陶劍恒

(賀州市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 賀州 542800)

引 言

食品安全檢驗(yàn)是一項(xiàng)重要的工作，必須做到防患未然，在食品進(jìn)入市場(chǎng)之前，必須做好安全檢驗(yàn)和質(zhì)量控制工作。在食品化學(xué)檢驗(yàn)中，存在一些不確定成分。在具體的反應(yīng)條件下，反應(yīng)物到產(chǎn)物的整個(gè)反應(yīng)過(guò)程都是基于之前的經(jīng)驗(yàn)分析。另外，食品化學(xué)檢驗(yàn)中，不利因素造成的影響，也是必須要考慮到的。所以，在食品化學(xué)檢驗(yàn)中，應(yīng)當(dāng)對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)，進(jìn)而對(duì)食品安全檢驗(yàn)過(guò)程，發(fā)揮指導(dǎo)性的作用，同時(shí)實(shí)現(xiàn)工作人員、反應(yīng)物、催化劑、實(shí)驗(yàn)環(huán)境、反應(yīng)條件、預(yù)計(jì)結(jié)果等方面的妥善處理。

1 食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的意義

在化學(xué)檢驗(yàn)全過(guò)程當(dāng)中，方法確認(rèn)對(duì)于質(zhì)量保障起著決定性的作用。根據(jù)試驗(yàn)提供相應(yīng)證據(jù)，進(jìn)而對(duì)特定用途特殊要求是否能夠得到滿足而提供證明。實(shí)驗(yàn)室對(duì)于化學(xué)檢驗(yàn)方法的選擇與應(yīng)用，不管是標(biāo)準(zhǔn)或非標(biāo)準(zhǔn)的方法，在實(shí)際進(jìn)行應(yīng)用的時(shí)候，都需要經(jīng)過(guò)確認(rèn)[1]。通過(guò)相關(guān)試驗(yàn)，對(duì)證明加以獲得，進(jìn)而明確能夠在實(shí)際應(yīng)用中，對(duì)這種檢驗(yàn)方法進(jìn)行良好掌握和順利執(zhí)行。另外，食品化學(xué)檢驗(yàn)方法的確認(rèn)，不但是評(píng)價(jià)方法本身是否可行，還具有其它的意義。比如能夠?qū)εc計(jì)劃要求是否相符提供證明，獲得的資料，在質(zhì)量控制與質(zhì)量保證設(shè)計(jì)中提供輔助，滿足質(zhì)量控制基礎(chǔ)資料要求，指導(dǎo)儀器設(shè)備和其它所需物品的配備，對(duì)人員能力提出明確要求，合理安排有害廢物排放問(wèn)題，以及對(duì)操作效率的提升等方面。目前，食品化學(xué)檢驗(yàn)方法的確認(rèn)，主要包括實(shí)驗(yàn)室間的確認(rèn)試驗(yàn)，也叫做合作試驗(yàn)，還有就是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)確認(rèn)試驗(yàn)，也叫單一試驗(yàn)。其中，合作試驗(yàn)項(xiàng)目比較大，是在不同的實(shí)驗(yàn)室中，由不同操作者進(jìn)行檢查。單一試驗(yàn)相對(duì)簡(jiǎn)單，只在特定的實(shí)驗(yàn)室中，由特定的操作員進(jìn)行。需要注意的是食品化學(xué)檢驗(yàn)方法的確認(rèn)，并不等同于能力考核、內(nèi)部質(zhì)量控制等管理工作。應(yīng)用分析方法的過(guò)程中，需要進(jìn)行一次方法確認(rèn)，就能夠?qū)@一方法的未來(lái)應(yīng)用加以判斷[2]。

2 食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的要求

根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，在食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)中，需要滿足的操作特性要求，主要包括了精密度、重現(xiàn)性、重復(fù)性、準(zhǔn)確度、回收率、基體效應(yīng)、選擇性、定量限、檢出限、范圍、線性、耐變性等。針對(duì)各個(gè)要求，分別做出了相應(yīng)的規(guī)定，例如最少的測(cè)定次數(shù)、最少的樣品數(shù)量等。

