潘懿 黃筱玉耀賢 言天久 蒙振畝 韋文飛 .百色市畜禽品種改良技術(shù)推廣站

2.田林縣八渡瑤族鄉(xiāng)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站

3.百色市畜牧技術(shù)推廣站

4.百色市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

2011年至2017年，百色市縣13個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參與廣西全區(qū)檢測(cè)能力比對(duì)29次，盲樣比對(duì)正確率92.0%，平行盲樣準(zhǔn)確率97.7%。實(shí)驗(yàn)室年度檢測(cè)能力（除2012年外）水平波動(dòng)不顯著（P＞0.05），半定量檢測(cè)項(xiàng)目市本級(jí)與縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力水平差異性不顯著(P＞0.05)。表明了百色市13個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理到位，檢測(cè)操作規(guī)范，隨機(jī)誤差率低，檢測(cè)系統(tǒng)穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)能力均衡，能滿(mǎn)足動(dòng)物疫病防控工作需要。

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)是評(píng)估獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理水平和能力技能技術(shù)能力的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力提高具有重要現(xiàn)實(shí)意義。2010年農(nóng)業(yè)部印發(fā)了《獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室考核工作實(shí)施方案》〔1〕，明確要求每年組織開(kāi)展一次實(shí)驗(yàn)室比對(duì)實(shí)驗(yàn)。百色市13個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室每年有組織有計(jì)劃的參與了全區(qū)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)。

一、比對(duì)項(xiàng)目、試劑、材料、方法與標(biāo)準(zhǔn)

1.比對(duì)項(xiàng)目。2011年至2017年參加實(shí)驗(yàn)室比對(duì)項(xiàng)目縣級(jí)以血清學(xué)檢測(cè)比對(duì)為主，共12項(xiàng)；市級(jí)比對(duì)項(xiàng)目涵蓋血清學(xué)檢測(cè)和病原檢測(cè)，共16項(xiàng)（項(xiàng)目清單略）。

2.比對(duì)試劑。由廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供統(tǒng)一采購(gòu)、分發(fā)，冷藏保存運(yùn)輸，1%雞血紅球由各個(gè)實(shí)驗(yàn)室自備。

3.比對(duì)樣品。比對(duì)盲樣的選擇、制備、分裝和編號(hào)全部由廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一提供，運(yùn)輸過(guò)程按照樣品冷藏保存運(yùn)輸。

4.比對(duì)檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)。各年度比對(duì)項(xiàng)目的不盡同，比對(duì)項(xiàng)目檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)先推薦國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家參考實(shí)驗(yàn)室的方法，無(wú)相關(guān)檢測(cè)方法的項(xiàng)目按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

二、標(biāo)準(zhǔn)評(píng)判

1.半量檢測(cè)項(xiàng)目 H5-AI Ab、H7-AI Ab、ND Ab、HCV Ab（正向間接血凝試驗(yàn)）的檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：比對(duì)值與參考值完全一致判為準(zhǔn)確；比對(duì)值與參考值的誤差不超過(guò)上下1個(gè)滴度，判為正確。布病抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：布魯氏菌病試管凝集試驗(yàn)（SAT）檢測(cè)結(jié)果與參考值完全一致或者低于參考值一個(gè)“+”的，評(píng)判為正確。

2.其他檢測(cè)項(xiàng)目按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)家參考實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或說(shuō)明書(shū)標(biāo)準(zhǔn)判定。

三、結(jié)果

1.百色市實(shí)驗(yàn)室比對(duì)總體結(jié)果。根據(jù)比對(duì)結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，百色市13個(gè)參加比對(duì)實(shí)驗(yàn)室7年盲樣比對(duì)結(jié)果總體正確率見(jiàn)表1。將2011年至2017年獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室年度間正確率進(jìn)行差異性比較，2012年與2011年、2013至2017年｜u｜＞2.58，p＜0.01，差異性顯著，其它年度間差異性不顯著（P＞0.05）。百色市5個(gè)半定量檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，盲樣比對(duì)總數(shù)正確率：81.2.0%，2011年至2017年盲樣比對(duì)正確率分別為：93.9%、54.3%、69.4%、91.0%、94.4%、100%、100%。

