張丹參 王非凡

河北科技大學(xué)，石家莊，050018，中國(guó)

肺水腫是指肺毛細(xì)血管內(nèi)液體滲入肺間質(zhì)和肺泡，使肺血管外液量增多的病理狀態(tài)。急性肺水腫的臨床表現(xiàn)為突然發(fā)病、呼吸困難、紫紺、咳嗽、咳無(wú)色或粉紅色泡沫，肺有彌漫性濕啰音，重者因呼吸衰竭而死亡，X線檢查表現(xiàn)呈兩肺蝶形模糊陰影，是呼吸系統(tǒng)臨床急癥之一［1］。引起肺水腫的原因雖然各種各樣，但大多數(shù)是由于肺毛細(xì)血管壁通透性增加或毛細(xì)血管內(nèi)血壓升高所致。肺水腫動(dòng)物模型的復(fù)制，常采用注射一定的化學(xué)物質(zhì)（如硝酸銀、氯化銨）或吸入一定量的化學(xué)毒氣（如氯氣、雙光氣）等方法。肺水腫的典型表現(xiàn)有呼吸急促、呼吸困難，聽(tīng)診有濕啰音，氣管插管口有粉紅色泡沫痰溢出。

1 誘發(fā)肺水腫動(dòng)物模型方法

1.1 氯氣吸入法致肺水腫模型

小鼠體重25 g 左右，用1 g 重鉻酸鉀加5 mL 濃氯化氫，使瓶中生成薄薄一層云霧狀氣體后，將動(dòng)物投于瓶中，小鼠吸入氯氣而致肺水腫。

高濃度的氯氣可引起嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)損傷。關(guān)于氯氣的致傷機(jī)制目前主要認(rèn)為是氯氣與呼吸道黏膜接觸后發(fā)生如下反應(yīng)：Cl2+H2O→HOCl+HCl。其中HOCl是主要的致傷物質(zhì)，可引起黏膜上皮細(xì)胞和肺泡上皮的壞死脫落，且可直接導(dǎo)致肺微血管通透性增加。此外，HCl 也可使肺泡微血管對(duì)蛋白質(zhì)的通透性增加［2］。

1.1.1 小鼠氯氣吸入法致肺水腫模型

張洪偉等［2］建立了鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型，取小白鼠一只，稱體質(zhì)量，計(jì)數(shù)呼吸頻率及觀察呼吸深度。將鼠放入廣口瓶中慢慢通入氯氣，待瓶中生成一層薄薄云霧狀氣體后中止通氣。觀察動(dòng)物一般表現(xiàn)及呼吸變化。動(dòng)物死后即解剖，切開(kāi)胸腔觀察肺組織變化，然后用線結(jié)扎氣管下端，在結(jié)扎的上端剪斷氣管取出全肺，清除肺周圍的其他組織。將肺放在玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)，用紙吸去其外表水分，稱取肺的質(zhì)量，計(jì)算肺占體重的百分?jǐn)?shù)，與正常動(dòng)物對(duì)照［2］。

1.2 甲醛吸入法致肺水腫模型

通過(guò)自制封閉裝置，連續(xù)通氣促進(jìn)甲醛揮發(fā)并結(jié)合間歇噴霧，給大鼠持續(xù)吸 入高濃度甲醛揮發(fā)氣體制作肺水腫動(dòng)物模型［3］。

甲醛吸入致大鼠急性肺水腫動(dòng)物模型的制作關(guān)鍵在幾個(gè)方面：即控制好甲醛濃度、染毒溫度、染毒時(shí)間和鼠均吸毒流量以及動(dòng)物年齡等，若甲醛濃度過(guò)低，如染毒裝置敞開(kāi)或染毒空間小而鼠密度過(guò)大，染毒需要時(shí)間延長(zhǎng)且效果不理想［4］；相反，如果一次放入大鼠數(shù)量過(guò)少，導(dǎo)致鼠均吸入毒氣濃度高流量過(guò)大，除非縮短染毒時(shí)間，否則動(dòng)物肺水腫嚴(yán)重，死亡率增高。如果溫度過(guò)高，如35℃，則動(dòng)物易中毒且較深，溫度低如 18～20℃則中毒較溫和。染毒時(shí)間則與中毒成正相關(guān)，時(shí)間長(zhǎng)染毒深。成年鼠或許比未成年鼠更能耐受。以上各因素恰當(dāng)搭配，才能做出理想的動(dòng)物模型［5］。

