劉 虹 ，李素玲 ，許 晶 ，王 華 ，董淑英

（1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031；2.忻州市科技局，山西忻州034000）

白銀盤是山西管涔山地區(qū)的一種中大型白色特產(chǎn)蘑菇，因其只在入伏期，即每年7月下旬到8月上旬出產(chǎn)，因此，也叫伏銀盤。白銀盤蘑菇肉質(zhì)肥厚、味道清香、口感稚嫩，是當(dāng)?shù)刈钍軞g迎、價格最高的野生食用菌品種，古人“蘆芽秋水白銀盤，香蕈天花膩齒寒”中盛贊的白銀盤指的就是這種蘑菇。白銀盤一般在華北云杉Picea wilsonii Mast和華北落葉松（紅杄）Larix principis-rupprechtii Mayr林內(nèi)草地上生長，多形成大小不等的蘑菇圈。在山西野生食用菌類相關(guān)專業(yè)文獻中[1-2]，山西管涔山白銀盤蘑菇所對應(yīng)的學(xué)術(shù)名稱一直是白雷蘑Clitocybe candida Bres.（異 名 ：Leucopaxillus candidus（Bres.）Sing.），可能是一個錯誤的鑒定，因為依據(jù)歐洲專業(yè)文獻記載[3]，Clitocybe candida Bres.這個歐洲原產(chǎn)物種的菌褶顏色是粉色，和菌蓋顏色有明顯的反差，而山西管涔山白銀盤蘑菇菌蓋和菌褶顏色一致，沒有反差。為澄清白銀盤這一山西省重要的野生食用菌資源的正確名稱，本研究采用ITS-DNA分子方法[4-8]，對2017年采自山西管涔山林區(qū)的白銀盤蘑菇進行了鑒定分析。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本采集

擔(dān)子果樣本-1（編號為LH170701）由山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所劉虹、李素玲等于2017年7月30日采自山西省中北部管涔山一帶的華北落葉松和華北云杉混交林中草地上，擔(dān)子果樣本-2（編號為LH170758）從當(dāng)?shù)卮迕袷种匈徺I。新鮮的擔(dān)子果標(biāo)本經(jīng)45℃烘干后保存于首都師范大學(xué)標(biāo)本館（BJTC）和山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所標(biāo)本館（HSA）。

1.2 形態(tài)學(xué)鑒定

擔(dān)子果的顯微結(jié)構(gòu)特征觀察在山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所微生物實驗室進行。在手持放大鏡和體視顯微鏡下，對擔(dān)子果的宏觀特征進行觀察，主要包括擔(dān)子果的形狀、大小、顏色、菌褶及菌柄特征等。在光學(xué)顯微鏡下，對擔(dān)子果的顯微結(jié)構(gòu)特征進行觀察。先采用手術(shù)刀進行徒手切片，以蒸餾水、3%KOH作為浮載劑制作水封片。再用棉蘭和Melzer試劑來檢驗擔(dān)孢子壁有無喜蘭和淀粉質(zhì)反應(yīng)，主要觀察擔(dān)孢子的形狀、大小、顏色等。

1.3 分子鑒定

分子鑒定在北京首都師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實驗室進行。樣本DNA提取、PCR以及測序方法參照文獻[9-11]進行。其他采用的相關(guān)DNA序列包括下載自NCBI中與本研究自測序列相似度高于97%的序列。ITS-DNA序列比對采用BLAST軟件在NCBI上進行。

2 結(jié)果與分析

2.1 ITS-DNA比對結(jié)果

2.1.1 白銀盤樣本-2的ITS-DNA比對結(jié)果 本研究采集的山西管涔山的白銀盤蘑菇提取的ITS-DNA片段在NCBI上用BLAST進行比對，結(jié)果顯示，與本研究所采樣本相似度高于97%的10條序列分別來自北美洲的美國，歐洲的意大利、俄羅斯，以及我國的山西、甘肅和西藏（表1）。涉及到學(xué)名4個，分別為：Aspropaxillus candidus 1條，Aspropaxillus septentrionalis2條，Leucopaxillus giganteus7條，Aspropaxillus sp.1條。

表1 白銀盤樣本LH170758的ITS片段在NCBI上BLAST結(jié)果

2.1.2 2組白銀盤樣本間的ITS-DNA比對 2個樣本的2組ITS-DNA片段比對結(jié)果表明，2組樣本間的ITS相似性為99%，說明2個樣本在生物學(xué)分類中屬于同一個物種。

2.2 形態(tài)學(xué)結(jié)果

擔(dān)子果（圖1，2）中到大型，菌蓋初期扁半球形，后漸平展，有時中部下凹，成熟后直徑6～20 cm，表面光滑，無毛，邊緣整齊或稍波浪狀，無條紋，白色，有時中部顏色呈淺黃白色；菌肉白色，較厚；菌褶白色，不等長，較密，直生或稍延生；菌柄圓柱狀，長5～8 cm，粗 2～4 cm，白色，表面近平滑，中實；擔(dān)孢子橢圓形，（5.5～7.5）×（4～5）μm，無色，表面光滑，弱淀粉質(zhì)。

