-Akt的表達(dá)與HPV感染有著密切關(guān)系,HPV感染者的P-Akt表達(dá)率更高,并且宮頸癌患者的P-Akt表達(dá)率顯著高于宮頸炎患者,P-Akt表達(dá)在宮頸癌發(fā)展中起著重要作用。