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        氯化鈣與1-甲基環(huán)丙烯對伽師瓜果實軟化與果膠酶活性及其基因表達影響

        2019-02-15 02:56:24張強代文婷金新文
        食品與發(fā)酵工業(yè) 2019年2期
        關(guān)鍵詞:伽師果膠果肉

        張強,代文婷,金新文*

        1(新疆大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,新疆 烏魯木齊,830046)2(新疆農(nóng)墾科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,新疆 石河子,832000)

        伽師瓜是厚皮甜瓜(Cucumismelo)的代表性品種,主要產(chǎn)于中國西部地區(qū),其形體勻稱飽滿、肉厚質(zhì)細、香甜清脆、含糖量高、風(fēng)味獨特,居新疆甜瓜之首。但伽師瓜采后易發(fā)生后熟與軟化,貯藏時間短,因此,延緩果實的后熟與軟化,對伽師瓜長期貯藏、遠運銷售、保持良好的食用口感與商品性均有積極的作用。

        伽師瓜屬于呼吸躍變型果實,其特點為果實從生長停止到開始進入衰老期間,呼吸速率與乙烯釋放量出現(xiàn)躍變現(xiàn)象,果實迅速后熟并軟化[1]。軟化過程中,原果膠水解為可溶性果膠,使果膠與纖維素和半纖維素的整體結(jié)構(gòu)發(fā)生解聚而變松散,表現(xiàn)為果實變軟和水化[2-3]。推遲或抑制呼吸躍變,減少乙烯釋放量,是延緩果實衰老軟化的有效措施。

        1-氨基環(huán)丙烷基羧酸(ACC)氧化酶(ACO)催化ACC轉(zhuǎn)化生成乙烯,是果實內(nèi)源乙烯產(chǎn)生的主要途徑,鈣能夠抑制ACC合成酶(ACS)活性,使含量處于低水平,同時能抑制ACC氧化酶(ACO)的活性,從而抑制內(nèi)源乙烯的產(chǎn)生,用鈣處理網(wǎng)紋甜瓜,能夠降低果實呼吸強度和乙烯釋放量[4]。同時,鈣是細壁結(jié)構(gòu)的必要物質(zhì),CHARDONNET[5]通過鈣滲透“金冠”蘋果皮質(zhì)組織,能有效抑制細胞壁組分變化,維持果實的硬度。鄧佳等[6]用鈣處理葡萄柚果實,細胞壁降解酶活性變化及其相關(guān)基因表達量均有所降低,并能有效維持果實的硬度。乙烯對果實具有催熟作用,果實后熟過程又產(chǎn)生大量乙烯[7],1-甲基環(huán)丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)是一種乙烯作用的抑制劑,能競爭性與乙烯受體結(jié)合,阻斷乙烯信號傳導(dǎo),抑制乙烯的后熟作用[8]。郭子娟用1-MCP處理亞特獼猴桃,呼吸速率與乙烯釋放量均顯著降低[9]。馬文平用1-MCP處理玉金香甜瓜,有效抑制了裂解細胞壁主要酶的活性,延緩了果實的軟化[10]。目前,將鈣與1-MCP聯(lián)合使用對伽師瓜采后貯藏期間果實生理代謝方面的研究鮮有報道。因此,本文以甜瓜厚皮品種伽師瓜為材料,研究CaCl2與1-MCP對伽師瓜在貯藏過程中呼吸作用、乙烯釋放量、果實硬度與質(zhì)構(gòu)特性、果膠水解酶(多聚半乳糖醛酸酶PG、果膠甲酯酶PME和果膠裂解酶PL)活性及酶基因表達量的影響,為延緩伽師瓜采后果實軟化、提高其商品性提供參考依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 實驗材料

        CaCl2(分析純),購于天津市鼎盛鑫化工有限公司;1-甲基環(huán)丙烯,購于青島綠諾生物科技有限公司;厚皮甜瓜伽師品種,由新疆大學(xué)生物工程研究中心提供。RNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒(DP441),Quant One Step RT-PCR kit(KR113)反轉(zhuǎn)錄酶,lnRcute lncRNA cDNA第一鏈合成試劑盒(去基因組) (KR202),Talent熒光定量檢測試劑盒(SYBR Green)FP209,天根生化科技(北京)有限公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        3051H型呼吸強度測定儀,杭州綠博儀器有限公司;AGY-1型果實硬度測量計,溫州艾力儀器制造有限公司;TEX-100N質(zhì)構(gòu)儀,日本JISC公司;Trace GC 1300氣相色譜儀,賽默飛世爾科技公司;Line Gene 9600 Plus熒光定量PCR儀,杭州博日科技有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 對伽師瓜果實進行CaCl2與1-MCP處理濃度篩選