1.2.1 大鼠甲醛吸入法致肺水腫模型

梁志鋒等［5］建立了鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。大鼠按隨機(jī)數(shù)字表分對(duì)照組（10只）和甲醛組（14只）。稱量，標(biāo)記，裝入大鼠籠中，置于染毒箱正中，啟動(dòng)加氧泵并蓋好箱蓋，動(dòng)物出現(xiàn)明顯癥狀時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，讓大鼠在箱內(nèi)連續(xù)吸入甲醛染毒素2 h，密切觀察大鼠的一般反應(yīng)情況并記錄，期間每隔 25～30 min 給箱內(nèi)噴入霧化甲醛1次，每次約10 mL 。染毒結(jié)束后取出大鼠，放室外通風(fēng)處，禁食不禁水，過(guò)5 h 后大鼠 頸椎脫臼處死，稱體質(zhì)量及心臟和肺臟濕質(zhì)量，計(jì)算心肺系數(shù)、肺指數(shù)［6］。

1.3 雙光氣吸入致肺水腫模型

將12 mg·L-1雙光氣滴在濾紙上，干后放入密閉容器內(nèi)，將小鼠置于容器內(nèi)15 min，即可形成肺水腫，全部操作應(yīng)在通風(fēng)櫥進(jìn)行數(shù)［7］。

雙光氣主要作用于呼吸器官，認(rèn)為是刺激呼吸道感受器，通過(guò)迷走神經(jīng)將沖動(dòng)傳入四疊體以下中樞，再通過(guò)交感神經(jīng)將沖動(dòng)傳至肺血管，使其通透性增高，而發(fā)生肺水腫。

1.3.1 大鼠雙光氣吸入法致肺水腫模型

劉瑞等［5］建立了鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。小鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量為18～23 g，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、光氣染毒劑量32、39、46、53 mg·L-1組，每組小鼠各10只。正常對(duì)照組小鼠放入動(dòng)態(tài)染毒柜中 5 min，染毒組小鼠放入染毒柜中，分別給予 32、39、46 和53 mg·L-1的光氣，染毒 5 min［8］。

指標(biāo)測(cè)定染毒后4 h 斷頭取血，分離血清，測(cè)定血清丙二醛（malonic dialdehyde，MDA）含量。取肺臟，稱量肺臟濕重，放入75℃ 烤箱烘烤 24 h，直至恒重，稱量肺臟干重，計(jì)算肺臟濕干比。取肝臟，左下葉用體積分?jǐn)?shù)為 4%的甲醛固定HE 染色；其余肝臟加生理鹽水制成1∶5 的勻漿液，3 000 g 離心 10 min，取上清測(cè)定 MDA 含量、總超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase，T-SOD）活力。血清和肝勻漿MDA 含量測(cè)定，采用改進(jìn)的硫代巴比妥酸熒光法，T-SOD 活力測(cè)定，采用改良鹽酸羥胺法［9］。

1.4 氯化銨中毒致肺水腫模型

動(dòng)物選大鼠、小鼠、豚鼠，分別于腹腔注射氯化銨0.6 mL·100g-1（大鼠）、0.15 mL·10 g-1（小鼠）和0.5～0.7 mL·kg-1（豚鼠），使其藥液濃度分別達(dá)6%，3%，6%［10］。

氯化銨中毒性肺水腫，認(rèn)為是通過(guò)神經(jīng)系統(tǒng)選擇性地對(duì)肺毛細(xì)血管起作用，使毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加，而致肺水腫。

