劉建平 栗粟 孫雅軒

[摘要] 目的 統(tǒng)計分析白細胞介素-8（IL-8）基因啟動子-251T>A多態(tài)性與急性胰腺炎（AP）發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。 方法 對PubMed、Embase、Web of Science databases和萬方數(shù)據(jù)庫進行系統(tǒng)檢索，檢索IL-8啟動子-251T>A多態(tài)性和急性胰腺炎發(fā)病風(fēng)險相關(guān)的文獻，文獻查找日期為1990年1月～2015年12月。 結(jié)果 最終有7篇文獻共計2282例病例納入本研究。其中AP組病例1013例，對照組病例1269例。在納入的總體中，IL-8啟動子-251T>A多態(tài)性和AP發(fā)病風(fēng)險相關(guān)（OR = 1.56，95%CI：1.14～2.13，P = 0.02）;在顯性模型中，A基因攜帶者會增加AP發(fā)病風(fēng)險（OR = 1.44，95%CI：1.21～1.73，P = 0.01）;在隱性模型中，純合子AA基因型也會增加AP發(fā)病風(fēng)險（OR = 1.65， 95%CI：1.13～2.41，P = 0.02）。亞組分析提示，IL-8啟動子-251A多態(tài)性MAP隱性基因模型（OR = 2.01，95%CI：1.25～3.24，P = 0.025）和SAP所有基因模型（OR = 1.80，95%CI：1.43～2.26，P = 0.022;顯性模型OR = 2.17，95%CI：1.54～3.06，P = 0.014;隱性模型OR = 2.39，95%CI：1.49～3.81，P = 0.005）會增加與AP發(fā)病風(fēng)險。 結(jié)論 IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性可能會增加AP的發(fā)病風(fēng)險。但是考慮到本研究的局限性，需要有設(shè)計更完善、樣本量更大的研究來證實該結(jié)論。

[關(guān)鍵詞] 白細胞介素-8;急性胰腺炎;多態(tài)性;Meta分析

[中圖分類號] R576? ? ? ? ? [文獻標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）01（a）-0068-06

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是由于胰腺腺泡細胞內(nèi)的胰酶被超前激活引發(fā)的一組急性炎癥性病變[1]。據(jù)初步估計，世界范圍內(nèi)AP的年發(fā)病率在（10～30）/10 000，盡管部分AP屬于輕癥AP（mild acute pancreatitis，MAP），但仍有25%～30%的AP會發(fā)展為重癥胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP），其往往伴發(fā)多器官功能障礙（mutiple organ disfunction，MODS）和高死亡率[2-6]。遺憾的是，目前AP發(fā)病的分子生物學(xué)機制仍不十分清楚。目前的研究已經(jīng)證實炎性反應(yīng)在AP的病理生理過程中發(fā)揮極重要的作用，這個過程包含大量的炎癥細胞特別是中性粒細胞和單核細胞的募集、定植和全身激活過程[7-8]。白細胞介素-8（IL-8）就是一種重要的炎性介質(zhì)，對中性粒細胞和嗜堿性粒細胞具有趨化作用，進而對炎性反應(yīng)和免疫過程有調(diào)節(jié)作用[9]，并且在AP患者中IL-8水平也是顯著升高的[10]。IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性（rs4073）可以通過轉(zhuǎn)錄影響IL-8的表達水平[11]。近年來關(guān)于IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險關(guān)系的病例對照研究逐漸增多，但是這些研究的結(jié)果并不一致[12-18]。因此，本研究擬對IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險關(guān)系進行Meta分析。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

兩名研究人員對PubMed、Embase、Web of Science databases和萬方數(shù)據(jù)庫進行系統(tǒng)檢索。檢索起止時間為1990年1月～2015年12月。所用英文關(guān)鍵詞（“interleukin-8”O(jiān)R“IL-8”O(jiān)R“cytokine”）AND（“polymorphism”O(jiān)R“polymorphisms”O(jiān)R“mutation”O(jiān)R“variant”O(jiān)R“variation”），中文關(guān)鍵詞（“白細胞介素-8”或“白介素-8”或“IL-8”）和（“多態(tài)性”或“突變”）和（“AP”或“胰腺炎”）。另外通過瀏覽相關(guān)參考文獻進行補充檢索。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

文獻納入標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)于IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險關(guān)系;②研究類型是病例對照研究;③病例組和對照組均有詳細的各基因型分布情況或通過文中數(shù)據(jù)可以推算出各基因型分布情況。排除標(biāo)準(zhǔn)：①綜述、評述類文獻;②數(shù)據(jù)不全或通過聯(lián)系作者仍不能得到有效數(shù)據(jù);③重復(fù)文獻或前后文獻研究樣本有重疊的，納入樣本量較大、數(shù)據(jù)較全的文獻。

