吳賢良, 黃建軍, 楊智明, 許衛(wèi)紅

脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)是臨床常見的一類中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷。SCI根據(jù)其病理生理機(jī)制的不同而分為原發(fā)性損傷及繼發(fā)性損傷，繼發(fā)性損傷是在原發(fā)性損傷的基礎(chǔ)上伴發(fā)的多種生化級(jí)聯(lián)反應(yīng)。神經(jīng)炎癥作為繼發(fā)性損傷的主要機(jī)制之一，會(huì)加重繼發(fā)性SCI，部分研究已通過(guò)靶向干預(yù)，證實(shí)了抑制機(jī)體免疫可減輕炎癥對(duì)繼發(fā)性損傷的影響[1-2]。文獻(xiàn)報(bào)道，SCI后，清除或抑制中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞，或者抑制白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-1β，IL-6等促炎因子均能促進(jìn)脊髓神經(jīng)功能恢復(fù)[3-4]。因此，抑制SCI后的炎癥反應(yīng)可以減少神經(jīng)組織的進(jìn)一步損傷并為神經(jīng)修復(fù)提供適宜的環(huán)境。環(huán)孢素A(cyclosporin A，CsA)是選擇性抑制T淋巴細(xì)胞的免疫抑制劑，主要是通過(guò)抑制輔助性T細(xì)胞增殖而發(fā)揮作用。正常脊髓組織中僅有極少數(shù)T淋巴細(xì)胞存在，而SCI后，T淋巴細(xì)胞數(shù)量急劇上升[5-6]，并浸潤(rùn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子大量釋放[7-8]。因此，CsA選擇性抑制T淋巴細(xì)胞增殖可顯著減輕促炎因子的釋放而在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮抗炎作用，進(jìn)而減輕繼發(fā)性SCI。既往SCI的熱點(diǎn)研究主要集中在軸突的再生及干細(xì)胞的移植等方面[9]。本研究將大鼠SCI后的行為學(xué)評(píng)估和損傷脊髓的組織學(xué)評(píng)估相結(jié)合，通過(guò)CsA的干預(yù)控制神經(jīng)炎癥反應(yīng)，探討CsA在大鼠繼發(fā)性SCI中可能的作用機(jī)制，為CsA用于臨床SCI的治療提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物 健康成年雄性SD大鼠75 只，體質(zhì)量220～260 g[福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)SCXK(滬)2007-0005]，單籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)環(huán)境溫度控制于20～23 ℃，濕度50%～60%，自由晝夜光線照明，動(dòng)物自由進(jìn)食，進(jìn)水。

1.2動(dòng)物模型制備 大鼠于術(shù)前禁食8 h，紫外線消毒手術(shù)臺(tái)及相關(guān)物品30 min，手術(shù)器械經(jīng)蒸汽高壓消毒。10%水合氯醛(4 mL/kg)腹腔注射麻醉，針刺下肢確認(rèn)麻醉成功后剔除背部毛發(fā)，將動(dòng)物俯臥位固定于手術(shù)臺(tái)。定位T10手術(shù)節(jié)段后，常規(guī)消毒。以T10為中心，行長(zhǎng)約3 cm背部正中切口，依次切開皮膚、皮下，分離兩側(cè)椎旁肌肉，顯露T9～T11節(jié)段棘突及椎板，小型拉鉤撐開。組織鉗輕輕提起T10棘突，顯露T10與T11間椎間隙，小型椎板咬骨鉗咬除T11棘突及T10椎板，顯露T10節(jié)段脊髓。用一打擊面直徑為3 mm的圓形薄墊片覆蓋于T10脊髓表面，以重10 g的鐵棒經(jīng)垂直圓柱套筒自25 mm高度自由墜落打擊該墊片，造成T10節(jié)段脊髓挫傷。建模成功后，予生理鹽水沖洗傷口，3-0絲線逐層縫合切口，待麻醉蘇醒后單籠飼養(yǎng)。

1.3動(dòng)物分組 75 只大鼠隨機(jī)分為3 組，假手術(shù)組(sham組，n=25)：僅摘除椎板，不進(jìn)行脊髓打擊及術(shù)后干預(yù)；CsA治療組(CsA組，n=25)：SCI建模后1 h尾靜脈注射2.5 mg/kg體質(zhì)量濃度CsA；生理鹽水治療組(NS組，n=25)：SCI建模后1 h尾靜脈注射與CsA等體積的生理鹽水。