        選取達到商品成熟度、無外傷、重量、果型一致的果實,在果實采摘后8 h內(nèi)完成以下處理:

        CaCl2處理:分別用質(zhì)量分數(shù)為0.5%、1%、2%、4%的CaCl2溶液浸泡5 min,通風(fēng)室溫晾干[11];

        1-MCP處理:分別用0.25、0.5、1、2 μL/L的1-MCP在20 ℃下熏蒸24 h[12];

        處理之后分別進行CaCl2與1-MCP最佳處理濃度篩選實驗。

        1.3.2 樣本處理

        選取成熟度、重量、大小、果型一致,沒有統(tǒng)計學(xué)差異的無外傷果實400個作為樣本池,對照組與3個處理組各從樣本池中隨機抽取100果實做實驗樣本,對照組不做處理,直接貯藏(樣本處理與貯藏在果實采摘后8 h內(nèi)完成);

        CaCl2與1-MCP處理分別用篩選的最優(yōu)濃度處理果實樣本;

        CaCl2與1-MCP聯(lián)合處理:根據(jù)CaCl2與1-MCP處理濃度篩選結(jié)果,先用最優(yōu)濃度CaCl2處理,再用最優(yōu)濃度1-MCP處理,處理后單果套泡沫網(wǎng)袋后裝入包裝箱,10 個/箱;

        對照組與處理組樣本均置于溫度(20±1) ℃,濕度(50±5)%的保鮮庫中貯藏。

        1.3.3 呼吸強度與乙烯釋放量的測定

        果實呼吸強度用氣流法測定[13],每次取9個果實,分3組,每組3個果實,放入呼吸強度測定儀(氣流速度0.4 L/min)進行測定,每組重復(fù)測3次,單位:CO2mg/(kg·h)。

        乙烯釋放量的測定:參照LI等[14]的方法,用氣相色譜儀進行測定,每次取9個果實,分3組,每組3個果實進行測定,每組重復(fù)測3次。

        (1)

        式中:C,待測樣品釋放的乙烯含量,μL/L;V,干燥器的體積與待測樣品體積之差值,mL;m,待測樣品質(zhì)量,kg;t,密閉時間,h。

        1.3.4 果實硬度與果肉質(zhì)構(gòu)特性的測定

        參照CAMPS與李明霞等[15-16]的方法,每次處理用9個果實,使用果實硬度計測定,重復(fù)3次,單位:kg/cm2。

        果肉剪切形變時間與抵抗力的測定[17-18]:將果肉切為1.5 cm3正方形塊狀,置于測試夾具中,探頭速率為100 mm/min,測試壓縮程度設(shè)定為30 mm,觸發(fā)值設(shè)定為0.049 N,每個處理用果實9個,在每個果實胴部不同部位對稱均取4個位點果肉測定,重復(fù)3次。

        1.3.5 原果膠與可溶性果膠含量測定

        參照紀淑娟等[19]的方法,單位分別以每克鮮重中可溶性果膠和原果膠的毫克數(shù)表示,即mg/g FW。

        1.3.6 果膠酶活性的測定

        多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase, PG)活性的測定:參照FIGUEROA與劉耀娜的方法[20-21]。以每分鐘每克鮮樣在37 ℃分解多聚半乳糖醛酸產(chǎn)生1 μmol的半乳糖醛酸的質(zhì)量表示,即μg/(g·min)。

        果膠甲酯酶(pectin methylesterase, PME)活性的測定[21-22]:用NaOH滴定法測定酶活性,以該條件下每分鐘每克鮮樣催化果膠釋放1 mmol的CH3O-為一個酶活性單位,即mmolCH3O-/(g·min)。

        果膠酸裂解酶(pectate lyase, PL)活性的測定:參考ANURAG等[23]的方法,以每克鮮質(zhì)量每分鐘在波長235 nm處吸光度值(OD235)的變化表示,即ΔOD235/(g·min)。

        1.3.7 果實PG、PME和PL基因的定量表達分析[24-25]

        果實總RNA提?。喝?00 mg果肉在液氮中迅速研磨成粉末,用RNAprep Pure多糖多酚植物總RNA提取試劑盒提取總RNA;

        cDNA鏈合成:將提取的RNA用逆轉(zhuǎn)錄酶與反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA第一鏈;

