武 磊，李 潔，鄒余糧

(西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，西安 710000)

近年來，曾被認(rèn)為是“轉(zhuǎn)錄噪聲”的微RNA(microRNA,miRNA)與癌癥的關(guān)系研究已成為熱點(diǎn)。miRNA在功能上涉及幾乎所有的生理過程，包括細(xì)胞分化、增殖、代謝、凋亡和炎癥等，調(diào)控各種細(xì)胞信號(hào)通路。研究發(fā)現(xiàn)，與癌旁的正常細(xì)胞相比，癌細(xì)胞中miRNA的表達(dá)譜發(fā)生了改變。在多種人類癌癥發(fā)生過程中，miRNA可作為癌基因和抑癌基因。進(jìn)一步研究證明，一部分miRNA通過腫瘤干細(xì)胞[1-2]、腫瘤血管再生[3]、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞[4]、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[5]等途徑調(diào)控惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。有研究證明，可通過檢測(cè)血清miRNA的含量，預(yù)測(cè)器官損傷及病變風(fēng)險(xiǎn)[6]。隨著對(duì)化療耐藥研究的深入發(fā)現(xiàn)，miRNA可為逆轉(zhuǎn)化療耐藥提供一條新途徑。在癌癥耐藥細(xì)胞中，miR-145表達(dá)下調(diào)，體外實(shí)驗(yàn)miR-145表達(dá)升高，可逆轉(zhuǎn)耐藥。然而，每個(gè)miRNA都不是單獨(dú)存在的，體內(nèi)有著復(fù)雜的內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)RNA調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)[7]，miR-145的下調(diào)受到長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)以及信使RNA(messenger RNA,mRNA)的影響?，F(xiàn)對(duì)miR-145在腫瘤耐藥中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 miRNAs與腫瘤耐藥

miRNAs是一段長(zhǎng)20～24 nt的單鏈非編碼蛋白R(shí)NA。在人類基因組中，已經(jīng)被確認(rèn)的miRNA約有2 500種，參與超過30%蛋白質(zhì)編碼基因的調(diào)節(jié)[8]。其轉(zhuǎn)錄本在RNA聚合酶Ⅱ的作用下生成初級(jí)轉(zhuǎn)錄本；然后經(jīng)DiGeorge綜合征危象區(qū)基因8(DiGeorge syndrome chromosomal region 8，DGCR8)和Drosha復(fù)合體的作用，生成miRNA前體，最后在Dicer酶作用下生成長(zhǎng)度為19～22個(gè)核苷酸的成熟雙鏈miRNA[9]。主要通過末端的“種子”區(qū)域與mRNA的堿基配對(duì)互補(bǔ)，從而負(fù)調(diào)節(jié)mRNA翻譯，進(jìn)一步影響蛋白質(zhì)的表達(dá)。miRNA-mRNA結(jié)合位點(diǎn)很短(6～8個(gè)堿基對(duì))，單個(gè)miRNA可能潛在靶向數(shù)十至數(shù)百個(gè)mRNA[10]，因此每個(gè)miRNA都可在不同生物途徑中發(fā)揮作用。

目前的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)很多與腫瘤耐藥相關(guān)的miRNAs。它們參與耐藥的相關(guān)機(jī)制：①通過細(xì)胞凋亡的異常調(diào)節(jié)[11]。如miR-15b/16通過抗細(xì)胞凋亡參與胃癌多藥耐藥的發(fā)展[12]。在乳腺癌中，miR-497上調(diào)可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)化療藥的敏感性[13]。②影響細(xì)胞周期[14]。在乳腺癌中，與敏感細(xì)胞相比，MCF-7細(xì)胞中miR-221/222的上調(diào)參與獲得性氟維司群耐藥性[15]。miR-200b可靶向轉(zhuǎn)錄因子E2F3，維持正常細(xì)胞周期進(jìn)展,可作為人肺腺中多西紫杉醇的化學(xué)敏感性恢復(fù)劑起作用[16]。③調(diào)節(jié)藥物外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)[17]。腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白家族成員的高表達(dá)，參與腫瘤復(fù)發(fā)和對(duì)化學(xué)治療的耐藥性。Borel等[18]將19種配對(duì)的肝細(xì)胞癌與健康組織進(jìn)行比較，確定了上調(diào)和下調(diào)79種miRNA的情況。經(jīng)熒光素酶檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，miR-101和miR-135b下調(diào)腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白A1，miR-199a/b和miR-296下調(diào)腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白C1，腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白C4是miR-125a/b的直接靶標(biāo)，腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白C5被miR-101下調(diào)，腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白C10是let-7a/e的靶標(biāo)，并且腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白E1由miR-26a、miR-135b和miR-145直接下調(diào)。miR-200c的上調(diào)通過降低腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白B1的表達(dá)增強(qiáng)了MCF7乳腺癌細(xì)胞對(duì)表柔比星的化學(xué)敏感性[19]。④通過自噬參與腫瘤耐藥。miR-30a通過靶向Beclin-1而抑制自噬活性，從而有效提高腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性[20]。miRNA的異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展相關(guān)，并且已顯示其表達(dá)的逆轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)癌癥表型，表明miRNA作為抗癌藥物靶標(biāo)的潛力。