1.4行為學(xué)評(píng)分 采用Basso-Beattie-Bresnahan評(píng)分法則(BBB score)評(píng)估SCI后大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能[10]。BBB評(píng)分0～21 分，將大鼠后肢運(yùn)動(dòng)分為22個(gè)等級(jí)。術(shù)后護(hù)理完成后將各組動(dòng)物置于約2 mm2面積的場(chǎng)地中自由活動(dòng)5 min，由兩位熟悉掌握BBB評(píng)分細(xì)則的實(shí)驗(yàn)人員從后肢關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)、步態(tài)、協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)和精細(xì)運(yùn)動(dòng)等方面細(xì)致觀察大鼠后肢及尾部運(yùn)動(dòng)情況并評(píng)分，取兩位評(píng)分人員的評(píng)分平均值作為每只大鼠在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的最終BBB評(píng)分。參照BBB評(píng)分細(xì)則對(duì)各組大鼠于術(shù)后1，3，7，14，21，28 d行BBB評(píng)分。

1.5實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè) 用Trizol溶液提取脊髓組織的總RNA后，按逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(PrimeScriptTMRT reagent Kit，日本Takara公司)說(shuō)明操作獲取cDNA，按Real-time PCR試劑盒(SYBR?Premix Ex TaqTM，日本TakaRa公司)進(jìn)行PCR反應(yīng)。IL-1β，IL-6及腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和GAPDH的引物序列見表1。以GAPDH作為內(nèi)參，用2-ΔΔCt法將IL-1β，IL-6及TNF-α的Ct值換算成升高或降低的倍數(shù)，以sham組各基因的表達(dá)作為對(duì)照分析qRT-PCR數(shù)據(jù)。

表1 引物序列Tab 1 Primer sequence

IL：白細(xì)胞介素；TNF-α：腫瘤壞死因子-α.

1.6蘇木精-伊紅(H-E)染色與損傷面積計(jì)算 脊髓標(biāo)本經(jīng)過(guò)常規(guī)脫水，透明，包埋后切取橫切片(片厚5 μm)，切片常規(guī)脫蠟至水，丙酮固定蘇木精染色，1%鹽酸酒精液分化，伊紅染色，切片脫水，二甲苯中再次透明，中性樹脂封片，晾干后觀察。觀察與評(píng)估：光學(xué)顯微鏡下觀察并選取高倍鏡視野(×400)拍照，利用photoshop軟件進(jìn)行高倍鏡照片拼接，IPP 6.0軟件分析各拼接照片的損傷面積和總面積。計(jì)算：每張切片的損傷面積百分比=(切片損傷面積/切片總面積)×100%。將損傷面積百分比最大的那張切片定義為該標(biāo)本的損傷中心。統(tǒng)計(jì)分析各組損傷中心H-E染色切片的損傷面積百分比。

1.7免疫組織化學(xué)染色 切片常規(guī)脫蠟至水，3%過(guò)氧化氫溶液消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，在檸檬酸鹽(pH=6.0)修復(fù)液中95 ℃水浴高溫進(jìn)行抗原修復(fù)，10%山羊血清封閉以減少非特異性染色，滴加一抗IL-1β(1∶500)，IL-6(1∶300)，TNF-α(1∶100)(兔抗大鼠IL-1β，IL-6，TNF-α多克隆抗體為美國(guó)Abcam公司)，4 ℃孵育過(guò)夜，用PBS替代相應(yīng)的一抗作陰性對(duì)照，滴加生物素標(biāo)記的山羊抗兔二抗，室溫下孵育15 min，滴加辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液(S-A/HRP)，室溫下孵育10～15 min，利用DAB顯色試劑盒進(jìn)行顯色，蘇木精復(fù)染細(xì)胞核。光學(xué)顯微鏡下觀察，陽(yáng)性細(xì)胞的染色呈棕褐色。每個(gè)標(biāo)本取兩張切片，每張切片取5個(gè)不重疊的隨機(jī)視野，采用IPP 6.0軟件計(jì)數(shù)每個(gè)視野中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及總細(xì)胞數(shù)。每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為每個(gè)視野中陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)的平均值。每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為該組該時(shí)間點(diǎn)3只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)平均值。每個(gè)視野的陽(yáng)性細(xì)胞百分比=(陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù))×100%。每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物陽(yáng)性細(xì)胞百分比取該組3只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的陽(yáng)性細(xì)胞百分比平均值。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 除BBB評(píng)分?jǐn)?shù)據(jù)采用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤)表示外，其余各組數(shù)據(jù)均采用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，BBB評(píng)分采用重復(fù)測(cè)量方差分析，其余結(jié)果采用單因素方差分析。P<0.05為差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1行為學(xué)評(píng)估結(jié)果 SCI后1，3，7，14，21及28 d，觀察各組大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能并進(jìn)行BBB評(píng)分。sham組BBB評(píng)分21 分，各時(shí)間點(diǎn)間比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，圖1)，說(shuō)明sham組建模成功，未損傷脊髓。SCI后，CsA組及NS組大鼠后肢截癱，BBB評(píng)分在所有觀察時(shí)間點(diǎn)均顯著低于sham組，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，圖1)。隨著觀察時(shí)間點(diǎn)推移，CsA組及NS組大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能逐漸恢復(fù)，兩組的BBB評(píng)分在損傷后1，3，7 d比較，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，圖1)。但CsA組大鼠的BBB評(píng)分自SCI后14 d起均顯著高于NS組，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，圖1)。