分析方法準(zhǔn)確度主要是測(cè)定結(jié)果和真實(shí)結(jié)果之間的差異[3]。精密度是對(duì)相同樣品使用相同方法多次檢測(cè)，取得相一致的結(jié)果，可采用標(biāo)準(zhǔn)差的形式體現(xiàn)。在不同條件下結(jié)果變異情況由再現(xiàn)性、重復(fù)性決定。相同實(shí)驗(yàn)室中，短時(shí)間間隔內(nèi)，由相同的操作者利用相同儀器，對(duì)相同樣品進(jìn)行監(jiān)測(cè)，其結(jié)果變異情況即為重復(fù)性。在不同的實(shí)驗(yàn)室中，不同的操作人員使用不同的儀器，以相同的方法檢測(cè)同一樣品，結(jié)果具有重現(xiàn)性。在一定條件下，分析方法可以檢測(cè)出樣品中最低濃度或最小含量，即檢測(cè)限。特定試驗(yàn)條件下，利用分析方法對(duì)樣品中目標(biāo)物測(cè)定能夠準(zhǔn)確定量檢測(cè)的最低濃度，就是定量限。線性是指分析方法在一定范圍內(nèi)給出與目標(biāo)物含量成正比的儀器響應(yīng)值或結(jié)果的能力[4]。測(cè)量范圍是指檢測(cè)的精密度、準(zhǔn)確度和線性度都符合要求的濃度范圍。選擇系統(tǒng)也稱為特異性線，是指分析方法在混合物或樣品基質(zhì)存在的情況下，準(zhǔn)確和具體地確定目標(biāo)物質(zhì)的能力。耐變性是指同一樣品在不同的實(shí)驗(yàn)室、不同的人員、不同的儀器、不同的試劑批次等不同的試驗(yàn)條件下，分析結(jié)果的重現(xiàn)性。關(guān)于具體的操作參數(shù)，由于在不同的方法目的及原理下，也都有所不同，所以需要在具體情況下做出分析[5]。

上述所有的標(biāo)準(zhǔn)要求并不是需要全部應(yīng)用，而是需要結(jié)合分析方法的目的、要求等選擇相應(yīng)操作參數(shù)。對(duì)于食品化學(xué)檢驗(yàn)來(lái)說(shuō)，在常量成分分析中，檢測(cè)限和定量限并沒(méi)有太大作用，而在獸藥、農(nóng)藥、重金屬、真菌毒素等低水平污染物痕量分析中，這些指標(biāo)就非常關(guān)鍵。所以，在相關(guān)的報(bào)告數(shù)據(jù)中，對(duì)于檢驗(yàn)方法的檢測(cè)限和定量限，需要明確給出。如果樣品檢測(cè)沒(méi)有將目標(biāo)物檢出，在檢驗(yàn)報(bào)告中，不能標(biāo)注為未檢出，而是應(yīng)標(biāo)注為低于檢測(cè)限。可根據(jù)農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，明確檢測(cè)方法的定量限，代表了在食品當(dāng)中農(nóng)藥殘留量必須控制在檢測(cè)方法定量限之下，會(huì)是一個(gè)比較安全的情況[6]。

3 食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的原則

3.1 確認(rèn)的規(guī)定及范圍

確認(rèn)為食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)工作的高效實(shí)施及開(kāi)展奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，要求在特定的目標(biāo)下實(shí)施及開(kāi)展化學(xué)檢驗(yàn)工作，明確目標(biāo)物濃度范圍及特定類型，確認(rèn)工作在實(shí)施及開(kāi)展之前，應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)的規(guī)定進(jìn)行考察，以符合考察目的及操作特定的對(duì)象為目標(biāo)[7]。在對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行分析時(shí)，需要在特定的分析技術(shù)下進(jìn)行，以實(shí)驗(yàn)室為主體，通常確認(rèn)試驗(yàn)是沒(méi)有任何問(wèn)題的。但是在實(shí)際的試驗(yàn)過(guò)程中，也存在諸多的不足之處，在對(duì)試驗(yàn)進(jìn)行確定時(shí)，應(yīng)建立在特定試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以便能夠?yàn)榧僭O(shè)提供確鑿有力的證據(jù)。在既定情況下，需要對(duì)確認(rèn)試驗(yàn)的范圍進(jìn)行明確劃分，有部分試驗(yàn)的實(shí)施及開(kāi)展建立在分析技術(shù)的基礎(chǔ)上，對(duì)于一些不常使用的分析技術(shù)有著更為嚴(yán)格的使用要求。

