董月美 張目涵 張 方 王斌斌 馮百歲

鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科暨炎癥性腸病中心(450014)

背景：外周血白細(xì)胞或白細(xì)胞分類作為臨床檢查的常規(guī)項(xiàng)目，被認(rèn)為是炎癥性疾病的簡捷生物學(xué)標(biāo)志物，中性粒細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞與多種疾病的活動(dòng)度和嚴(yán)重程度密切相關(guān)。目的：探討外周血中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(NLR)、單核細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(MLR)在潰瘍性結(jié)腸炎(UC)中的臨床意義。方法：收集2017年10月—2019年7月鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院收治的62例UC患者，以42名健康體檢者作為對(duì)照組。比較兩組中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR，并分析其與C反應(yīng)蛋白(CRP)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、Mayo評(píng)分、UCEIS評(píng)分之間的相關(guān)性。ROC曲線分析各指標(biāo)診斷UC的效能。結(jié)果：UC患者中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR以及MLR顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。與輕度患者相比，中重度UC組中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR以及MLR顯著升高(P<0.05)，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低(P<0.05)。中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR以及MLR與CRP、ESR、Mayo評(píng)分、UCEIS評(píng)分均存在正相關(guān)性，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與上述指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)性(P<0.05)。Cut-off值為0.470時(shí)，NLR診斷UC的敏感性為0.613，特異性為0.857，AUC為0.731(95% CI: 0.636～0.827)；cut-off值為0.439時(shí)，MLR診斷UC的敏感性為0.629，特異性為0.810，AUC為0.726(95% CI: 0.630～0.822)。結(jié)論：NLR和MLR在UC患者中升高，且可反映疾病活動(dòng)狀況，有望成為診斷和評(píng)估UC的血清學(xué)標(biāo)志物。

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)是一組慢性易復(fù)發(fā)性腸道疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)和克羅恩病(Crohn’s disease, CD)，其發(fā)病率在全球范圍內(nèi)逐年升高。IBD的發(fā)病機(jī)制目前仍不是十分明確，基因遺傳學(xué)、異常免疫反應(yīng)、腸道屏障功能紊亂以及環(huán)境因素等一系列因素可能參與其中[1]。UC主要累及結(jié)腸和直腸，并以腹痛、腹瀉、黏液膿血便為主要臨床癥狀，其疾病嚴(yán)重程度的判斷對(duì)臨床治療和預(yù)后評(píng)估具有重要意義。但UC的診斷缺乏“金標(biāo)準(zhǔn)”，主要根據(jù)結(jié)腸鏡檢查、臨床癥狀、組織病理學(xué)診斷等進(jìn)行綜合分析，同時(shí)需排除感染或非感染性腸炎。血清學(xué)指標(biāo)C反應(yīng)蛋白(C-reaction protein, CRP)和紅細(xì)胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate, ESR)對(duì)于臨床監(jiān)測(cè)和診斷IBD具有重要的輔助作用，但其敏感性或特異性較差[2-3]。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)IBD的發(fā)生、發(fā)展過程與黏膜免疫反應(yīng)成分如中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞及其分泌的多種介質(zhì)因子等關(guān)系密切，而中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio, NLR)與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等的疾病狀態(tài)和活動(dòng)度關(guān)系密切[4-5]。本研究通過回顧性分析外周血中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)以及NLR、單核細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(monocyte/lymphocyte ratio, MLR)在UC中的診斷價(jià)值，旨在探討輔助診斷和評(píng)估UC活動(dòng)性的簡便可靠的血清學(xué)相關(guān)標(biāo)志物。

對(duì)象與方法

一、一般資料

選取2017年10月—2019年7月鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院門診和住院UC患者共62例，診斷和治療標(biāo)準(zhǔn)均按照中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)炎癥性腸病學(xué)組制定的共識(shí)意見[6]。其中男性42例，女性20例；年齡22～58歲；輕度18例，中重度44例。排除標(biāo)準(zhǔn)：血液系統(tǒng)疾患、應(yīng)用過糖皮質(zhì)激素、惡性腫瘤以及急性感染狀態(tài)。另外選取同時(shí)間段健康體檢者42名作為對(duì)照組，男性22名，女性20名，年齡20～56歲。兩組患者的性別、年齡、病程相比無明顯差異(表1)。

表1 各組患者性別、年齡、病程比較

二、研究方法

所有患者入院當(dāng)日或次日清晨抽取空腹肘靜脈血4 mL，采用自動(dòng)血分析儀檢測(cè)外周中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，并計(jì)算NLR、MLR；采用ELISA法檢測(cè)CRP水平，魏氏法檢測(cè)血清ESR水平。

三、疾病活動(dòng)度和內(nèi)鏡下評(píng)分

UC疾病活動(dòng)度評(píng)分根據(jù)Mayo評(píng)分系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)估[7]，包含排便次數(shù)(正常為0分，較平常增加1～2次為1分，增加3～4次為2分，增加5次或以上為3分)；便血次數(shù)(0次為0分，不到一半時(shí)間便中帶血為1分，大部分時(shí)間便血為2分，便血一直存在為3分)；內(nèi)鏡發(fā)現(xiàn)(正常無活動(dòng)為0分，紅斑、血管紋理減少、輕度易脆為1分，明顯紅斑、血管紋理缺乏、易脆、糜爛為2分，自發(fā)性出血、潰瘍形成為3分)；醫(yī)師評(píng)價(jià)(正常為0分，輕度為1分，中度為2分，重度為3分)。內(nèi)鏡下活動(dòng)度UCEIS評(píng)分從血管紋理(1～3分)、出血情況(1～4分)、糜爛和潰瘍(1～4)3個(gè)方面進(jìn)行評(píng)分[8]。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、UC組與對(duì)照組中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR比較

