程生輝，祁曉鳴，李會芳，韓 瑞，黃偉靜

（山西中醫(yī)藥大學(xué)，山西晉中030619）

九香蟲為蝽科昆蟲九香蟲（Aspongopus Chinensis Dallas）的干燥體，始載于《本草綱目》，《中國藥典》（2015年版）收載中藥，具有理氣止痛、溫中助陽之功效，傳統(tǒng)用于胃寒脹痛、肝胃氣痛、腎虛陽痿、腰膝酸痛等證。20世紀(jì)90年代以來多篇文獻(xiàn)報道其配伍應(yīng)用治療各種消化道潰瘍性疾病，療效確切，并經(jīng)課題組成員證實其臨床療效［1-5］。現(xiàn)代藥理研究表明，九香蟲具有抗癌、抗凝、鎮(zhèn)痛、抑菌等藥理活性［6-7］，目前鮮見治療消化性潰瘍的實驗研究相關(guān)報道。九香蟲中主要含有脂肪油和蛋白質(zhì)成分，還含甲殼質(zhì)、微量元素、維生素、尿嘌呤、黃嘌呤、生物堿、黃酮等成分，其中脂肪油占九香蟲藥材干重的53.0%，不飽和脂肪酸的含量占總油脂的 57.1%。蛋白質(zhì)占九香蟲藥材干重的44.3%，10種必需氨基酸含量占總氨基酸量可達(dá)42.38%［8］。本研究采用無水乙醇誘發(fā)型和應(yīng)激性胃潰瘍大鼠模型對九香蟲不同提取部位的抗?jié)冏饔眠M(jìn)行對比研究，以明確九香蟲抗?jié)冏饔玫奈镔|(zhì)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 SD大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量為（200±20）g，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，合格證號 SCXK（京）2012-0001。

1.1.2 實驗藥物 九香蟲藥材經(jīng)山西中醫(yī)藥大學(xué)裴香萍副教授鑒定為昆蟲綱半翅目蝽科九香蟲（Aspongopus Chinensis Dallas）的干燥蟲體。產(chǎn)地：湖北；生產(chǎn)加工地址：安徽盛海堂中藥飲片有限公司；產(chǎn)品批號：20130701。九香蟲脂肪油提取物由超臨界CO2萃取得到（批號20140402），萃取條件為溫度：萃取釜為45℃，分離柱為45℃，二解析為常溫。壓力：萃取釜為30 MPa，分離柱為10 MPa，二解析為6 MPa。九香蟲氨基酸提取物由脂肪油提取殘渣進(jìn)行蒸餾水回流提取所得，提取工藝為10倍量水，回流提取3次，每次1 h。九香蟲水煎液的制備：九香蟲生藥100 g，加入10倍量的水，回流提取2次（每次30 min），濃縮成800 mL。陽性藥物西咪替丁片，廣東恒健制藥有限公司生產(chǎn)，批號：140507。

1.2 實驗方法

1.2.1 九香蟲不同提取部位對無水乙醇誘發(fā)大鼠胃潰瘍的影響 72只SD大鼠分為9組，適應(yīng)飼養(yǎng)3 d后，九香蟲給藥組按照高劑量組為2.10 g（生藥）/kg，低劑量 1.05 g（生藥）/kg的劑量給藥，空白組和模型組大鼠灌胃等量的蒸餾水，陽性對照組給藥劑量為35 mg/kg，連續(xù)灌胃4 d。第4天灌胃結(jié)束后，將每組大鼠放入代謝籠中飼養(yǎng)，禁食不禁水24 h，24 h后各組大鼠繼續(xù)灌胃相應(yīng)的藥物。1 h后，除空白組外，各組大鼠按1 mL/只的量灌胃無水乙醇制備大鼠胃潰瘍模型。繼續(xù)禁食1.5 h。1.5 h后脫頸處死大鼠，剪開大鼠腹腔，用結(jié)扎線結(jié)扎幽門，從賁門注入1%甲醛溶液10 mL，結(jié)扎賁門，并放入1%甲醛溶液中固定10 min，之后沿著胃大彎將胃剪開，并用生理鹽水清洗胃壁內(nèi)測，觀察并記錄潰瘍指數(shù)，潰瘍指數(shù)用“分”來表示，瘀血點為1分，線狀瘀血長度小于1 mm者為2分，1～2 mm者為3分，3～4 mm者為4分，大于5 mm者為5分。每只大鼠胃分?jǐn)?shù)的總和為該鼠的潰瘍指數(shù)。