3.2 方法誤差的來(lái)源

測(cè)量誤差的出現(xiàn)受多種原因影響，包括運(yùn)作不合理、隨機(jī)誤差的重復(fù)性、方法不合理、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備不完善等，是影響實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)工作高效開(kāi)展的重要因素。在單一實(shí)驗(yàn)室中，由于忽視實(shí)驗(yàn)室偏倚，進(jìn)而引發(fā)試驗(yàn)誤差產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)工作在實(shí)施及開(kāi)展期間，應(yīng)合理選擇特定的實(shí)驗(yàn)室材料，并對(duì)相關(guān)的材料種類做好科學(xué)分類，當(dāng)基質(zhì)類型的材料出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性變動(dòng)時(shí)，將會(huì)對(duì)基質(zhì)產(chǎn)生較大的影響[8]。

3.3 方法及實(shí)驗(yàn)室的影響

在對(duì)單一實(shí)驗(yàn)室中的方法進(jìn)行確認(rèn)時(shí)，應(yīng)充分考慮到實(shí)驗(yàn)室方法是否出現(xiàn)了偏倚，相較于運(yùn)作及重復(fù)性影響，偏倚的判斷難度更高。通常情況下，在對(duì)實(shí)驗(yàn)室的不確定度進(jìn)行評(píng)估時(shí)，應(yīng)采用單獨(dú)收集材料方法，收集材料的來(lái)源主要包括能力考核所產(chǎn)生的統(tǒng)計(jì)資料，通過(guò)合作試驗(yàn)所產(chǎn)生的統(tǒng)計(jì)資料，對(duì)相關(guān)的有證參考物質(zhì)進(jìn)行分析所產(chǎn)生的資料。通過(guò)合作試驗(yàn)的實(shí)施及開(kāi)展，能夠清晰了解到實(shí)驗(yàn)室中偏倚情況產(chǎn)生的原因，從理論上看，試驗(yàn)設(shè)計(jì)存在諸多的缺點(diǎn)，做好變異估算尤為重要，對(duì)提升試驗(yàn)的意義及效果具有重要作用。通過(guò)對(duì)合作試驗(yàn)及不確定估算進(jìn)行對(duì)比，對(duì)單一實(shí)驗(yàn)室會(huì)產(chǎn)生重要的意義[9]。能力考核下所產(chǎn)生的統(tǒng)計(jì)資料所展現(xiàn)出來(lái)的意義及作用均尤為突出，能夠直觀的展現(xiàn)出實(shí)驗(yàn)室與方法組合之間所存在的偏倚，對(duì)于一些特定的參加者而言，需要在特定的條件下明確試驗(yàn)誤差產(chǎn)生的原因，并為與其相關(guān)的實(shí)驗(yàn)誤差所產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)差提供基礎(chǔ)。但是在實(shí)際的工作過(guò)程中，能力考核相關(guān)資料獲取難度較高，因?yàn)樵讷@取過(guò)程中，與合作試驗(yàn)的資料獲取方法存在著一定的差異，并且不能將獲取的資料進(jìn)行公布及列表。采用該種方法在對(duì)資料進(jìn)行統(tǒng)一計(jì)算時(shí)，受目標(biāo)物濃度及基質(zhì)影響較大。能力考核的相關(guān)計(jì)劃參與者，應(yīng)采用給定值比較方法，對(duì)所報(bào)告的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，能夠有效的測(cè)量出給定結(jié)果中所存在的不確定性影響因素。為了確保能夠得到適當(dāng)?shù)腃RM，可在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中采用多次分析的方法，來(lái)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室中方法組合所出現(xiàn)的偏倚。在通常情況下，由于無(wú)法獲取與實(shí)驗(yàn)要求相一致的CRM材料，在開(kāi)展實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，會(huì)選擇其她的材料來(lái)代替。因此，需要對(duì)替代材料的應(yīng)用能力進(jìn)行考核評(píng)估。