2 miR-145與腫瘤耐藥

2002年，Lagos-Quintana等[21]檢查了9種不同的小鼠組織，通過組織特異性鑒定，發(fā)現(xiàn)34種新的miRNA，其中包括miR-145。并鑒定出miR-145的序列為：GUCCAGUUUUCCCAGGAAUCCCUU。2003年，Michael等[22]在研究人結(jié)直腸腺癌時(shí)發(fā)現(xiàn)了人miR-145，鑒定其序列為:GUCCAGUUUUCCCAGGAAUCC。人鼠同源，故大量體內(nèi)實(shí)驗(yàn)基于小鼠完成。人的miR-145位于染色體5q32。具有高度的保守性、時(shí)序性和組織特異性，具有miRNA的一切特點(diǎn)，調(diào)節(jié)多個(gè)靶基因，通過降解靶基因mRNA，參與調(diào)控真核細(xì)胞的活動(dòng)程序。研究表明，在乳腺癌、結(jié)腸癌、膀胱癌、宮頸癌、前列腺癌、肺癌、胃癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌等癌癥中miR-145表達(dá)恒定下調(diào)[23-29]。而在正常中胚層組織中如卵巢、子宮、睪丸、前列腺、心臟中富含miR-145[30]。目前，已經(jīng)明確miR-145可通過調(diào)控靶基因影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、凋亡、侵襲等過程[31-35]。

2.1miR-145與卵巢癌 卵巢癌是女性三大惡性腫瘤之一,其死亡率位于婦科癌癥之首，大多數(shù)患者就診時(shí)已為晚期。紫杉醇和鉑類作為一線化療藥物是治療晚期卵巢癌的主要手段，但化療后的耐藥復(fù)發(fā)為治療帶來極大阻礙。在卵巢癌細(xì)胞中，miR-145表達(dá)下調(diào)。有研究發(fā)現(xiàn),miR-145在人卵巢癌SKOV3/順鉑細(xì)胞株中的表達(dá)低于在人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中表達(dá)，同時(shí)在裸鼠體內(nèi)形成的移植瘤中，人卵巢癌SKOV3/順鉑細(xì)胞株中的表達(dá)也低于人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中表達(dá)，即無論體內(nèi)體外，其在耐藥細(xì)胞系中的表達(dá)均低于非耐藥細(xì)胞系[36]。Zhu等[37]將miR-145 mimic導(dǎo)入SKOV3/紫杉醇和A2780/紫杉醇細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)過表達(dá)miR-145能降低胞內(nèi)的Cdk6和Sp1水平，阻斷致癌轉(zhuǎn)錄活性，從而導(dǎo)致G1細(xì)胞周期阻滯。此外，他們還發(fā)現(xiàn)，miR-145在體內(nèi)體外均能增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)紫杉醇的敏感性。Twist是一個(gè)導(dǎo)致耐藥的基因，Twist的增加是鼻咽癌細(xì)胞獲得性紫杉醇耐藥性的發(fā)展和Twist的異位表達(dá)對(duì)微管破壞劑(包括紫杉醇)的抗性[38]。在卵巢癌細(xì)胞系研究中，發(fā)現(xiàn)Twist被miR-145直接靶向[39]。與臨床情況相關(guān)的是，Twist在晚期卵巢癌患者中高表達(dá)。Twist高表達(dá)的上皮性卵巢癌患者預(yù)后不良[40]。故在卵巢癌中，過表達(dá)miR-145可能通過靶向Twist，而減弱卵巢癌的紫杉醇耐藥以及改善預(yù)后。