1.2.2 九香蟲不同提取部位對應(yīng)激性大鼠胃潰瘍的影響 72只SD大鼠隨機(jī)分為9組，按組灌胃藥物，給藥方法及劑量同上。連續(xù)給藥5 d。采用水浸-束縛法誘發(fā)大鼠胃潰瘍。第4天給藥后，將各組大鼠放入代謝籠中禁食24 h（不禁水，嚴(yán)格控制大鼠吃自己的糞便和飼料）。第5天實驗前2 h經(jīng)口灌胃給藥1次，2 h后將實驗大鼠用適量乙醚麻醉后固定于鼠板浸入水中，液面與大鼠胸骨劍突保持水平，束縛7 h。其間要注意觀察大鼠，防止其脫線掉入水中。整個過程水溫保持在20℃左右。7 h后處死。迅速打開腹腔，暴露胃體，結(jié)扎賁門和幽門、剪斷，取出全胃，用注射器以1%甲醛10 mL注入胃內(nèi)，再將胃浸入1%甲醛內(nèi)固定10 min，結(jié)束固定后，沿胃大彎將其剪開展平，可見局限于胃黏膜的點狀或線狀出血性損傷，記錄損傷長度并打分，潰瘍指數(shù)計分方法同上。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 九香蟲不同提取部位對無水乙醇誘發(fā)胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)的影響

結(jié)果見表1。

表1 九香蟲不同提取部位對無水乙醇誘發(fā)胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)的影響 （±s）

表1 九香蟲不同提取部位對無水乙醇誘發(fā)胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)的影響 （±s）

注：與模型組相比，1）P＜0.01

組別 n 潰瘍指數(shù)（分）空白組 8 0模型組 8 5 6.6 3±1 2.3 7陽性對照組 8 4 5.4 3±2 9.8 3九香蟲氨基酸高劑量組 8 4 4.5 0±2 2.9 1九香蟲氨基酸低劑量組 8 5 2.2 5±1 5.6 2九香蟲脂肪油高劑量組 8 2 5.5 0±1 7.0 8 1）九香蟲脂肪油低劑量組 8 8.5 0±6.6 3 1）九香蟲水煎液高劑量組 8 5 0.2 9±1 2.0 4九香蟲水煎液低劑量組 8 5 1.5 0±1 5.5 8

由表1可以看出，與模型組相比，脂肪油高、低劑量組大鼠潰瘍指數(shù)明顯降低（P＜0.01），而陽性對照組、氨基酸高、低劑量組和水煎液高、低劑量組與模型組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），九香蟲提取物中對無水乙醇誘發(fā)胃潰瘍具有治療作用的是脂肪油部位。

2.2 九香蟲不同提取部位對應(yīng)激性胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)的影響

結(jié)果見表2。

表2 九香蟲不同提取部位對應(yīng)激性胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)的影響 （±s）

表2 九香蟲不同提取部位對應(yīng)激性胃潰瘍大鼠潰瘍指數(shù)的影響 （±s）

注：與模型組相比，1）P＜0.05，2）P＜0.01

組別 n 潰瘍指數(shù)（分）空白組 8 0模型組 8 2 8.1 2±1 1.2 2陽性對照組 8 1 2.3 3±1 0.7 6 1）九香蟲氨基酸高劑量組 8 2 3.3 8±1 1.2 0九香蟲氨基酸低劑量組 8 2 8.8 8±1 3.8 1九香蟲脂肪油高劑量組 8 1 1.4 3±7.5 9 2）九香蟲脂肪油低劑量組 8 7.8 3±6.7 9 2）九香蟲水煎液高劑量組 8 2 8.7 5±9.3 9九香蟲水煎液低劑量組 8 2 9.7 5±1 2.5 6

由表2可以看出，與模型組相比，陽性對照組、脂肪油高、低劑量組大鼠的潰瘍指數(shù)顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）。而氨基酸高、低劑量組和水煎液高、低劑量組大鼠的潰瘍指數(shù)與模型組相比無明顯變化（P＞0.05），提示九香蟲提取物中對應(yīng)激性胃潰瘍具有治療作用的是脂肪油部位。

3 討論

本次研究表明，九香蟲脂肪油對應(yīng)激性和無水乙醇誘發(fā)的潰瘍大鼠具有抗實驗性胃潰瘍作用，氨基酸和水煎液部位未觀察到抗?jié)冏饔?。本次實驗劑量折算至臨床用量為10～20 g。臨床上應(yīng)用九香蟲治療各種胃脘痛主要是以煎劑形式與其他中藥配伍應(yīng)用，因此推測本次未觀察到水煎液的抗?jié)冏饔?，可能與其單用療效降低有關(guān)，且水煎煮提取脂肪油不夠充分有關(guān)。本實驗提示臨床應(yīng)用九香蟲治療胃潰瘍時，研末吞服可能會提高療效。