羅軼

江西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，江西 南昌 330012

1 介紹

宮頸癌是全球第二大女性癌癥，90%的宮頸癌病例是由高危人類乳頭瘤病毒（high-risk human papillomavirus，hrHPV）感染引起的[1]。白細(xì)胞介素12（Interleukin12，IL-12）是關(guān)鍵炎性細(xì)胞因子，參與連接先天性免疫。IL-12和IL-12受體（IL-12 receptor，IL12R）基因都是關(guān)鍵的免疫應(yīng)答基因。這項(xiàng)研究的目的是調(diào)查農(nóng)村婦女IL-12，IL12R多態(tài)性和血清IL-12水平與hrHPV易感性的關(guān)系。

2 材料與方法

2.1 研究人群 納入260 hrHPV感染病例和260例健康對(duì)照。納入標(biāo)準(zhǔn)為：年齡在25至65歲之間；有3年以上的性病史；月經(jīng)后72小時(shí)；性活動(dòng)或陰道用藥后72小時(shí)。對(duì)照組與病例組的比例為1：1，病例組和對(duì)照組在年齡、國籍、初次生育年齡、懷孕次數(shù)和生育次數(shù)之間沒有顯著差異。

2.2 HPV感染測(cè)試 將細(xì)胞刷在子宮頸內(nèi)輕輕旋轉(zhuǎn)以采集標(biāo)本，然后將刷子的頭部放在小瓶中，保存在4℃的冰箱中直至檢測(cè)。根據(jù)15種高風(fēng)險(xiǎn)HPV類型DNA進(jìn)行了半定量檢測(cè)HPV基因陣列檢測(cè)（中國江蘇中生方正生物技術(shù)有限公司）。

2.3 基因分型 收集5毫升靜脈血，并保存在-80攝氏度下。使用Blood Genomic DNA Extraction Kit（日本Takara）從白細(xì)胞中提取基因組DNA，并通過聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）進(jìn)行擴(kuò)增。

2.4 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 通過酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（Sunredbio，上海，中國）測(cè)量IL12B的血清水平，并表示為每升血清納克。

2.5 統(tǒng)計(jì)分析 使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。兩組的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征差異通過學(xué)生檢驗(yàn)和卡方檢驗(yàn)進(jìn)行比較。P＜0.05被認(rèn)為是顯著差異。

3 結(jié)果

3.1 基因分型結(jié)果 對(duì)照組的基因型分布均一致（χ2=0.126，P=0.939；χ2=0.255，P=0.880；χ2=0.553，P=0.758）。但是，IL12B rs3212227、IL12RB1 rs436857和IL12RB1rs393548的基因型和等位基因頻率與hrHPV易感性無關(guān)（P＞0.05）。

3.2 血清IL-12B水平 與對(duì)照組相比（29.864±7.926ng/L，P＜.01），病例組血清IL-12B水平顯著降低（12.237±3.738ng/L）。病例組血清IL-12B的IL12B rs3212227TT/TG/GG基因型表達(dá)分別為11.869±3.567、12.606±3.677和11.980±3.777。在病例組中，IL-12B基因多態(tài)性與血清IL-12B水平?jīng)]有顯著差異。

4 討論

大約80%-90%的HPV感染者會(huì)在12至24個(gè)月內(nèi)自發(fā)清除病毒，而沒有出現(xiàn)任何癥狀，而有些人則經(jīng)歷了持續(xù)性HPV感染[2]。然而，與HPV感染的發(fā)生和清除相關(guān)的確切機(jī)制仍不確定。作為Th1促炎細(xì)胞因子，IL-12調(diào)節(jié)幼稚CD4+T細(xì)胞中1型輔助T細(xì)胞的成熟，通過誘導(dǎo)IFNg的生物合成對(duì)T和NK細(xì)胞發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，IL-12在橋接先天免疫和適應(yīng)性免疫中發(fā)揮重要作用。我們的研究發(fā)現(xiàn)，在hrHPV感染的情況下，IL-12的表達(dá)顯著降低，表明血清IL-12較低水平與hrHPV感染有關(guān)。病例組與對(duì)照組IL12 rs3212227、IL12RB1 rs436857和IL12RB1 rs393548的基因型和等位基因頻率沒有顯著差異。此外，盡管病例組中的血清IL-12水平低于對(duì)照組，但我們沒有發(fā)現(xiàn)病例組中血清IL-12水平和IL-12rs3212227多態(tài)性之間有任何差異，表明不同的基因型可能不會(huì)影響IL-12的產(chǎn)生。因此，我們發(fā)現(xiàn)農(nóng)村婦女的IL12 rs3212227、IL12RB1 rs436857和IL12RB1 rs393548多態(tài)性與hrHPV易感性無關(guān)。