■閆冰雪 王煥杰 陳小鴿 黃艷群 陳 文*

（1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)飼料營(yíng)養(yǎng)河南省工程實(shí)驗(yàn)室，河南鄭州 450002；2.河南神農(nóng)膨化飼料科技有限公司，河南鄭州 450121；3.河南省獸藥飼料監(jiān)察所，河南鄭州 450003）

近年來(lái)，殼寡糖在動(dòng)物生產(chǎn)性能、免疫功能、礦物質(zhì)元素吸收和骨骼健康等方面的研究越來(lái)越廣泛。王秀武等[1-2]和李曉晶[3]一致報(bào)道，添加殼寡糖可能通過(guò)增加免疫力，改善腸道菌群和增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收利用率等途徑，可以使肉仔雞體獲得更好的生產(chǎn)性能[2-8]。已有研究表明：殼寡糖能顯著增加肉仔雞胸肌、腿肌中Ca、Zn、Fe元素的含量[1]，仔豬（35 d和70 d）背最長(zhǎng)肌中Cu、心肌中Zn及脾臟中Mn的含量[9]。通過(guò)構(gòu)建大鼠和兔子的骨質(zhì)疏松或骨缺損模型發(fā)現(xiàn)，殼寡糖可通過(guò)增加骨密度骨強(qiáng)度[10]，降低過(guò)高骨轉(zhuǎn)換[11]，促進(jìn)結(jié)締組織再生[12]，促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖[13-14]和調(diào)節(jié)骨愈合相關(guān)基因表達(dá)[15-16]等途徑，促進(jìn)骨缺損修復(fù)，緩解骨質(zhì)疏松癥狀。

綜合文獻(xiàn)報(bào)道，殼寡糖促生產(chǎn)性能的適宜添加量需進(jìn)一步確定，促進(jìn)礦物質(zhì)元素吸收及骨骼健康方面，未見(jiàn)肉仔雞健康骨骼組織的報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加不同劑量殼寡糖對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、屠宰性能、骨骼參數(shù)及鈣磷沉積代謝的影響，以探尋殼寡糖的適宜添加量及促骨骼發(fā)育、鈣磷沉積的效果，為生產(chǎn)實(shí)踐提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取1日齡快大型（AA）白羽肉仔雞公雛90只，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只。參照我國(guó)肉雞營(yíng)養(yǎng)需要推薦標(biāo)準(zhǔn)（ZNY/T33—2004）進(jìn)行基礎(chǔ)飼糧配制（見(jiàn)表1）。對(duì)照組飼喂不添加殼寡糖的基礎(chǔ)飼糧，處理1組和處理2組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加150、300 mg/kg殼寡糖（純度為90.7%）。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期42 d。1～21 d參考NRC（1994）肉小雞標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)；22～42 d參考NRC（1994）肉中雞標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)。每個(gè)重復(fù)單籠飼養(yǎng)，自由采食和飲水，全天連續(xù)光照。每日觀察雞只精神狀態(tài)、采食和飲水情況等。每周消毒兩次。溫度控制和免疫接種按照按正常程序進(jìn)行。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定

每天定時(shí)稱料，記錄每天每個(gè)重復(fù)雞只的總采食量。分別于試驗(yàn)第21 d和第42 d禁食8～12 h后，對(duì)每個(gè)處理組的雞只進(jìn)行整體空腹稱重。根據(jù)初重、末重、每天采食量，計(jì)算各個(gè)階段雞只的總采食量、平均日增重、料重比。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3.2 屠宰性能指標(biāo)測(cè)定

于試驗(yàn)第42 d禁食8～12 h后，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑選1只進(jìn)行空腹稱重和屠宰取樣。稱取半凈膛重、全凈膛重、左側(cè)胸肌重、左側(cè)腿肌重和腹脂重。計(jì)算方法如下：

半凈膛率=半凈膛重/活體重

全凈膛率=全凈膛重/活體重

胸肌率=左側(cè)胸肌重×2/活體重

腿肌率=左側(cè)腿肌重×2/活體重

腹脂率=腹脂重×100/活體重

1.3.3 骨骼參數(shù)指標(biāo)測(cè)定

于試驗(yàn)第21 d和第42 d禁食8～12 h后，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑選1只屠宰并分離右側(cè)脛骨股骨，按如下步驟測(cè)骨骼的重量、長(zhǎng)度、直徑、鈣和磷含量。