sham組:假手術(shù)組;CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組. 與sham組比較，+：P<0.05；與CsA組比較，△：P<0.05.圖1 各組各時(shí)間點(diǎn)的BBB評(píng)分比較Fig 1 BBB score at each time in each group

2.2SCI晚期H-E染色結(jié)果及各組損傷面積比較 SCI后28 d，結(jié)束大鼠行為學(xué)觀察后，取各組標(biāo)本行H-E染色并統(tǒng)計(jì)損傷面積百分比。sham組未見明顯結(jié)構(gòu)破壞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、出血、膠質(zhì)瘢痕形成等病理改變；而CsA組和NS組均可見明顯的程度不等的組織結(jié)構(gòu)破壞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、膠質(zhì)瘢痕形成、組織空腔形成等病理改變。SCI后28 d，CsA組及NS組的脊髓組織均有壞死空腔形成，膠質(zhì)瘢痕包裹，晚期炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變(圖2)。采用IPP 6.0軟件對(duì)損傷中心區(qū)的面積進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)CsA組的損傷面積百分比顯著低于NS組(P<0.01，圖3)。結(jié)合BBB評(píng)分結(jié)果及H-E染色定量結(jié)果分析，SCI后大鼠會(huì)出現(xiàn)明顯的運(yùn)動(dòng)功能障礙及病理性組織損傷，但CsA治療可顯著改善SCI大鼠的運(yùn)動(dòng)功能并減輕組織的繼發(fā)性損傷。

2.3CsA治療對(duì)SCI后大鼠髓內(nèi)促炎因子IL-1β，IL-6和TNF-α的mRNA水平的影響 SCI后6 h，CsA組與NS組脊髓組織的IL-1β，IL-6及TNF-α的mRNA水平均顯著高于sham組(P<0.01)，但CsA組脊髓的IL-1β，IL-6及TNF-α的mRNA水平卻顯著低于NS組(P<0.01，圖4)。SCI后1 d各促炎因子的mRNA表達(dá)趨勢(shì)與傷后6 h類似，CsA組與NS組脊髓組織的IL-1β，IL-6及TNF-α的mRNA水平均顯著高于sham組(P<0.01)，CsA組脊髓的IL-1β，IL-6及TNF-α的mRNA水平卻顯著低于NS組(P<0.01，圖5)。

A：sham組(假手術(shù)組); B：CsA組(環(huán)孢素A治療組); C：NS組(生理鹽水治療組).圖2 各組大鼠SCI中心區(qū)橫切片比較Fig 2 Contrast of transverse sections of the central area of SCI in rats of each group

sham組:假手術(shù)組;CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組. 與sham組比較，+：P<0.05；與CsA組比較，△：P<0.05.圖3 各組大鼠脊髓損傷中心區(qū)損傷面積百分比比較Fig 3 Comparison of the percentage of injured area in the central area of SCI in rats of each group

2.4CsA治療對(duì)SCI后大鼠髓內(nèi)促炎因子IL-1β，IL-6及TNF-α蛋白水平的影響 對(duì)SCI后6 h各組的免疫組織化學(xué)染色切片陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)及總細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)(圖6)。各組各因子的陽(yáng)性細(xì)胞百分比統(tǒng)計(jì)顯示，CsA組與NS組脊髓組織的IL-1β，IL-6及TNF-α的陽(yáng)性細(xì)胞百分比均顯著高于sham組(P<0.01)，而CsA組脊髓的IL-1β，IL-6及TNF-α的陽(yáng)性細(xì)胞百分比卻顯著低于NS組(P<0.01，圖7A)。對(duì)SCI后1 d各組各因子的陽(yáng)性細(xì)胞百分比統(tǒng)計(jì)顯示，CsA組與NS組脊髓組織的IL-1β，IL-6及TNF-α的陽(yáng)性細(xì)胞百分比均顯著高于sham組(P<0.01)，CsA組脊髓的IL-1β，IL-6及TNF-α的陽(yáng)性細(xì)胞百分比卻顯著低于NS組(P<0.01，圖7B)。結(jié)合qRT-PCR結(jié)果與免疫組織化學(xué)半定量結(jié)果綜合分析，SCI會(huì)誘導(dǎo)明顯的局部炎癥反應(yīng)，但CsA治療可顯著降低SCI大鼠促炎因子IL-1β，IL-6及TNF-α的表達(dá)。