        實時熒光定量PCR(quantitative Real- time PCR, qRT-PCR)分析:以Actin作為內(nèi)參基因,用premier 5.0軟件設(shè)計酶基因的qPCR引物如表1所示,以合成的cDNA,用熒光定量PCR儀與熒光定量檢測試劑盒進行實時熒光定量PCR分析。

        表1 實時定量PCR所需引物Table 1 Primers for qRT-PCR analysis

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        實驗數(shù)據(jù)采用Excel統(tǒng)計和繪圖,用SPSS 17.0軟件系統(tǒng)進行方差分析,以P<0.05作為差異顯著的標準。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 對樣本進行CaCl2與1-MCP處理濃度的篩選

        2.1.1 不同濃度的CaCl2處理對伽師瓜貯藏過程中呼吸強度與乙烯釋放量的影響

        分別用0.5%、1%、2%、4%質(zhì)量分數(shù)的CaCl2處理伽師瓜,如圖1-A、圖1-B所示。4個濃度CaCl2處理樣本果實的呼吸強度與乙烯釋放量均較對照組低(P<0.05),并且對照組呼吸強度與乙烯釋放量有明顯的躍變現(xiàn)象,均在第8天出現(xiàn)躍變峰,處理組也出現(xiàn)類似的躍變峰,但躍變幅度較小,且躍變時間有所延遲,0.5%、4%的CaCl2處理樣本在第10天出現(xiàn)躍變峰,1%、2%的CaCl2處理樣本在第12天出現(xiàn)躍變峰,其中,2%的CaCl2處理樣本呼吸強度與乙烯釋放量最低,躍變峰值也最小。此外,依次用0.5%、1%、2%的CaCl2處理樣本對呼吸強度與乙烯釋放量的抑制作用逐漸增強,而4%的CaCl2處理樣本,則抑制作用減弱。因此,選擇2%的CaCl2處理樣本較為適宜。

        2.1.2 不同濃度的1-MCP處理對伽師瓜貯藏過程中呼吸強度與乙烯釋放量的影響

        由圖2-A、圖2-B可知,4個濃度的1-MCP處理果實均有降低呼吸強度與乙烯釋放量的作用,并且隨濃度升高,抑制作用增強,但處理濃度超過1 μL/L后,則變化不顯著。

        圖1 不同濃度CaCl2處理對伽師瓜采后貯藏過程中呼吸強度(A)與乙烯釋放量(B)的變化影響Fig.1 Effect ofCaCl2 treatment with different concentration on respiratory rate (A) and ethylene production (B) of Jiashi melon fruit during storage

        圖2 不同濃度1-MCP處理對伽師瓜采后貯藏過程中呼吸強度(A)與乙烯釋放量(B)的變化影響Fig.2 Effect of 1-MCP treatment with different concentration on respiratory rate (A) and ethylene production (B) of Jiashi melon fruit during storage

        0.25與0.5 μL/L的1-MCP處理組分別在第12天與14天出現(xiàn)躍變峰,0.5 μL/L組較0.25 μL/L組呼吸強度與乙烯釋放量低,且躍變峰值較小(P<0.05);1 μL/L處理組與2 μL/L處理組的呼吸強度與乙烯釋放量均無顯著差異(P>0.05),且沒有出現(xiàn)躍變現(xiàn)象。因此,從節(jié)約使用成本與減少藥害方面考慮,用1 μL/L的1-MCP處理樣本較為適宜。

        根據(jù)以上實驗結(jié)果,后續(xù)實驗的CaCl2使用2%(質(zhì)量分數(shù)),1-MCP使用濃度為1 μL/L。

        2.2 伽師瓜采后貯藏過程中呼吸強度與乙烯釋放量的變化

        由圖3-A與圖3-B可知,處理組樣本呼吸強度與乙烯釋放量較對照組低(P<0.05)。對照組果實呼吸強度與乙烯釋放量有躍變現(xiàn)象,貯藏初期變化緩慢,在第6天至第8天,CO2由73.9 mg/(kg·h)迅速增至231 mg/(kg·h),乙烯釋放量由10.9 μL/(kg·h)增至25.5 μL/(kg·h);在處理組中,CaCl2處理組在第12天出現(xiàn)類似躍變現(xiàn)象,但變化幅度較對照組小(P<0.05),1-MCP處理組較CaCl2組低,未出現(xiàn)躍變現(xiàn)象。CaCl2與1-MCP結(jié)合使用呼吸強度與乙烯釋放量最低,變化較為平緩,且沒有躍變現(xiàn)象。