2.3 分類學(xué)結(jié)果

依據(jù)上述分子和形態(tài)學(xué)分析結(jié)果，山西管涔山白銀盤蘑菇的學(xué)名是Aspropaxillus septentrionalis（Singer&A.H.Sm.） Vizzini，Mycosphere 3 （1）:83（2012）。 同 物 異 名 有 ：Clitocybe septentrionalis（Singer&A.H.Sm.）H.E.Bigelow，Can.J.Bot.37（5）:772（1959）；Leucopaxillus septentrionalis Singer&A.H.Sm.，Mycologia 39（6）:726（1947）。

3 討論

從分子系統(tǒng)學(xué)角度分析，10條比對序列都屬于同一個物種。其中，來自美國的序列KP453713源于Aspropaxillus septentrionalis的模式標(biāo)本（HOLOTYPE），和本研究樣本的ITS相似度為99%，因此，確定采自山西管涔山地區(qū)的白銀盤的科學(xué)名稱是Aspropaxillus septentrionalis（Singer&Smith）Vizzini，這個物種最早以Leucopaxillus septentrionalis Singer&Smith 為名[12]。

其他名稱下，Aspropaxillus candidus的序列KP453699來自法國，然而依據(jù)BIGELOW[3]的研究，Aspropaxillus candidus的菌褶和菌蓋顏色明顯不同，其中菌蓋為白色，而菌褶為淺粉色，反差很大；而山西管涔山白銀盤蘑菇菌蓋和菌褶均為白色，沒有反差。由此可以推斷，NCBI這條來自法國的在Aspropaxillus candidus名下的序列KP453699可能源于錯誤的標(biāo)本鑒定。Aspropaxillus sp.名下序列KY084310也來自山西管涔山白銀盤蘑菇，與本研究樣本相同。其他7條序列為Leucopaxillus giganteus，分別來自歐洲的意大利、俄羅斯，北美洲的美國，以及我國的山西、甘肅和西藏等地。Leucopaxillus giganteus最早以Agaricus giganteus Sowerby于1799年報道于歐洲，其中，giganteus在拉丁語中是“巨大的”的意思，意為這是一種體型很大的蘑菇；根據(jù)SINGER等[12]的研究，歐洲的這個Leucopaxillus giganteus與北美洲的Leucopaxillus septentrionalis很相似，主要區(qū)別是北美洲的這個種類菌柄下部受傷或觸摸時顏色會變深，而歐洲的不會。它們共同的特征是具有大型淺白色的子實體，菌褶直生到稍延生，沒有內(nèi)菌幕，往往能在草地上形成很大的蘑菇圈。形態(tài)學(xué)方面，山西管涔山的樣本同樣具有上述所有特征，但是沒有觀察到菌柄下部受傷或觸摸時顏色變深這個現(xiàn)象，因此，更像歐洲的Leucopaxillus giganteus。Aspropaxillus septentrionalis名下的序列來自模式標(biāo)本，因此，從科學(xué)的角度而言，山西的白銀盤應(yīng)該定為此種無疑。但是，由此而來的一個無法回避的問題是：NCBI中這7條Leucopaxillus giganteus名下的序列都是源于樣本鑒定錯誤，還是Leucopaxillus giganteus和Aspropaxillus septentrionalis本身就是同一個分類學(xué)物種？從分類學(xué)的角度，解決這個問題的唯一方法是需要從Leucopaxillus giganteus模式標(biāo)本中提取DNA來比對，但是這個物種的模式標(biāo)本至少采自1799年或更早，因而從技術(shù)上成功提取其DNA的可能性很小。另一個辦法就是從該物種的歐洲原產(chǎn)地重新采集并指定一個新模式（NEOTYPE），從中提取DNA來與美國的Aspropaxillus septentrionalis比對，來證實二者的關(guān)系，但這項工作超出本研究范疇。

其實，歐洲的Leucopaxillus giganteus是一種特征非常明顯的大型白色蘑菇，形態(tài)鑒定難度不大。Leucopaxillus屬的系統(tǒng)分類研究均采用了上述5條序列中的部分[13-14]，因此，這個物種所依據(jù)標(biāo)本被鑒定錯誤的可能性不大。有理由期望產(chǎn)于北美洲的Aspropaxillus septentrionalis和最早發(fā)現(xiàn)于歐洲的Leucopaxillus giganteus可能是同一個分類學(xué)物種，其柄部形態(tài)特征的差異可能源于不同的生長環(huán)境。因此，山西管涔山白銀盤蘑菇的學(xué)名暫定為Aspropaxillus septentrionalis（Singer&A.H.Sm.）Vizzini是符合命名法規(guī)的科學(xué)選擇。

在NCBI數(shù)據(jù)庫中，與山西管涔山白銀盤蘑菇這個物種匹配的ITS分子數(shù)據(jù)也見于我國的甘肅和西藏地區(qū)的樣本。我國文獻中沒有Aspropaxillus septentrionalis名下的物種記載，但在Leucopaxillus giganteus名下有報道，分布于東北、西北和內(nèi)蒙古地區(qū)，中文名為大白樁菇（雷蘑）[15]，或具體為河北、內(nèi)蒙古、吉林、遼寧、山西、黑龍江、青海、新疆等地，中文名為大白樁菇[16]。劉波[1]也有報道，白銀盤蘑菇對應(yīng)的中文名稱為青腿子、巨陡頭、雷蘑、大青蘑。

志謝：曹晉忠博士對本研究提供有價值的意見，首都師范大學(xué)研究生閆向遠(yuǎn)、黃凱兵、陳萌、李婷、徐語言參加標(biāo)本采集及部分試驗工作，在此一并致謝。