2.市本級(jí)年度盲樣比對(duì)總體結(jié)果。百色市市本級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室自2011年至2017年參加比對(duì)實(shí)驗(yàn)的盲樣比對(duì)總體正確率為92.3%，2011至2017年確率分別為：100%、63.2%、100%、90.4%、100%、100%、100%。2012年盲樣檢測(cè)結(jié)果正確率最低為63.2%。2012年百色市市級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)檢測(cè)結(jié)果偏差集中在ND Ab盲樣檢測(cè)項(xiàng)目，2012年廣西自治區(qū)提供給百色市ND Ab盲樣5份，設(shè)置兩組平行盲樣，檢測(cè)結(jié)果5份盲樣比對(duì)值整體與參考值低2個(gè)滴度，見(jiàn)圖1。據(jù)桂疫控（報(bào)）〔2012〕83號(hào)附件3統(tǒng)計(jì)，2012年廣西區(qū)14個(gè)地市級(jí)實(shí)驗(yàn)室參與比對(duì)盲樣總體準(zhǔn)確率占7.1%，比對(duì)值高于參考值盲樣數(shù)占2.86%，比對(duì)值低于參考值盲樣數(shù)占90%，廣西區(qū)14個(gè)地市2012年ND Ab檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果離散，見(jiàn)圖2。百色市市本級(jí)實(shí)驗(yàn)室編號(hào)10，平行盲樣離散度為0，見(jiàn)圖2。

3.百色市縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)項(xiàng)目檢測(cè)總體結(jié)果。百色市12個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室自2011年至2017年有計(jì)劃的參加全區(qū)開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，比對(duì)結(jié)果總體正確率為91.7%，2011年至2017年比對(duì)檢測(cè)結(jié)果正確率分別 為：93.3%、70.0%、97.1%、89.7%、92.9%、100%、100%。

4.百色市市本級(jí)與縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室半定量檢測(cè)項(xiàng)目年度比對(duì)結(jié)果差異性。2011年至2017年半定量檢測(cè)項(xiàng)目市本級(jí)與縣級(jí)比對(duì)總體正確率進(jìn)行差異性比對(duì)，結(jié)果差異不顯著（p＞0.05）。

四、分析與討論

1.百色市13個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室均具備了較強(qiáng)的檢測(cè)能力水平。百色市市本級(jí)和那坡縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室是廣西地市級(jí)和縣級(jí)首個(gè)通過(guò)農(nóng)業(yè)部認(rèn)證的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。自2011年至2017年，市、縣實(shí)驗(yàn)室有計(jì)劃參與能力比對(duì)29次，參與了16個(gè)項(xiàng)目比對(duì)，其中血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目12項(xiàng)，病原學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目4項(xiàng)。共檢測(cè)比對(duì)盲樣364份，335份盲樣檢測(cè)結(jié)果正確，正確率92.0%，設(shè)置的平行盲樣85份，準(zhǔn)確率97.7%。全市2011年至2017年比對(duì)結(jié)果進(jìn)行年度差異性對(duì)比，除了2012年外，各年度之間的差異性不顯著（P＞0.05），2016年、2017年比對(duì)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果正確率穩(wěn)步提高至100%。說(shuō)明百色市13個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室2010年以來(lái)嚴(yán)格按照《檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》、實(shí)驗(yàn)室體系文件和各種動(dòng)物疫病檢測(cè)規(guī)程規(guī)定執(zhí)行，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力水平整體穩(wěn)定，檢測(cè)能力水平逐年提高，具備了較強(qiáng)的檢測(cè)能力水平，能滿(mǎn)足當(dāng)前動(dòng)物疫病防控的需要。