        圖3 CaCl2與1-MCP處理對伽師瓜采后貯藏過程中呼吸強度(A)與乙烯釋放量(B)的變化影響Fig.3 Effect of CaCl2 and 1-MCP treatment on respiratory rate (A) and ethylene production (B) of Jiashi melon fruit during storage

        2.3 伽師瓜貯藏過程中果實硬度與果肉質(zhì)構(gòu)性能變化

        2.3.1 果實硬度的變化

        由圖4所示,隨著貯藏時間的延長,對照組與處理組果肉的硬度均不斷下降。

        圖4 CaCl2與1-MCP處理對伽師瓜采后貯藏過程中果實硬度變化影響Fig.4 Effect of CaCl2 and 1-MCP treatment on firmness of Jiashi melon fruit during storage

        對照組果肉硬度下降較處理組快(P<0.05),由第2天的13.9 kg/cm2下降至第18天的6.7 kg/cm2,并且在第8天至第10天呈加速下降,由11.6 kg/cm2下降至9.1 kg/cm2,之后下降速度緩慢。在處理組中,3種處理方式果肉硬度變化存在差異,CaCl2組下降速度最快,1-MCP組次之,CaCl2與1-MCP聯(lián)合使用下降最慢(P<0.05),從第2天至第18天,CaCl2組果肉硬度由14.3 kg/cm2下降至8.7 kg/cm2,1-MCP組由14.9 kg/cm2下降至10.5 kg/cm2,CaCl2與1-MCP聯(lián)合使用組由14.5 kg/cm2下降至10.8 kg/cm2。

        2.3.2 伽師瓜貯藏過程中果肉剪切形變時間與抵抗力的測定

        果肉質(zhì)構(gòu)是衡量伽師瓜食用價值與商品性的重要指標。甜瓜果肉質(zhì)構(gòu)特性常用最大抵抗力與剪切變形時間為參考[17],結(jié)果由表2可知,伽師瓜在貯藏過程中,隨著保鮮時間的延長,對照組與處理組樣本果肉的最大抵抗力均不斷下降,果肉剪切形變發(fā)生時間也不斷縮短。在貯藏第2天,對照組果肉最大抵抗力與剪切形變發(fā)生時間分別為139.6 N,21.3 s,第18天分別為67.4 N,2.3 s,下降速度顯著高于處理組(P<0.05)。

        表2 CaCl2與1-MCP處理對伽師瓜貯藏期間果肉剪切形變時間與抵抗力變化影響Table 2 Effects of CaCl2 and 1-MCP treatment on shear deformation time and resistance of Jiashi Melon during storage

        在前12天,CaCl2組樣本果肉的最大抵抗力與剪切形變發(fā)生時間的下降速度較1-MCP組慢,之后CaCl2組較1-MCP組下降速度快(P<0.05),這是由于鈣是乙烯抑制劑,也是構(gòu)成細胞壁的元素,外源鈣對維持果肉的質(zhì)構(gòu)特性有積極作用,但鈣不能完全抑制躍變現(xiàn)象,因此,CaCl2組果實代謝發(fā)生躍變后質(zhì)構(gòu)性能加速下降。CaCl2與1-MCP聯(lián)用組下降速度較單獨處理實驗組低,并且與對照組差異更為顯著(P<0.05),在第18天時CaCl2組果肉最大抵抗力與剪切形變發(fā)生時間分別為85.2 N,9.1 s,相應(yīng)的,1-MCP組分別為95.9 N,11.6 s,CaCl2與1-MCP 聯(lián)用組分別為99.7 N,12.9 s。

        2.4 伽師瓜貯藏過程中果膠含量變化

        圖5-A與圖5-B顯示,在貯藏過程中,對照組與處理組原果膠含量均不斷下降,可溶性果膠含量則呈不斷上升。

        圖5 CaCl2與1-MCP處理對伽師瓜貯藏過程中原果膠(A)與可溶性果膠(B)含量變化的影響Fig.5 Effect of CaCl2 and 1-MCP treatment on propectin content (A) and soluble pectin content (B) of Jiashi melon fruit during storage