1.3 數(shù)據(jù)提取

兩名研究人員獨立提取納入文獻的如下信息：第一作者姓名、發(fā)表年份、所在國家、對照組來源、各型胰腺炎的基因型分布情況、對照組的Handy-Weinberg平衡檢驗結(jié)果及資料（Handy-Weinberg equilibrium，HWE;P < 0.05認(rèn)為不滿足HWE平衡）。AP嚴(yán)重程度分級標(biāo)準(zhǔn)參照Ranson標(biāo)準(zhǔn)[12]，<3分為輕癥，≥3分為重癥。

1.4 質(zhì)量評價

對納入文獻采用NOS量表（Newcastle-Ottawa scale）進行質(zhì)量評價，質(zhì)量評價結(jié)果在0～4分為低質(zhì)量研究，5～8分為高質(zhì)量研究。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用Stata 12.0軟件進行統(tǒng)計分析。IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險關(guān)系關(guān)聯(lián)強度的效應(yīng)值由比值比（odds ratio，OR）與相應(yīng)的95%可信區(qū)間（95%CI）表示。合并前，對納入文獻的異質(zhì)性進行檢驗，當(dāng)Cochrane Q統(tǒng)計值P < 0.10和I2 > 50%被認(rèn)為納入文獻間存在明顯異質(zhì)性，此時統(tǒng)計模型采用隨機效應(yīng)模型，否則采用固定效應(yīng)模型。亞組分析是按照AP的類型（MAP和SAP）分別按三種基因模型進行統(tǒng)計分析。此外Begg′s漏斗圖和Egger′s回歸分析被用來檢驗發(fā)表偏倚。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻特征

按照檢索策略，共檢索出314篇文獻，經(jīng)查重除重，瀏覽題目、摘要和全文等環(huán)節(jié)后，最終有7篇文獻納入本Meta分析[12-18]（圖1）。這7篇納入文獻共包含AP病例1013例，對照病例1269例，其中1篇的研究人群是匈牙利人群[12]，剩余6篇均是在中國的研究[13-18]。對照組來源于社區(qū)的5篇[12-16]，來源于醫(yī)院的2篇[17-18]。對照組IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性不滿足Handy-Weinberg平衡的有3篇[14，17-18]。所納入的7篇文獻，經(jīng)NOS量表評分，最低分為5分，所有納入本研究的文獻均是高質(zhì)量文獻。見表1。

2.2 數(shù)據(jù)合成

在等位基因模型中，納入的7篇文獻間存在明顯異質(zhì)性（I2 = 82.6%，P = 0.00），所以采用隨機效應(yīng)模型進行統(tǒng)計風(fēng)險。對7篇文獻按等位基因模型進行隨機效應(yīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險具有相關(guān)性（OR = 1.56，95%CI：1.14～2.13，P = 0.02）。見圖2。

在顯性模型中，納入文獻間無統(tǒng)計學(xué)意義上的異質(zhì)性（I2 = 4.50%，P = 0.392）。按固定效應(yīng)模型進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)顯性模型中（AA+AT vs. TT）中A基因攜帶者會增加AP發(fā)病風(fēng)險（OR = 1.44，95%CI：1.21～1.73，P = 0.01）。見圖3。

在隱性模型中，納入文獻間存在統(tǒng)計學(xué)意義上的異質(zhì)性（I2 = 52.9%，P = 0.047）。按隨機效應(yīng)模型進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)純合子AA基因型也會增加AP發(fā)病風(fēng)險（OR = 1.65，95%CI：1.13～2.41，P = 0.02）。見圖4。

亞組分析中，僅有5篇納入文獻[12-16]按AP嚴(yán)重程度分為MAP和SAP，并對各種亞組胰腺炎基因型分布作了詳盡描述（表1）。本研究分別對MAP和SAP按三種基因模型進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，所有的亞組分析中文獻間均無明顯異質(zhì)性（I2 < 50%），都能按固定效應(yīng)模型進行統(tǒng)計分析。分析結(jié)果：只有MAP的等位基因模型和顯性模型提示IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)性（P > 0.05）。MAP隱性基因模型和SAP所有基因模型均提示IL-8啟動子-251T>A多態(tài)性與AP發(fā)病風(fēng)險具有統(tǒng)計學(xué)意義上的相關(guān)性（均P < 0.05）。

2.3 發(fā)表偏倚

在總體分析過程中僅有顯性模型（AA+AT vs. TT）無明顯發(fā)表偏倚（Egger′s回歸分析P = 0.058），而等位基因模型和隱性模型中都可見明顯發(fā)表偏倚（等位基因模型：P = 0.034;隱性模型P = 0.006）。見圖5。所有亞組分析中都未發(fā)現(xiàn)明顯發(fā)表偏倚。見表2。