2. 2012年ND Ab檢測(cè)比對(duì)實(shí)驗(yàn)比對(duì)效果不理想。2012年百色市市本級(jí)檢測(cè)ND Ab盲樣5份，其中平行盲樣2份，比對(duì)檢測(cè)設(shè)置的陰陽(yáng)性對(duì)照成立，平行盲樣檢測(cè)結(jié)果完全一致（離散度為0），具體結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。說(shuō)明比對(duì)提供的新城疫抗原不存在質(zhì)量問(wèn)題，檢測(cè)操作過(guò)程不存在隨機(jī)誤差。由此推斷，引起百色市ND Ab比對(duì)直比參考值低2個(gè)滴度可能有以下原因：一是實(shí)驗(yàn)室自行配置的1%雞血紅細(xì)胞濃度偏高。從14個(gè)地市的檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，比對(duì)值低于參考值的盲樣份數(shù)占90%，說(shuō)明百色市檢測(cè)ND Ab過(guò)程中配制的1%雞血紅細(xì)胞濃度偏高造成誤差的可能性很??；二是檢測(cè)盲樣存在質(zhì)量問(wèn)題。盲樣因保存不當(dāng)或者其它原因?qū)е旅涌贵w水平下降，直接影響了盲樣檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，致使ND Ab比對(duì)結(jié)果出現(xiàn)偏差，從14個(gè)地市檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)來(lái)看，這種可能性不能排除；三是參考值偏高。所提供的參考值數(shù)據(jù)偏高，引起90%盲樣檢測(cè)結(jié)果比對(duì)值比參考值低。

表1 百色市2011年至2017年實(shí)驗(yàn)室比對(duì)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)總表

圖2 廣西區(qū)14個(gè)地市2012年ND Ab檢測(cè)結(jié)果離散圖

3.少數(shù)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)穩(wěn)定性有待加強(qiáng)。2011年以來(lái)，百色市13個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室共參與了29次比對(duì)，2013年有2個(gè)實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)了平行盲樣檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。2012年全區(qū)比對(duì)ND Ab項(xiàng)目中設(shè)置了平行盲樣，結(jié)果全區(qū)14個(gè)地市中有5地市個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差，具體結(jié)果見(jiàn)圖2。說(shuō)明百色市、縣和全區(qū)14個(gè)地市少數(shù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過(guò)依然程存在隨機(jī)誤差，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)系統(tǒng)培訓(xùn)、強(qiáng)化實(shí)操、反復(fù)比對(duì)，提高檢測(cè)系統(tǒng)穩(wěn)定性。

4.半定量檢測(cè)的難度高于定性檢測(cè)。百色市2011年至2017年實(shí)驗(yàn)室比對(duì)項(xiàng)目總體檢測(cè)結(jié)果和百色市5個(gè)半定量檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，半定量檢測(cè)項(xiàng)目正確率低于總體檢測(cè)項(xiàng)目正確率。表明了半定量檢測(cè)的技術(shù)難度要高于定性檢測(cè)。2014年百色市市本級(jí)參與的布病比對(duì)試驗(yàn)，2份盲樣檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。布病結(jié)果判定為肉眼感觀判定的半定量檢測(cè)項(xiàng)目，盲樣比對(duì)檢測(cè)過(guò)程中，盲樣沉降和比濁管比對(duì)結(jié)果位于兩個(gè)對(duì)比對(duì)濃度之間，根據(jù)盲樣虎紅平板試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性結(jié)合疫病防控角度，檢測(cè)者判定偏向高濃度判定。然從比對(duì)角度來(lái)思考，認(rèn)為盲樣經(jīng)解凍、分裝、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)會(huì)致抗體濃度下降，結(jié)果判定應(yīng)偏向低濃度。思維導(dǎo)向不同導(dǎo)致比對(duì)結(jié)果判定出現(xiàn)偏差。定性檢測(cè)項(xiàng)目方面，自2011年來(lái)市本級(jí)比對(duì)結(jié)果全部準(zhǔn)確，說(shuō)明了半定量檢測(cè)的難度高于定性檢測(cè)。事實(shí)證明半定量檢測(cè)項(xiàng)目是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的薄弱環(huán)節(jié)，各級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)半定量檢測(cè)項(xiàng)目培訓(xùn)，強(qiáng)化理論水平，提升操作技能，實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)和溝通交流，提高項(xiàng)目檢測(cè)的穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性。

5.百色市半定量檢測(cè)能力水平各獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室間比較均衡（差異性不顯著）。根據(jù)各年度檢測(cè)結(jié)果正確率比對(duì)，百色市市本級(jí)與縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力差異性不顯著（P＞0.05），表明百色市縣兩級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室對(duì)半定量檢測(cè)項(xiàng)目非常重視，檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)到位，各實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力相對(duì)比較均衡。