4 食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的方法

在對(duì)一個(gè)新的、不熟悉及修改的檢驗(yàn)方法進(jìn)行確認(rèn)時(shí)，要求實(shí)驗(yàn)室應(yīng)結(jié)合現(xiàn)階段的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)狀及實(shí)驗(yàn)室的能力來(lái)做好相關(guān)的檢驗(yàn)工作，以便能夠針對(duì)不同的情況，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)的界限、驗(yàn)證方法等[10]。

第一，全面確認(rèn)檢驗(yàn)方法。該項(xiàng)試驗(yàn)的實(shí)施及開(kāi)展需要建立在合作試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室中各項(xiàng)檢驗(yàn)工作，應(yīng)做到能夠滿足試驗(yàn)特殊性工作要求，從而確保一系列試驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行。

第二，需要將全面確認(rèn)檢驗(yàn)方法應(yīng)用于新基質(zhì)檢驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)室在開(kāi)展該項(xiàng)試驗(yàn)時(shí)，需要根據(jù)新基質(zhì)有無(wú)出現(xiàn)誤差，來(lái)制定出完善的檢驗(yàn)方法及檢驗(yàn)體系。

第三，實(shí)驗(yàn)室中的精密度試驗(yàn)在開(kāi)展過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格按照科學(xué)的操作要求進(jìn)行，保證實(shí)驗(yàn)方法選擇的合理性。

第四，確認(rèn)試驗(yàn)的實(shí)施及開(kāi)展，科學(xué)分析相關(guān)的文獻(xiàn)資料，選擇特殊的方法開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需重點(diǎn)展示出實(shí)驗(yàn)的特殊性。

第五，實(shí)驗(yàn)室方法展現(xiàn)出了較強(qiáng)的經(jīng)驗(yàn)性特點(diǎn)。具備經(jīng)驗(yàn)性的實(shí)驗(yàn)室方法，需要嚴(yán)格按照相關(guān)的規(guī)定及要求進(jìn)行試驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，其主要目的在于對(duì)一些無(wú)關(guān)的量進(jìn)行測(cè)定和估量。例如，在對(duì)某一樣品的特定目標(biāo)物濃度進(jìn)行測(cè)量時(shí)，偏倚度通常為零，并且產(chǎn)生的基質(zhì)變化也與之無(wú)關(guān)。不可忽視實(shí)驗(yàn)室所產(chǎn)生的偏倚。在對(duì)該種情況進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，通常會(huì)采用單一實(shí)驗(yàn)方法來(lái)進(jìn)行。另外，還會(huì)出現(xiàn)無(wú)法得到考察物質(zhì)情況，若沒(méi)有合作試驗(yàn)數(shù)據(jù)，需要從一個(gè)特殊設(shè)計(jì)的耐變性試驗(yàn)角度出發(fā)，對(duì)試驗(yàn)室空間的精密度進(jìn)行測(cè)量，主要是運(yùn)用Horwitz公式來(lái)進(jìn)行估算。

5 結(jié)語(yǔ)

食品安全問(wèn)題與人們的健康息息相關(guān)，為了更好的完成食品化學(xué)檢驗(yàn)工作，必須對(duì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行有效的確認(rèn)。在實(shí)際工作中，為了對(duì)結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確性提供保障，對(duì)于分析方法的選擇，應(yīng)當(dāng)遵循標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室在將分析方法設(shè)定為常規(guī)方法之前，不論是標(biāo)準(zhǔn)或是非標(biāo)準(zhǔn)的方法，都必須經(jīng)過(guò)確認(rèn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用的食品化學(xué)檢驗(yàn)方法，應(yīng)當(dāng)符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，并且對(duì)操作特性進(jìn)行了合作試驗(yàn)評(píng)價(jià)。當(dāng)應(yīng)用新的方法得出結(jié)果時(shí)，應(yīng)當(dāng)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)完成內(nèi)部確認(rèn)。實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)中，應(yīng)當(dāng)結(jié)合適用性、準(zhǔn)確度、范圍、檢出限、耐變性、選擇性、精密度、定量限、靈敏度、可行性等操作特性中，適當(dāng)選擇相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，并且體現(xiàn)出對(duì)客戶要求的滿足。本文主要研究了食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的意義，明確了食品化學(xué)檢驗(yàn)方法的確認(rèn)要求，探討了食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的原則，討論了食品化學(xué)檢驗(yàn)方法確認(rèn)的方法。