①蒸煮并清洗，剔除軟骨、脂肪、肌肉組織。

②乙醇和無(wú)水乙醚分別浸泡48 h脫去骨骼中的脂肪。于100℃烘干12 h，稱取脫脂干骨重（g），并用游標(biāo)卡尺測(cè)量直徑（mm）和長(zhǎng)度（mm）。

③ 灰分測(cè)定：灰化法（GB/T 6438—2007）。

④鈣測(cè)定：乙二胺四乙酸二鈉絡(luò)合滴定法（GB/T 6436—2002）。

⑤ 磷測(cè)定：分光光度法（GB/T 6437—2002）。

1.3.4 血清指標(biāo)測(cè)定

于21 d和42 d，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取1只雞，翅下采血5 ml，2 500 r/min離心分離血清。Ca和P用全自動(dòng)生化分析儀RA-1000（Bayer公司，美國(guó)）檢測(cè)。

鈣測(cè)定：偶氮胂法；

磷測(cè)定：紫外法。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0（one-way ANOVA）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用Duncan's多重比較進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 殼寡糖對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響(見(jiàn)表2)

表2 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，處理2組的1～42 d體增重、1～21 d和1～42 d耗料量均顯著提高，分別比對(duì)照組提高了15.73%（P＜0.05）、15.35%（P＜0.05）和14.19%（P＜0.05）；處理1組各個(gè)階段耗料量和體增重較對(duì)照組無(wú)顯著差異（P＞0.05）；料重比組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2 寡糖對(duì)42 d白羽肉雞屠宰性能的影響(見(jiàn)表3)

由表3可見(jiàn)，處理1組的腿肌率較對(duì)照組提高了5.97%（P＜0.05），半凈膛率、全凈膛率、胸肌率組間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

2.3 殼寡糖對(duì)白羽肉雞骨骼參數(shù)的影響(見(jiàn)表4)

由表4可見(jiàn)，處理2組的42 d肉仔雞的脛骨長(zhǎng)度、股骨干重、股骨長(zhǎng)度較對(duì)照組顯著提高（P＜0.05），各個(gè)處理對(duì)21 d肉仔雞的骨骼參數(shù)影響均不顯著（P＞0.05）。

2.4 殼寡糖對(duì)白羽肉仔雞鈣磷代謝的影響(見(jiàn)表5)

由表5可見(jiàn)，與對(duì)照組和處理1組相比，處理2組21 d肉仔雞的血清P、脛骨鈣顯著增加（P＜0.05），血清磷含量分別比對(duì)照組和處理1組提高了80.88%和46.36%（P＜0.05）；42 d肉仔雞骨骼參數(shù)組間差異不顯著（P＞0.05）。

表4 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對(duì)肉仔雞骨骼參數(shù)的影響

表5 基礎(chǔ)飼糧中添加不同劑量殼寡糖對(duì)肉仔雞鈣磷代謝的影響(%)

3 討論

3.1 殼寡糖對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)顯示，基礎(chǔ)飼糧添加適宜劑量殼寡糖可以提高肉仔雞各個(gè)階段的耗料量和體增重，對(duì)料重比無(wú)顯著影響，這與游金明等[5]和Jung W K等[10]的研究結(jié)果一致。由表2得：基礎(chǔ)飼糧中300 mg/kg的殼寡糖添加量的促進(jìn)效果優(yōu)于150 mg/kg添加量，提示殼寡糖對(duì)生長(zhǎng)性能的促進(jìn)作用具有劑量依賴性，促生長(zhǎng)作用隨添加劑量的增加而增加，這與張麗[8]和王秀武等[1]的研究結(jié)果一致，0、5、25 mg/kg和125 mg/kg四個(gè)殼寡糖組間1、3、5周齡和7周齡的體重均隨著殼寡糖添加量的增加而增加，125 mg/kg的添加劑量取得了最好的終體重。綜合本試驗(yàn)數(shù)據(jù)，300 mg/kg殼寡糖添加量獲得了最佳的促生長(zhǎng)效果。

3.2 殼寡糖對(duì)42 d白羽肉雞屠宰性能的影響

本試驗(yàn)添加殼寡糖對(duì)42 d肉仔雞的半凈膛率、全凈膛率，胸肌率均無(wú)顯著影響的結(jié)果與黎秋平等[17]的報(bào)道一致，然而黎秋平等報(bào)道顯示0.75%殼寡糖能降低麒麟雞腿肌率，而本試驗(yàn)卻得出了150 mg/kg殼寡糖組顯著提高42 d肉仔雞腿肌率而300 mg/kg殼寡糖組不影響42 d肉仔雞腿肌率的結(jié)論，由此推測(cè)殼寡糖對(duì)腿肌率的影響具有劑量依賴性且呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。本試驗(yàn)中，150 mg/kg和300 mg/kg殼寡糖對(duì)42 d肉仔雞腹脂率的影響均不顯著，不符合之前報(bào)道的殼寡糖能有效的降低動(dòng)物體脂沉積的結(jié)論[18-22]，其機(jī)理值得進(jìn)一步研究。