1.4.1 大鼠氯化銨中毒致肺水腫模型

薛敬禮等［10］建立了鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。稱重實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射6%氯化銨，然后觀察一般情況和呼吸，存活時(shí)間。對(duì)照組不作任何處理，對(duì)動(dòng)物實(shí)行安樂(lè)死。解剖，先結(jié)扎氣管以免液體外溢，將肺和心臟一起取出，剪除心臟和其它脂肪組織，用濾紙吸去肺表面的液體，用天平稱兩肺質(zhì)量，計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)，若肺質(zhì)量系數(shù)＞1%，證明肺水腫已形成［10］。

1.5 快速生理鹽水輸液致肺水腫模型

家兔或犬，靜脈快速輸入大量生理鹽水，按每分鐘40 mL·kg-1注入動(dòng)物全血量1～1.5 倍時(shí)即可發(fā)生肺水腫［11］。

在大量快速輸液基礎(chǔ)上，輸注腎上腺素，可引起外周血管廣泛收縮，導(dǎo)致血液由體循環(huán)急速轉(zhuǎn)移到肺循環(huán)，加之毛細(xì)血管通透性增高，未能為左心所代償，結(jié)果使左心房壓力和肺毛細(xì)血管流體靜壓突然升高，液體進(jìn)入肺泡及間質(zhì)增多，影響肺呼吸功能，而出現(xiàn)肺水腫。

1.5.1 家兔快速輸液致肺水腫模型

陳德森等［9］建立了家兔的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。稱重家兔2%普魯卡因局部麻醉，將動(dòng)物仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈以備取血，用BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄心率及呼吸頻率。注入生理鹽水（10 mL·kg-1），迷走神經(jīng)組切斷家兔頸部?jī)蓚?cè)迷走神經(jīng)。各組動(dòng)物以出現(xiàn)進(jìn)行性呼吸困難、發(fā)紺、鼻溢出粉紅色泡沫樣痰，可聞及濕性啰音并逐漸增強(qiáng)為建模成功［13］。

1.5.2 家養(yǎng)鴨快速輸液致肺水腫模型

鄒亞超等［1］建立了家鴨的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。準(zhǔn)確稱重后將鴨仰臥固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上，1%普魯卡因局麻下切頸前皮膚，分離和插管氣管、一側(cè)動(dòng)脈和另一側(cè)靜脈。記錄正常的呼吸，血壓和肺部呼吸音。按160 mL·kg-1輸入37℃生理鹽水，輸液濃度150～180 滴·min-1，當(dāng)輸液達(dá)總量2/3 時(shí)，注入腎上腺素0.5 mL·kg-1，觀察呼吸，血壓和肺部呼吸音的變化。當(dāng)肺部出現(xiàn)濕性羅音和氣管插管出現(xiàn)粉紅分泡沫溢液時(shí)，證明動(dòng)物出現(xiàn)急性肺水腫。剪開(kāi)胸前壁、結(jié)扎氣管取出肺，準(zhǔn)確稱取肺重量，計(jì)算肺系數(shù)［1］。