2.2miR-145與宮頸癌 宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤。隨著三級(jí)篩查的穩(wěn)定實(shí)施，宮頸癌得以早期發(fā)現(xiàn)和治療。目前認(rèn)為宮頸癌的發(fā)生與人乳頭瘤病毒長(zhǎng)期感染有關(guān)。在宮頸癌細(xì)胞中，miR-145表達(dá)下調(diào)。人乳頭瘤病毒致癌蛋白E6參與宮頸癌耐藥。糖皮質(zhì)激素通過誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞中人乳頭瘤病毒致癌E6蛋白調(diào)節(jié)p53-miR-145途徑，使miR-145的表達(dá)下調(diào)，阻止化療誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，而miR-145的過表達(dá)逆轉(zhuǎn)了由糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的絲裂霉素耐藥性[41]。張鴻博[42]通過向?qū)m頸癌Hela細(xì)胞中導(dǎo)入外源性miR-145-5p mimics，應(yīng)用3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽方法研究其對(duì)紫杉醇敏感性的影響。以相對(duì)細(xì)胞增殖活性反映轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞增殖能力的變化。結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR-145-5p能增加Hela細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。

2.3miR-145與乳腺癌 乳腺癌是全球女性癌癥死亡的最常見原因。迄今，miRNA與乳腺癌的關(guān)系研究已取得很大進(jìn)展。miR-145在乳腺癌臨床樣本中顯著下調(diào)，并且與乳腺癌細(xì)胞系和臨床乳腺癌組織中的多藥耐藥相關(guān)蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1，MRP1)表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。Gao等[43]通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、熒光素酶測(cè)定，確定miR-145可以直接靶向MRP1。在體外，miR-145通過抑制MRP1誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)阿霉素累積，從而增加細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性。在體內(nèi)，強(qiáng)制表達(dá)miR-145增加了對(duì)基于MDA-MB-231細(xì)胞的裸鼠異種移植物中阿霉素的敏感性。研究結(jié)果證明miR-145使乳腺癌對(duì)阿霉素化療敏感。另有研究顯示，miR-145通過抑制Bcl-2和P糖蛋白的表達(dá)來增加阿霉素耐藥性的MCF-7細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性和凋亡[44]。

2.4miR-145與食管癌 我國(guó)是食管癌的高發(fā)地區(qū)，早期診斷和治療技術(shù)等方面都取得了很大進(jìn)步，但預(yù)后仍然較差。在食管癌中，miR-145對(duì)不同細(xì)胞的作用不一。王喜成[45]發(fā)現(xiàn)，miR-145過表達(dá)引起多藥耐藥基因(multidrug resistance,MDR)1、主穹隆蛋白的表達(dá)降低，并且，miR-145通過降低靶基因YES1的表達(dá)增加Eca109和EC9706細(xì)胞對(duì)順鉑和紫杉醇的敏感性。Derouet等[46]選取3個(gè)對(duì)5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)及順鉑雙重耐藥的細(xì)胞系，分別為OE33、SK-GT-4、FLO-1，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，在OE33細(xì)胞中miR-145的表達(dá)對(duì)順鉑及5-FU的耐藥性無影響；miR-145可增加SK-GT-4細(xì)胞對(duì)順鉑的抗性，但不影響其對(duì)5-FU的抗性；在FLO-1細(xì)胞中，miR-145減弱了對(duì)順鉑的抗性，但對(duì)5-FU抗性無影響。

2.5miR-145與胃癌 胃癌在我國(guó)發(fā)病率和死亡率位居第二位。盡管目前發(fā)病率有所下降，仍危害人類健康，且發(fā)病的具體分子機(jī)制未明。在胃癌細(xì)胞中，CD44+胃癌細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞特性，并且對(duì)5-FU與依托泊苷等化療藥物有明顯的耐藥性[47]。Zeng等[48]通過研究發(fā)現(xiàn)，miR-145主要通過直接靶向CD44的3′-非翻譯區(qū)調(diào)節(jié)CD44，抑制細(xì)胞自我更新特性并改善胃癌細(xì)胞的化學(xué)敏感性。胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(insulin-like growth factor 1 receptor，IGF-1R)/胰島素受體底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)的激活可促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡。目前研究表明IGF-1R/IRS-1通路相關(guān)蛋白過表達(dá)與胃癌化療效果、預(yù)后呈負(fù)相關(guān)[49]。而且卵巢癌的研究顯示，在順鉑治療周期中IGF-1R呈高表達(dá)，并參與耐藥[50]。表明IGF-1R/IRS-1的激活表達(dá)與腫瘤的順鉑耐藥相關(guān)。朱明霞等[51]通過雙熒光素酶基因分析證實(shí)IGF-1R與IRS-1為miR-145的靶基因，并通過轉(zhuǎn)染等方法驗(yàn)證miR-145通過靶向抑制IGF-1R和IRS-1表達(dá)調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞耐藥。Law等[52]和Yin等[53]分別發(fā)現(xiàn)miR-145在腸癌和肝癌細(xì)胞中靶向抑制IGF-1R與IRS-1。