3.3 殼寡糖對(duì)白羽肉雞骨骼參數(shù)的影響

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，基礎(chǔ)飼糧中添加300 mg/kg殼寡糖，兩個(gè)日齡的脛骨參數(shù)均提高，其中42 d脛骨長(zhǎng)度顯著增加；對(duì)股骨參數(shù)，添加300 mg/kg殼寡糖顯著增加42 d肉仔雞的股骨重和長(zhǎng)度、股骨直徑和灰分含量也有增加趨勢(shì)；添加不同水平的殼寡糖對(duì)前期（1～21 d）股骨參數(shù)影響不顯著。綜合本試驗(yàn)的數(shù)據(jù)可以推測(cè)：①殼寡糖具有促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)的作用且具有劑量依賴性，效果較好的為300 mg/kg殼寡糖組；②殼寡糖對(duì)骨骼生長(zhǎng)的促進(jìn)作用具有組織差異性，本試驗(yàn)中添加殼寡糖對(duì)脛骨的促進(jìn)作用優(yōu)于股骨。③殼寡糖對(duì)骨骼的促進(jìn)作用具有日齡差異性，對(duì)脛骨的促進(jìn)作用體現(xiàn)在全期（1～21 d、22～42 d），對(duì)股骨的促進(jìn)作用主要是后期（22～42 d）。本試驗(yàn)的結(jié)論部分符合了關(guān)于非消化寡糖對(duì)骨骼健康的促進(jìn)效果與其添加劑量、動(dòng)物年齡、絕經(jīng)情況、鈣質(zhì)吸收能力相關(guān)的報(bào)道[23-24]。推測(cè)本試驗(yàn)中殼寡糖促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)的途徑可能是促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖[13-14]、影響骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）形成[15]、調(diào)節(jié)RUNX2mRNA[16]和胞骨鈣素mRNA等基因的表達(dá)等。

3.4 殼寡糖對(duì)白羽肉雞鈣磷代謝的影響

添加益生素如非消化寡糖對(duì)機(jī)體鈣質(zhì)沉積的促進(jìn)作用受動(dòng)物年齡因素影響較大[23]，對(duì)幼齡動(dòng)物影響相對(duì)明顯，而對(duì)青年或成年動(dòng)物影響較小。本試驗(yàn)中，21 d肉仔雞的的脛骨磷含量、股骨鈣磷含量變化趨勢(shì)與血清鈣磷的變化趨勢(shì)一致，吻合了金黎明和揚(yáng)志宏等的報(bào)道[25-26]，42 d的骨骼鈣磷含量與血清鈣磷含量沒(méi)有一定的對(duì)應(yīng)性。1～21 d肉仔雞骨骼正處于生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期，屬于鈣磷缺乏期，需要獲取大量鈣磷以滿足骨骼生長(zhǎng)發(fā)育的需要，所以其主要來(lái)源血清鈣磷含量的變化會(huì)直接影響骨骼中鈣磷含量；22～42 d肉仔雞的骨骼發(fā)育已經(jīng)成熟，鈣庫(kù)處于飽和狀態(tài)，其鈣磷含量處于動(dòng)態(tài)平衡中，血清鈣磷的變化對(duì)骨骼鈣磷的影響較小，所以本試驗(yàn)42 d血清鈣磷含量和42 d骨骼中鈣磷含量的變化趨勢(shì)沒(méi)有較好的關(guān)聯(lián)性。

4 結(jié)論

①殼寡糖對(duì)生長(zhǎng)性能的促進(jìn)作用與添加劑量呈正相關(guān)，300 mg/kg添加量效果較好。

②添加殼寡糖可改善42 d肉仔雞的屠宰性狀。

③殼寡糖對(duì)骨骼生長(zhǎng)的促進(jìn)作用具有劑量、骨骼類型和日齡差異性，300 mg/kg添加量效果較好。

④殼寡糖可以促進(jìn)機(jī)體鈣磷沉積，其促進(jìn)作用具有日齡差異性。

基礎(chǔ)飼糧中添加300 mg/kg殼寡糖可以顯著提高肉仔雞生長(zhǎng)性能，對(duì)骨骼發(fā)育和鈣磷沉積代謝也有一定促進(jìn)作用。