1.5.3 貓快速輸液致肺水腫模型

何建宇等［14］建立了家貓的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型?？焖佥斠褐滦乃ツＰ驮炷＃杭邑堃?0% 烏拉坦1.2 mg·kg-1腹腔麻醉，仰臥手術(shù)臺(tái)固定。分離氣管及頸總動(dòng)脈，分別行氣管及頸總動(dòng)脈插管。氣管插管連接HX-200 動(dòng)物呼吸機(jī)機(jī)械通氣，頸總動(dòng)脈插管連接YH-4 型生理壓力傳感器，將換能器信號(hào)輸入微機(jī)BL-420 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。沿胸骨中線打開(kāi)胸腔，剪開(kāi)心包，暴露心臟。縫制心包床后，再將一內(nèi)徑約0.20 cm的心室導(dǎo)管插入左心室，連接YH-4 型生理壓力傳感器，測(cè)量左室內(nèi)壓（left ventricular pressure，LVP），將LVP 信號(hào)輸入微機(jī)BL-420 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，測(cè)定左室舒張末期壓（left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP）。同時(shí)，對(duì)LVP 上升速度進(jìn)行微分計(jì)算，得到±dp/dtmax。動(dòng)物麻醉開(kāi)胸后，股靜脈給予生理鹽水20 mL·h-1以補(bǔ)充血容量。淘汰LVEDP＞1.6 kPa 者。待血流動(dòng)力學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)穩(wěn)定30 min 后，描記一段正常圖形和各種指標(biāo)的數(shù)值作為基礎(chǔ)值。先靜脈快速輸入生理鹽水250～300 mL，至LVEDP 達(dá)到或超過(guò)造模前值的150%并穩(wěn)定 30 min 后，確定為急性肺水腫模型造模成功［14］。

1.6 高滲葡萄糖輸注致肺水腫模型

動(dòng)物麻醉后，氣管插管，抬高固定臺(tái)頭端成30°角，保持氣管位于正中位，10%葡萄糖（1 mL·kg-1），將針頭插入氣管插管分叉處，在5 min 內(nèi)緩慢勻速地將葡萄糖液滴入氣管內(nèi)，以造成滲透性肺水腫。

大量快速輸液時(shí)，血容量明顯增加，血液稀釋而致血管內(nèi)流體靜壓上升，膠體滲透壓下降，有利于水腫的發(fā)生。

1.6.1 犬高滲葡萄糖輸注致肺水腫模型

本地犬6只，雌雄各半，2月齡，體質(zhì)量（3±0.5）kg，將葡萄糖氯化鈉注射液按每千克體質(zhì)量100 mL 靜脈滴注，速度控制在 60 滴·min-1，對(duì)犬心率和呼吸音進(jìn)行監(jiān)測(cè)。待兩肺區(qū)濕啰音出現(xiàn)后，Xray 胸片檢查，觀察雙肺野陰影大小和程度。病理模型成功復(fù)制 后采用藥物進(jìn)行對(duì)癥治療，觀察動(dòng)物的各種表現(xiàn)并做好相關(guān)記錄。

1.7 腎上腺素靜脈輸注致肺水腫模型

沿家兔耳緣靜脈注入1∶5 000 腎上腺素0.4～0.6 mg·kg-1；或在快速輸入大量生理鹽水后，將0.1%腎上腺素0.5 mg·kg-1用生理鹽水稀釋10 倍后加入輸液瓶中，繼續(xù)滴注，可造成肺水腫［15］。

腎上腺素復(fù)制肺水腫模型簡(jiǎn)單、易操作、臨床癥狀典型，經(jīng)濟(jì)易行且重復(fù)性好，有關(guān)檢測(cè)指標(biāo)的變化充分體現(xiàn)了該型肺水腫的許多臨床特點(diǎn)。在注入后5 min可聽(tīng)及濕啰音，30 min 后即出現(xiàn)粉紅色樣痰，所測(cè)得的肺系數(shù)大于正常值約3倍左右。

1.7.1 大鼠腎上腺素靜脈輸注致肺水腫模型

薛敬禮等［10］建立了大鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。大鼠稱質(zhì)量后，用20%烏拉坦（5 mL·kg-1）腹腔注射麻醉或1%戊巴比妥鈉5 mL·kg-1肌肉注射麻醉，背位固定，做頸部正中縱切口（長(zhǎng)2 cm），分離氣管、左側(cè)頸總動(dòng)脈及右側(cè)頸淺靜脈。插入氣管插管固定，然后將其的一端與壓力換能器相連并連接在微機(jī)記錄系統(tǒng)，描記呼吸曲線。