sham組:假手術(shù)組; CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組； CsA：環(huán)孢素A；IL：白細(xì)胞介素；TNF-α：腫瘤壞死因子-α.與sham組比較，☆:P<0.05.圖4 脊髓損傷后6 h各組大鼠IL-1β，IL-6及TNF-α的mRNA水平比較Fig 4 6 h after SCI, the levels of IL-1β，IL-6 and TNF-α in rats of each group were compared

sham組:假手術(shù)組; CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組； IL：白細(xì)胞介素； TNF-α：腫瘤壞死因子-α; CsA：環(huán)孢素A. A：脊髓損傷后6 h； B：脊髓損傷后1 d. 與sham組比較，+：P<0.05；與CsA組比較，☆：P<0.05.圖5 脊髓損傷后1 d各組大鼠IL-1β，IL-6及TNF-α的mRNA水平比較Fig 5 1 d after SCI, the levels of IL-1β,IL-6 and TNF-α in rats of each group were compared

3 討 論

促進(jìn)SCI后神經(jīng)功能恢復(fù)的藥物治療，既要能夠避免殘存的神經(jīng)元受原發(fā)性損傷的波及，又要促進(jìn)損傷組織的修復(fù)[11-12]。許多學(xué)者已探討如何減輕SCI所誘導(dǎo)的組織損傷機(jī)制[13-15]。但至今仍然沒(méi)有有效的治療手段能減輕繼發(fā)性SCI。甲基強(qiáng)的松龍為一種合成的糖皮質(zhì)激素，能夠直接抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，減輕神經(jīng)元凋亡，促進(jìn)SCI后的神經(jīng)功能恢復(fù)[16-20]。目前甲基強(qiáng)的松龍對(duì)人類SCI后神經(jīng)功能恢復(fù)的有利效應(yīng)尚未被完全證實(shí)[21-25]。研究表明，免疫抑制劑CsA及他克莫司(FK-506)這兩種磷酸酶抑制劑對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷有潛在的神經(jīng)保護(hù)作用[26-27]。CsA是一類含11個(gè)氨基酸的環(huán)狀多肽，可選擇性抑制T淋巴細(xì)胞增殖，減輕機(jī)體免疫反應(yīng)。CsA已被證實(shí)具有抵抗寄生蟲、促進(jìn)肝細(xì)胞及神經(jīng)元再生和神經(jīng)保護(hù)作用[28]。而CsA的神經(jīng)保護(hù)作用主要是通過(guò)抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)而發(fā)揮[29]。

研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是SCI還是腦損傷，CsA能減少促炎因子、自由基及一氧化氮合酶的產(chǎn)生，同時(shí)也可以抑制小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的活化，減少細(xì)胞凋亡，起到保護(hù)神經(jīng)作用[30-33]。不僅如此，CsA還可維持線粒體內(nèi)Ca2+穩(wěn)態(tài)及膜電位，從而為受損神經(jīng)細(xì)胞提供能量，也可以通過(guò)抑制水通道蛋白-4在神經(jīng)細(xì)胞的表達(dá)來(lái)減輕神經(jīng)細(xì)胞水腫。同時(shí)，CsA不僅能夠降低損傷后血腦屏障的通透性，還能夠抑制天門冬氨酸介導(dǎo)的神經(jīng)毒性。因此，CsA能夠通過(guò)脊髓繼發(fā)性損傷的各個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮其保護(hù)神經(jīng)作用。CsA作為一種臨床常用的免疫抑制劑，主要通過(guò)調(diào)控炎癥反應(yīng)而發(fā)揮各種生物學(xué)效應(yīng)。