3 討論

近年來，關(guān)于炎癥介質(zhì)與AP發(fā)病風(fēng)險的研究表明，AP所觸發(fā)的全身嚴(yán)重炎性反應(yīng)并不是單一媒介所介導(dǎo)的，而是有著錯綜復(fù)雜的病理生理途徑，在這些途徑中，氧化應(yīng)激和細胞因子顯得尤為重要[19]。IL-8屬于COX2C亞家族中的炎癥介質(zhì)，參與炎癥急性期反應(yīng)的調(diào)節(jié)，研究表明IL-8基因啟動子-251A等位基因可以通過轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)上調(diào)IL-8的表達水平。故而對AP的發(fā)病和病情進展有重要作用[20-21]。

2013年Yin等[22]對IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性與AP風(fēng)險的關(guān)系進行了系統(tǒng)評價，在總體分析中等位基因模型和顯性模型提示IL-8啟動子-251T>A會增加AP發(fā)病風(fēng)險，然而在隱性模型中沒有發(fā)現(xiàn)這種相關(guān)性。由于Yin等[22]當(dāng)時只納入了5篇文獻[12-16]，樣本量相對較少，故對該結(jié)論采信應(yīng)該持謹(jǐn)慎態(tài)度。

但本研究在Yin等[22]研究的基礎(chǔ)上又納入2篇新近發(fā)表的文獻[17-18]，相對擴大了統(tǒng)計分析的樣本量。本研究得到了和Yin等[22]相似的結(jié)論，但是在本研究中的總體隱性模型IL-8啟動子-251T>A多態(tài)性仍會增加AP風(fēng)險（OR = 1.44，95%CI：1.21～1.73，P = 0.01），這進一步提示IL-8啟動子-251A等位基因是增加AP發(fā)病風(fēng)險的重要危險因素。

本研究的亞組分析是基于AP病情嚴(yán)重程度分組。但是基因多態(tài)性的分布及表達與人種和地域有著十分緊密的聯(lián)系。一般關(guān)于基因多態(tài)性的Meta分析都會按人種進行區(qū)組分析。本研究之所以沒有按人種或地域區(qū)組進行分析是因為納入7篇文獻中6篇都是在中國人群中開展的，僅1篇[12]在匈牙利人群開展，并且該研究中的對照組人群的IL-8基因型的分布與西歐人群的基因型分布相差甚大，反而和日本人群中的基因型分布相似[23]。所以在本研究中采用人種或地域進行亞組分析意義不大。

本研究發(fā)現(xiàn)，在總體分析過程中無論等位基因是顯性模型還是隱性模型，納入文獻間的異質(zhì)性都非常顯著。但是在進行亞組分析過程中，無論何種基因模型，納入文獻間都不存在明顯的異質(zhì)性。這是因為在進行亞組分析中排除了2篇文獻[17-18]，而這2篇文獻中的對照組的IL-8基因型的分布均不滿足Handy-Weinberg平衡。并且，該兩篇文獻的病例來源都是醫(yī)院，而其他文獻中對照組來源都是社區(qū)。所以在本研究中原始文獻的選擇偏倚等因素可能是造成了納入文獻間的異質(zhì)性的重要因素。

同Hofner等[12]發(fā)現(xiàn)相似，在亞組分析中本研究發(fā)現(xiàn)攜帶A等位基因型的個體發(fā)生SAP的風(fēng)險更高，可是在SAP組中AA基因型的個體數(shù)量僅有34例（17.0%），由此可推測，IL-8啟動子-251T>A也具有較高的IL-8表達能力。

在參考本研究的結(jié)果時需注意幾個局限之處：①相對較少的納入文獻和較小的樣本量，這可能影響統(tǒng)計效能;②在總體分析時，納入文獻間存在顯著異質(zhì)性，雖然使用隨機效應(yīng)模型進行統(tǒng)計，但仍可能影響結(jié)果的準(zhǔn)確性;③AP屬于復(fù)雜性疾病，其發(fā)病因素包含了遺傳和環(huán)境等多個因素，本研究的結(jié)果未對其他混雜因素進行調(diào)整，故對結(jié)果的解釋需謹(jǐn)慎。

綜上，基于目前Meta分析提示，IL-8基因啟動子-251T>A多態(tài)性可能會增加AP的發(fā)病風(fēng)險。但是考慮到本研究的局限性，需要設(shè)計更完善、樣本量更大的研究來證實該結(jié)論。

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（收稿日期：2018-04-13? 本文編輯：金? ?虹）