結(jié)扎頸淺靜脈遠(yuǎn)心端，在近心端插入靜脈插管（內(nèi)充0.1%的肝素化生理鹽水）結(jié)扎固定，注入0.5%肝素（0.01 mL·kg-1）抗凝。結(jié)扎頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)心端，動(dòng)脈夾夾閉近心端，插入充滿0.1%肝素的動(dòng)脈插管結(jié)扎固定，將動(dòng)脈插管經(jīng)壓力換能器連于記錄儀或微機(jī)系統(tǒng)上，記錄一段正常血壓曲線。經(jīng)頸淺靜脈推注0.01%的腎上腺素（0.1 mL·100 g-1），觀察動(dòng)物的表現(xiàn)及存活時(shí)間。動(dòng)物死亡或處死后，同上取出肺臟，稱重并計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)［10］。

1.7.2 家兔腎上腺素靜脈輸注致肺水腫模型

李燦等［15］建立了家兔的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。家兔稱重后耳緣靜脈注入20%烏拉坦（5 mL·kg-1）麻醉，背位固定，在頸部正中做長(zhǎng)6 cm 的縱切口，鈍性分離氣管和一側(cè)的頸淺靜脈。氣管插管用粗棉線結(jié)扎固定，然后將其一端與壓力換能器相連并連接在微機(jī)記錄系統(tǒng)上，描記呼吸曲線［15］。

結(jié)扎頸淺靜脈遠(yuǎn)心端，在近心端插入連有輸液裝置的靜脈插管，打開(kāi)輸液裝置檢查是否通暢，然后將輸液滴數(shù)調(diào)到每分鐘10～15 滴，以防止血液凝固，觀察并描記正常呼吸曲線。

輸入生理鹽水100 mL·kg-1，輸液速度控制在每分鐘150～180 滴，輸完后，將0.1%腎上腺素0.5 mg·kg-1用生理鹽水稀釋10 倍后加入輸液瓶中，繼續(xù)滴注。腎上腺素輸完后，可給少量生理鹽水，以每分鐘10～15 滴速度維持通道，以便必要時(shí)第二次給藥。

當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)肺水腫典型表現(xiàn)時(shí)，用止血鉗夾閉氣管，剪開(kāi)胸前壁，然后用粗棉線在氣管分叉處結(jié)扎，防止水腫液溢出，小心分離心臟和血管，將肺取出，用濾紙吸干肺表面水分后，準(zhǔn)確稱取肺質(zhì)量，計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)。

1.8 油酸致肺水腫模型

家兔耳緣靜脈注射油酸0.08 mL·kg-1，30 min 出現(xiàn)氣促、唇舌發(fā)紺，1 h 后即可發(fā)生肺水腫。

油酸復(fù)制肺水腫模型方法簡(jiǎn)便、成功率高。但劑量小，癥狀不典型；大劑量，癥狀典型，但治療效果差，且病因與臨床差距甚遠(yuǎn)［16］。

1.8.1 大鼠油酸靜脈注射致肺水腫模型

張青峰等［17］建立了大鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。將試驗(yàn)動(dòng)物大鼠隨機(jī)分成 2組，A組8只，B組12只。A組為正常對(duì)照組，不作任何處理；B組（試驗(yàn)組）為油酸致傷組，稱質(zhì)量，并沿大鼠尾靜脈注射油酸0.2 mL·kg-1，推注后觀察大鼠呼吸頻率、濕啰音、咳血、身體抽搐等體征變化出現(xiàn)的時(shí)間，并與 A組進(jìn)行比較。1.5 h 后處死，A組動(dòng)物也在同一時(shí)間處死。解剖時(shí)，先結(jié)扎氣管以免液體外溢，然后將肺和心臟一起取出，剪除心臟和脂肪組織，并用濾紙吸去肺表面的液體，最后用天平分別稱量 A、B組大鼠的肺質(zhì)量，計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)，若肺質(zhì)量系數(shù)＞1%，證明肺水腫形成［17］。