炎癥反應(yīng)是把“雙刃劍”，炎癥因子包括兩大類即促炎因子和抗炎因子，促炎因子包括IL-1β，IL-6及TNF-α，而抗炎因子(包括IL-4，IL-10，IL-13，TGF-β)抑制SCI后的繼發(fā)性炎癥反應(yīng)是減輕脊髓繼發(fā)性損傷的重要措施。本研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是SCI后6 h還是傷后1 d，各促炎因子的mRNA表達(dá)水平均升高，促炎因子IL-1β，IL-6及TNF-α表達(dá)水平的升高可使損傷的脊髓出現(xiàn)水腫及局部炎癥反應(yīng)，增加炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，抑制SCI后的神經(jīng)功能恢復(fù)，而且各促炎因子之間可相互作用導(dǎo)致更強(qiáng)烈的的炎癥級(jí)聯(lián)效應(yīng)，加重SCI。CsA為鈣依賴磷酸酶抑制劑，特異性抑制T淋巴細(xì)胞活性，既可抑制宿主細(xì)胞免疫也可抑制體液免疫，CsA進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)形成復(fù)合物與鈣依賴磷酸酶結(jié)合，抑制其活性，因此抑制IL-1β，IL-6及TNF-α等促炎因子的基因轉(zhuǎn)錄，干擾T細(xì)胞活化，抑制IL-1β，IL-6及TNF-α等毒性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。既往的SCI的熱點(diǎn)研究主要集中在軸突的再生及干細(xì)胞的移植等方面，本研究創(chuàng)新運(yùn)用臨床上常見的免疫抑制藥物CsA，取材方便，應(yīng)用CsA能減輕神經(jīng)炎癥反應(yīng)，而不是研究如何消除膠質(zhì)瘢痕、重建脊髓微循環(huán)、重構(gòu)髓鞘等目前尚存爭(zhēng)議的問(wèn)題，取得了預(yù)期的實(shí)驗(yàn)效果。

sham組:假手術(shù)組; CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組; IL：白細(xì)胞介素； TNF-α：腫瘤壞死因子-α；sham組：假手術(shù)組； CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組.圖6 脊髓損傷后6 h各組大鼠IL-1β，IL-6，TNF-α的免疫組織化學(xué)比較Fig 6 6 h after SCI, immunohistochemical comparison of IL-1β,IL-6,TNF-α in rats of each group

sham組:假手術(shù)組; CsA組:環(huán)孢素A治療組; NS組:生理鹽水治療組; IL：白細(xì)胞介素； TNF-α：腫瘤壞死因子-α. A：脊髓損傷后6 h；B：脊髓損傷后1 d. 與sham組比較，+：P<0.05；與CsA組比較，☆：P<0.05.圖7 脊髓損傷后6 h及1 d各組大鼠IL-1β，IL-6及TNF-α的蛋白水平比較Fig 7 6 h and 1 d after SCI, comparison of protein levels of IL-1β,IL-6,TNF-α in rats of each group

與以往的研究比較，本研究發(fā)現(xiàn)，CsA可促進(jìn)SCI大鼠的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)并減輕脊髓組織的進(jìn)一步病理性損傷，通過(guò)SCI面積比較，發(fā)現(xiàn)CsA治療可減輕脊髓的病理?yè)p傷程度；通過(guò)損傷脊髓的促炎因子mRNA水平比較，發(fā)現(xiàn)SCI可誘導(dǎo)大量促炎因子的轉(zhuǎn)錄，且CsA治療可降低SCI后6 h及1 d的髓內(nèi)促炎因子的轉(zhuǎn)錄水平及局部炎癥反應(yīng)。SCI的急性期，在損傷局部確實(shí)存在劇烈的炎癥反應(yīng)，而CsA治療可顯著抑制促炎因子的mRNA表達(dá)及局部炎癥反應(yīng)；通過(guò)損傷脊髓的促炎因子的蛋白水平比較，發(fā)現(xiàn)SCI可誘導(dǎo)大量促炎因子的蛋白表達(dá)，而CsA治療可降低髓內(nèi)促炎因子的蛋白表達(dá)及局部炎癥反應(yīng)；免疫組織化學(xué)的半定量蛋白水平結(jié)果提示，無(wú)論是SCI后6 h還是傷后1 d，各促炎因子的蛋白表達(dá)均升高，這說(shuō)明SCI的急性期在損傷局部存在劇烈的炎癥反應(yīng)，而CsA治療可顯著抑制促炎因子的蛋白表達(dá)及局部炎癥反應(yīng)。CsA治療有利于SCI的恢復(fù)，是一種用于減輕神經(jīng)損傷的切實(shí)可行的治療方法，同時(shí)也探討了CsA對(duì)SCI后炎癥反應(yīng)的影響，發(fā)現(xiàn)CsA可減少損傷局部促炎因子的表達(dá)，從而在中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷后發(fā)揮抗炎及神經(jīng)保護(hù)作用。