2.6miR-145與胰腺癌 胰腺癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，惡性程度高，診斷治療困難。目前miRNA作為胰腺癌分子標(biāo)志物的研究較多。P70S6K1是哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白通路最重要的下游靶點(diǎn)之一，可被磷脂酰肌醇-3-激酶/第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源物/蛋白激酶B信號(hào)通路激活。證據(jù)表明p70S6K1通路參與細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡、轉(zhuǎn)移和耐藥等多種細(xì)胞功能[54]。Lin等[55]在胰腺癌研究中發(fā)現(xiàn)，P70S6K1是miR-145的直接靶點(diǎn)，兩者相互負(fù)調(diào)控。過表達(dá)p70S6K1可增強(qiáng)細(xì)胞耐藥性，同時(shí)降低miR-145的表達(dá)水平。反過來，升高miR-145的表達(dá)水平，可增加耐藥細(xì)胞對(duì)化療藥敏感性，同時(shí)抑制p70S6K1的表達(dá)。MUC13是一種跨膜黏蛋白，高度參與胰腺癌的進(jìn)展。miR-145主要存在于正常胰腺組織和早期胰腺導(dǎo)管腺癌前體病變Ⅰ期中，并且在從前體病變Ⅱ/Ⅲ期發(fā)展到晚期低分化胰腺導(dǎo)管腺癌的過程中逐漸受到抑制。Khan等[56]的研究表明，高水平的miR-145可能以MUC13的3′非翻譯區(qū)為靶點(diǎn)，抑制細(xì)胞內(nèi)MUC13及其下游靶點(diǎn)ERBB2的表達(dá)，從而提高胰腺癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱的敏感性。

2.7miR-145與膽囊癌 膽囊癌是最常見的膽管系統(tǒng)惡性腫瘤，早期無特異臨床表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)時(shí)多為晚期，且預(yù)后不良。Zhan等[57]研究發(fā)現(xiàn)miR-145在膽囊癌組織中下調(diào)。應(yīng)用開放靶點(diǎn)預(yù)測(cè)程序，發(fā)現(xiàn)miR-145可以直接靶向MRP1基因。且通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-145和MRP1之間存在調(diào)節(jié)機(jī)制。過表達(dá)miR-145降低了MRP1的表達(dá)，而MRP1的減少又增強(qiáng)膽囊癌細(xì)胞的順鉑敏感性。并且在體內(nèi)和體外得到了一致結(jié)果，證明上調(diào)miR-145可增強(qiáng)癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。

2.8miR-145與結(jié)腸癌 結(jié)腸癌是世界三大最常見癌癥之一，雖然可早期發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)移發(fā)生也早。近年來與miRNA的關(guān)系研究已成為熱點(diǎn)。付強(qiáng)等[58]研究證實(shí)miR-145可能通過增強(qiáng)抑癌基因PTEN的表達(dá)，削弱人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株HCT-116/L-OHP的耐藥性。另有研究發(fā)現(xiàn)，miR-145通過抑制靶基因GPR98的表達(dá)從而抑制HCT-116細(xì)胞的L-OHP的耐藥性[59]。體外研究表明，細(xì)胞內(nèi)MDR基因與P糖蛋白的表達(dá)水平越高，細(xì)胞耐藥性越強(qiáng)[60]。Ikemura等[61]在miR-145與MDR1/P糖蛋白通路研究中行熒光素酶檢測(cè)證實(shí)，miR-145的直接靶標(biāo)是MRP1，miR-145可通過結(jié)合MRP1基因3′非翻譯區(qū)調(diào)節(jié)該基因的翻譯，下調(diào)其表達(dá)產(chǎn)物P糖蛋白。而細(xì)胞通過減弱P糖蛋白外排作用，使細(xì)胞毒性藥物在細(xì)胞內(nèi)蓄積從而增強(qiáng)藥物敏感性[62]。