1.8.2 家兔油酸靜脈注射致肺水腫模型

李燦等［15］建立了家兔的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。稱重，用25%烏拉坦100 mg·kg-1耳緣靜脈注射麻醉家兔，固定手術(shù)臺(tái)上。剪去頸部被毛，分離氣管，行氣管插管術(shù)。沿家兔耳緣靜脈注入油酸0.08 mL·kg-1，對(duì)照組不作任何處理。觀察家兔的呼吸及一般情況改變，通過(guò)計(jì)算機(jī)生物信號(hào)分析記錄系統(tǒng)描記呼吸曲線。若呼吸曲線明顯變淺變快或氣管內(nèi)涌出粉紅色泡沫樣液體，則提示肺水腫已形成，記錄肺水腫形成的時(shí)間。如有家兔死亡，記錄死亡時(shí)間。放血處死家兔，取氣管—支氣管—肺。用粗線自氣管下方結(jié)扎氣管，自上而下打開(kāi)胸腔，將肺和心臟一起取出，剪去心臟，用濾紙吸去肺表現(xiàn)的水分，天平稱兩肺質(zhì)量，計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)，若肺質(zhì)量系數(shù)＞5.0，證明肺水腫已形成［18］。

1.8.3 小型豬油酸靜脈注射致肺水腫模型

趙進(jìn)等［19］建立了小型豬的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成 2組。A組為正常對(duì)照組，B組為油酸致傷組，每組10只。兩組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前均禁食12 h。將動(dòng)物用 3%的戊巴比妥鈉5 mL 和速眠新1 mL 肌注麻醉后，俯臥位固定于手術(shù)臺(tái)。3%的戊巴比妥鈉 5 mL·h-1維持麻醉。A組（對(duì)照組）不作任何處理，B組沿小型豬耳緣靜脈緩慢注入油酸0.15 mL·kg-1，30 min 內(nèi)注完。觀察兩組動(dòng)物的呼吸及一般情況改變。B組動(dòng)物均以油酸推注4 h 后放血處死，A組動(dòng)物在同一時(shí)間放血處死，打開(kāi)胸腔，分離出氣管，于環(huán)狀軟骨下結(jié)扎，在結(jié)扎處以上切斷氣管。B組動(dòng)物用線在氣管分叉處結(jié)扎以防止肺水腫液滲出，將氣管連同整個(gè)肺臟取出，小心剔除肺外組織。

1.9 氯仿靜脈注射致肺水腫模型

家兔耳緣靜脈注射10%的氯仿0.1 mL·kg-1，10 min后呼吸變淺快，逐漸發(fā)展為呼吸困難、紫紺，發(fā)生肺水腫［15］。

氯仿復(fù)制肺水腫起效快，癥狀典型，所測(cè)得的肺質(zhì)量系數(shù)大于正常值1 倍左右，但氯仿不穩(wěn)定，見(jiàn)光易分解，不易保存；且氯仿的毒性較大，容易損傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

1.9.1 大鼠氯仿靜脈注射致肺水腫模型

薛敬禮［10］等采用大鼠，稱重，實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射25%氯仿12 mL·kg-1，然后觀察一般情況和呼吸，存活時(shí)間。對(duì)照組不作任何處理，對(duì)動(dòng)物實(shí)行安樂(lè)死。解剖，先結(jié)扎氣管以免液體外溢，將肺和心臟一起取出，剪除心臟和其它脂肪組織，用濾紙吸去肺表面的液體，用天平稱兩肺質(zhì)量，計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)，若肺質(zhì)量系數(shù)＞1%，證明肺水腫已形成［10］。