UC組患者中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR顯著高于對(duì)照組，而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組，組間相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05；表2)。

表2 UC組與對(duì)照組中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR比較

二、不同病情程度UC患者比較結(jié)果

中重度UC患者中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR顯著高于輕度UC患者，而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低，組間相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05；表3)。

表3 不同病情程度UC患者中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR比較

三、相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR以及MLR與CRP、ESR、Mayo評(píng)分、UCEIS評(píng)分存在正相關(guān)性，而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與CRP、ESR、Mayo評(píng)分、UCEIS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05；表4)。

表4 UC組中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR以及MLR與疾病活動(dòng)度指標(biāo)的相關(guān)性

四、ROC曲線分析

ROC曲線分析顯示，cut-off值為0.470時(shí)，NLR診斷UC的敏感性和特異性分別為0.613和0.857，AUC為0.731(95% CI: 0.636～0.827)；cut-off值為0.439時(shí)，MLR診斷UC的敏感性和特異性分別為0.629和0.810，AUC為0.726(95% CI: 0.630～0.822)；NLR和MLR的診斷效能優(yōu)于中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CRP，但略低于ESR(表5、圖1)。

表5 各種指標(biāo)診斷UC的效能

圖1 各種指標(biāo)判斷UC的ROC曲線分析

討 論

UC是一種非特異性慢性炎癥性腸道疾病，伴隨著臨床緩解、復(fù)發(fā)相交替的過程，其治療的關(guān)鍵在于誘導(dǎo)黏膜愈合以及改善臨床癥狀，這一目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)可減少并發(fā)癥、住院率、手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)等[9]。黏膜愈合過程的監(jiān)測(cè)需要反復(fù)接受內(nèi)鏡檢查甚至組織活檢。近年來，雖然UC的診斷和治療取得較大進(jìn)展，但仍缺乏精準(zhǔn)的非侵入性生物學(xué)標(biāo)志物[10]。資料顯示，外周血白細(xì)胞分型與IBD等炎癥性疾病關(guān)系密切，且外周血白細(xì)胞分型檢測(cè)具有簡便、費(fèi)用低、操作簡便等特點(diǎn)[11-13]。應(yīng)用簡便的血常規(guī)指標(biāo)判斷UC及其嚴(yán)重程度具有重要意義。

本回顧性研究結(jié)果顯示，UC患者中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、NLR、MLR顯著高于對(duì)照組，且與疾病活動(dòng)度相關(guān)指標(biāo)CRP、ESR、Mayo評(píng)分以及UCEIS評(píng)分呈正相關(guān)；但淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組，且與上述指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。ROC曲線分析結(jié)果顯示，NLR診斷UC的AUC為0.731，敏感性為 0.613，特異性為0.857，MLR的AUC為0.726，敏感性為0.629，特異性為0.810；這兩個(gè)指標(biāo)診斷UC的效能高于中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)和CRP水平，但稍低于ESR(敏感性為0.738，特異性為0.726)。

在感染或非感染相關(guān)炎性疾病中，單核細(xì)胞通過釋放促炎細(xì)胞因子和趨化因子被募集到炎癥組織中，并進(jìn)一步分化為巨噬細(xì)胞和樹突細(xì)胞，參與固有免疫應(yīng)答。有研究認(rèn)為，單核細(xì)胞的激活以及固有免疫缺陷均參與IBD的發(fā)生、發(fā)展過程，單核細(xì)胞增多與UC的疾病活動(dòng)度關(guān)系密切[14-15]。本研究發(fā)現(xiàn)MLR升高與疾病嚴(yán)重程度和活動(dòng)度有關(guān)。促炎細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子-α、NF-κB可激活骨髓中性粒細(xì)胞增殖并抑制其凋亡過程，UC患者血清和腸道黏膜淋巴細(xì)胞水平均異常，且外周血淋巴細(xì)胞基因明顯受損。炎癥過程可進(jìn)一步誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞增多，淋巴細(xì)胞減少，NLR水平升高，提示NLR可作為炎癥反應(yīng)的生物學(xué)標(biāo)志物。Posul等[16]的研究認(rèn)為NLR可作為評(píng)估UC活動(dòng)度的簡單、有效、易獲得的亞臨床指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，NLR與CRP、ESR、Mayo評(píng)分和UCEIS評(píng)分均有相關(guān)性，且其敏感性和特異性均較好。既往研究發(fā)現(xiàn)疾病活動(dòng)度常用血清學(xué)指標(biāo)CRP和ESR診斷UC的敏感性和特異性為50%～60%[17-18]。與本研究結(jié)果有所偏差，考慮可能與本研究為單中心且樣本量較小有關(guān)。

綜上所述，NLR與MLR具有較好的診斷和評(píng)估UC疾病活動(dòng)度的價(jià)值，有可能成為指導(dǎo)臨床醫(yī)師診斷和治療UC的簡便、價(jià)廉、非侵入性的指標(biāo)，但本研究具有一定的局限性，首先這是一項(xiàng)單中心、回顧性隊(duì)列研究，其次，未探究各指標(biāo)在UC緩解期與活動(dòng)期之間的相互關(guān)系。因此，可進(jìn)一步開展多中心、前瞻性隨機(jī)對(duì)照研究并增大樣本量，以確定診斷和評(píng)估UC疾病活動(dòng)度的最佳NLR和MLR范圍。