結(jié)腸癌的維羅非尼抗性細(xì)胞系colo205/V中，miR-145的表達(dá)顯著低于正常colo205細(xì)胞系。miR-145的過表達(dá)可以增加colo205/V細(xì)胞對(duì)維羅非尼在體外和體內(nèi)的敏感性[63]。另外結(jié)腸癌相關(guān)研究中，Akao等[64]通過濃度梯度法建立對(duì)5-FU耐藥細(xì)胞系，發(fā)現(xiàn)敏感組細(xì)胞接觸5-FU后細(xì)胞內(nèi)中miR-145表達(dá)水平升高，但耐藥組未出現(xiàn)相應(yīng)變化。但藥物作用后外排小泡中的miR-145表達(dá)水平下降，證明增加miR-145外排可能是結(jié)腸癌細(xì)胞產(chǎn)生奧沙利鉑耐藥的機(jī)制。

2.9miR-145與惡性胸膜間皮瘤 惡性胸膜間皮瘤比較罕見，是一種侵襲性的人類癌癥。多數(shù)發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于晚期，對(duì)常規(guī)治療不敏感。在惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞中，miR-145表達(dá)明顯下降。Cioce等[65]研究發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)miR-145，降低惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系的活力，阻止克隆形成以及遷移，并且加速細(xì)胞的衰老。miR-145通過特異性結(jié)合其3′非翻譯區(qū)靶向八聚體轉(zhuǎn)錄因子4。抑制八聚體轉(zhuǎn)錄因子4及其下游物質(zhì)E盒鋅指結(jié)合蛋白1的表達(dá)，從而避免細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性[65]。

2.10miR-145與前列腺癌 前列腺癌嚴(yán)重威脅男性健康，延長(zhǎng)生存期和提高生命質(zhì)量的關(guān)鍵在于早期發(fā)現(xiàn)和有效治療。在前列腺癌中miRNA的表達(dá)譜發(fā)生改變，一部分促進(jìn)前列腺癌的形成及耐藥，也有一些miRNA起到抑癌基因及抗耐藥性作用。前列腺癌細(xì)胞中睪丸孤核受體4調(diào)節(jié)miR-145啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性，miR-145調(diào)節(jié)八聚體轉(zhuǎn)錄因子4轉(zhuǎn)錄活性。故睪丸孤核受體4可通過睪丸孤核受體4-miR-145-八聚體轉(zhuǎn)錄因子4途徑調(diào)控前列腺癌細(xì)胞的化療耐藥性[66]。He等[67]研究表明，前列腺特異性轉(zhuǎn)錄物1是lncRNA，在前列腺癌細(xì)胞中過表達(dá)，能促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移，并引起腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥。miR-145與前列腺特異性轉(zhuǎn)錄物1之間存在著雙重負(fù)反饋調(diào)節(jié)，過表達(dá)的miR-145能抑制前列腺特異性轉(zhuǎn)錄物1的表達(dá),從而抑制耐藥進(jìn)展。

2.11miR-145與腫瘤干細(xì)胞 腫瘤干細(xì)胞是指在腫瘤組織中具有自我更新、無限增殖和多向分化能力的一小部分細(xì)胞，并且能夠產(chǎn)生該腫瘤一系列異質(zhì)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞亞群[68]，幾乎所有的實(shí)體瘤細(xì)胞群體中均能分離得到。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，腫瘤干細(xì)胞對(duì)常規(guī)化療藥物和放療有更強(qiáng)的耐受能力，是耐藥的主要原因[69]。

miR-145可以靶向多種干細(xì)胞因子，如八聚體轉(zhuǎn)錄因子4、性別決定區(qū)域Y基因2、Krüppel樣因子4等，通過調(diào)節(jié)這些靶向因子的活動(dòng)從而抑制腫瘤干細(xì)胞[70],進(jìn)而可能逆轉(zhuǎn)腫瘤的耐藥。Chiou等[71]研究檢測(cè)到，肺癌側(cè)群細(xì)胞中miR-145表達(dá)水平下降明顯，通過轉(zhuǎn)染miR-145可以抑制腫瘤的生長(zhǎng)及遷移、增強(qiáng)對(duì)抗腫瘤藥物的敏感性，從而延長(zhǎng)小鼠的存活期。干細(xì)胞多能基因Nanog的過表達(dá)與三陰性乳腺癌不良預(yù)后相關(guān)，并參與耐藥。在乳腺癌研究中，miR-145高表達(dá)可通過降低Nanog逆轉(zhuǎn)耐藥[72]。