1.9.2 家兔氯仿靜脈注射致肺水腫模型

李燦等［15］采用家兔，稱重，用25%烏拉坦100 mg·kg-1耳緣靜脈注射麻醉家兔，固定手術(shù)臺(tái)上。剪去頸部被毛，分離氣管，行氣管插管術(shù)。沿家兔耳緣靜脈注入10%氯仿（0.1 mL·kg-1），對(duì)照組不作任何處理。觀察家兔的呼吸及一般情況改變，通過(guò)計(jì)算機(jī)生物信號(hào)分析記錄系統(tǒng)描記呼吸曲線。若呼吸曲線明顯變淺變快或氣管內(nèi)涌出粉紅色泡沫樣液體，則提示肺水腫已形成，記錄肺水腫形成的時(shí)間。如有家兔死亡，記錄死亡時(shí)間。放血處死家兔，取氣管—支氣管—肺。用粗線自氣管下方結(jié)扎氣管，自上而下打開(kāi)胸腔，將肺和心臟一起取出，剪去心臟，用濾紙吸去肺表面的水分，天平稱兩肺質(zhì)量，計(jì)算肺質(zhì)量系數(shù)，若肺質(zhì)量系數(shù)＞5.0，證明肺水腫已形成［15］。

1.10 高原反應(yīng)致肺水腫動(dòng)物模型

利用低壓氧艙減壓大鼠，觀察大鼠在復(fù)合缺氧寒冷運(yùn)動(dòng)條件下的肺血流動(dòng)力學(xué)、肺組織病理形態(tài)學(xué)改變。

高原肺水腫的發(fā)生主要取決于海拔高度、環(huán)境溫度、機(jī)體的適應(yīng)情況。國(guó)內(nèi)外學(xué)者認(rèn)為缺氧所致肺動(dòng)脈高壓是高原肺水腫發(fā)生的重要因素。內(nèi)皮功能失調(diào)和細(xì)胞損傷導(dǎo)致的肺毛細(xì)血管屏障通透性增加是發(fā)病機(jī)制之一［20］。

張靜等［21］建立了大鼠的實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為平原對(duì)照組、缺氧寒冷運(yùn)動(dòng)組。HCE 實(shí)驗(yàn)條件為：持續(xù)減壓高度4 000 m，溫度在8：00～20：00為10℃，20：00 至次日8：00為4℃；濕度與外界環(huán)境相同；實(shí)驗(yàn)期間自由進(jìn)食和飲水，每日趕大鼠游泳運(yùn)動(dòng)6次，每 隔4 h l次，每次40 min。HCE 分為24、48、72 h 3個(gè)時(shí)相點(diǎn)，分別檢測(cè)肺動(dòng)脈壓、心室壓、采取頸動(dòng)脈血后活殺取肺［21］。

2 誘發(fā)肺水腫動(dòng)物模型的注意事項(xiàng)

輸藥過(guò)程中，應(yīng)密切觀察呼吸曲線的變化，如無(wú)肺水腫的典型表現(xiàn)，可重復(fù)使用腎上腺素，用法劑量同上，兩次間隔宜在10～15 min，不易過(guò)頻，直至出現(xiàn)肺水腫變化為止［22］。

取肺時(shí)要小心，防止肺組織破裂和水腫液流出，否則影響肺系數(shù)的準(zhǔn)確性。肉眼觀察肺大體變化及雙肺底有無(wú)淤血發(fā)生，然后用刀片切開(kāi)肺組織，觀察擠壓時(shí)是否有水腫液溢出（注意其量、性質(zhì)、顏色）［23］。

插完靜脈插管后，應(yīng)馬上以10～15 滴·min-1速度輸液，這樣可以防止靜脈插管內(nèi)凝血?？刂坪幂斠核俣群洼斠毫?，過(guò)慢時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均不發(fā)生肺水腫，而過(guò)快時(shí)對(duì)照組也會(huì)發(fā)生肺水腫［24］。

總之，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是生命科學(xué)研究及其他一些自然科學(xué)研究的重要手段，動(dòng)物肺水腫模型可以更好的研究人類發(fā)病原因、發(fā)病機(jī)理，對(duì)于臨床治療和藥物試驗(yàn)有重要的推動(dòng)作用。目前國(guó)內(nèi)外制備實(shí)驗(yàn)性肺水腫動(dòng)物模型方法很多，但是應(yīng)用不同方法和不同動(dòng)物導(dǎo)致的肺水腫結(jié)果都需要研究。通過(guò)肺水腫動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，為肺水腫防治研究提供模型依據(jù)。