3 miRNA與逆轉(zhuǎn)癌細(xì)胞耐藥

逆轉(zhuǎn)癌細(xì)胞耐藥在治療中顯得尤為重要。miR-145在大多腫瘤中低表達(dá)，故可以設(shè)想通過升高miR-145的表達(dá)水平，達(dá)到抑制癌細(xì)胞增殖、分化以及耐藥的效果。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)miR-145在耐藥細(xì)胞中發(fā)揮重要作用，但在人體復(fù)雜腫瘤微環(huán)境及競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA調(diào)控體系中，miR-145在耐藥細(xì)胞中的表達(dá)同樣受到其他因子調(diào)控。

有一些lncRNA存在與miRNA的互補(bǔ)序列，能夠競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體，使miRNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體不能抑制相應(yīng)mRNA的翻譯。有研究顯示，重編程調(diào)節(jié)子基因間非編碼RNA可作為“海綿樣”物質(zhì)，誘導(dǎo)miR-145沉默，以調(diào)節(jié)乳腺癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)、耐藥性[73]。同樣，在食管癌研究中，miR-145受到重編程調(diào)節(jié)子基因間非編碼RNA的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，被降解，使得食管鱗狀細(xì)胞癌的惡性增強(qiáng)[74]。在肺癌干細(xì)胞的研究中，發(fā)現(xiàn)miR-145受重編程調(diào)節(jié)子基因間非編碼RNA/p53的調(diào)節(jié)，其對(duì)干細(xì)胞因子八聚體轉(zhuǎn)錄因子4、性別決定區(qū)域Y基因2等的作用被阻止，從而促進(jìn)耐藥[75]。lncRNA MALAT1可通過miR-145-5p介導(dǎo)的激酶錨定蛋白12調(diào)節(jié)增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞的多西紫杉醇抗性[76]。linc-DYNC2H1-4與miR-145競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合并上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶3水平，增強(qiáng)胰腺癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱的耐藥性[77]。

MiRNA的啟動(dòng)子區(qū)也存在CpG島。Zhu等[37]用5-aza-dC行去甲基化處理A2780/紫杉醇和SKOV3/紫杉醇細(xì)胞后，miR-145表達(dá)被誘導(dǎo)增高約6倍(A2780/紫杉醇)或5倍(SKOV3/紫杉醇)，使EOC細(xì)胞對(duì)pacli-taxel敏感性明顯增加[37]。提示miR-145也可以是卵巢癌多藥耐藥表觀遺傳治療的靶點(diǎn)。因此，可以設(shè)想在侵襲性及耐藥性腫瘤細(xì)胞中，miR-145的啟動(dòng)子區(qū)高度甲基化，抑制了miR-145的機(jī)體保護(hù)作用。此機(jī)制有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

4 小 結(jié)

miR-145是一個(gè)調(diào)控點(diǎn)，在腫瘤發(fā)生發(fā)展、耐藥性、競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA網(wǎng)絡(luò)以及表觀遺傳中，均參與調(diào)控和被調(diào)控。以其為作用靶點(diǎn)，調(diào)節(jié)其上游基因及靶基因相關(guān)因子，不失為一種有效研究途徑。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)在體外完成，在人體內(nèi)部環(huán)境下，其表達(dá)以及調(diào)控情況尚未闡明。盡管如此，藥物靶向治療漸趨成熟，基于脂質(zhì)體技術(shù)平臺(tái)的miRNA藥物輸送技術(shù)已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，對(duì)實(shí)體瘤患者進(jìn)行嘗試性治療。而且外泌體的研究漸趨成熟，也將可能作為藥物輸送的載體。相信隨著研究技術(shù)的不斷提高、miR-145研究的持續(xù)深入，以miR-145為作用靶點(diǎn)開發(fā)新藥，將會(huì)成為干預(yù)化療耐藥的一個(gè)重要手段。