        對照組原果膠含量由第2天的18.5 mg/g下降至第18天的7.7 mg/g,并在第6天至10天快速下降,可溶性果膠由第2天的5.2 mg/g上升至第18天的16.3 mg/g,第6天至10天快速上升,之后變化較為緩慢;處理組中,3種處理方法,原果膠含量下降速度與可溶性果膠含量上升速度均較對照組慢(P<0.05), 其中CaCl2組與1-MCP組變化差異較小,且均有小幅波動。CaCl2與1-MCP聯(lián)合使用,原果膠含量與可溶性果膠含量變化最緩慢,從第2天至第18天,原果膠含量由19.9 mg/g下降至13.6 mg/g,可溶性果膠由4.1 mg/g上升至8.5 mg/g,并且變化較穩(wěn)定。

        2.5 果膠水解酶活性及相關(guān)酶基因表達量的變化

        2.5.1 PG酶活性與酶基因表達量的變化

        由圖6-A與圖6-B可知,在貯藏過程中,對照組樣本PG活性與酶基因表達量均較處理組高(P<0.05),且對照組酶活性與酶基因表達量均存躍變現(xiàn)象。

        圖6 CaCl2與1-MCP處理對伽師瓜貯藏過程中PG酶活性(A)PG酶基因表達量(B)變化的影響Fig.6 Effect of CaCl2 and 1-MCP treatment on enzyme activity of PG (A) and CmPG gene expression (B) of Jiashi melon fruit during storage

        在處理組中,CaCl2組在貯藏第12天出現(xiàn)小幅度的躍變峰,其他處理方式未出現(xiàn)躍變現(xiàn)象,此外,對照組與處理組樣本酶活性與酶基因表達量增減均表現(xiàn)出同步性。

        2.5.2 PME酶活性與酶基因表達量的變化

        由圖7-A與圖7-B可知,在貯藏初始期,對照組與處理組PME活性無顯著差異(P>0.05),隨后對照組PME活性出現(xiàn)躍變現(xiàn)象,在第6天達到峰值,之后迅速下降,在第12 天至14 天時下降至處理組水平,在第16天至18天,低于處理組;在處理組中,3種處理方法樣本PME活性變化均較對照組緩慢(P<0.05),且均呈不斷下降趨勢,整體上看,3種處理方法之間PME活性沒有顯著差異,但變化過程中,CaCl2組變化波動較大,1-MCP組次之,CaCl2與1-MCP 聯(lián)合使用下降最為平緩。

        2.5.3 PL酶活性與酶基因表達量的變化

        如圖8-A與圖8-B所示,在初始期,對照組PL活性與酶基因表達水平均高于處理組,并存在躍變情況,在第8天達到峰值,從第14天開始,低于處理組;處理組PL活性與酶基因表達水平變化較對照組緩慢,CaCl2組在貯藏初期至中期高于1-MCP組和聯(lián)合處理組,貯藏后期,則差異不顯著,1-MCP組和聯(lián)合處理組之間差異不顯著(P>0.05)。

        圖8 CaCl2與1-MCP處理對伽師瓜貯藏過程中PL酶活性(A)PL酶基因表達量(B)變化的影響Fig.8 Effect of CaCl2 and 1-MCP treatment on enzyme activity of PL (A) and CmPL gene expression (B) of Jiashi melon fruit during storage

        3 討論

        乙烯是果實后熟軟化的誘導(dǎo)因素,乙烯能促使呼吸代謝強度增加,上調(diào)果膠酶基因的表達,產(chǎn)生果膠水解酶,使原果膠水解導(dǎo)致細胞壁結(jié)構(gòu)改變,表現(xiàn)為果實發(fā)生后熟與軟化[26]。本實驗結(jié)果顯示,對照組與處理組樣本的呼吸強度、果膠酶活性及酶基因表達水平均與乙烯釋放量呈正向協(xié)同效應(yīng)。

        鈣是構(gòu)成細胞壁的重要元素,有拮抗乙烯催熟與抑制細胞壁物質(zhì)水解酶活性的作用,能夠延緩果實軟化[27]。用不同濃度的CaCl2處理樣本,果實的呼吸強度、乙烯釋放量均有所降低,并且躍變期有所推遲,躍變峰值也顯著降低。增加外源鈣,有助于抑制果實的后熟、維持細胞壁結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定,李天來等[28]用硝酸鈣處理網(wǎng)紋甜瓜,結(jié)果顯示,5 mmol /L的硝酸鈣較1、3 mmol/ L的硝酸鈣對乙烯釋放量與呼吸強度有更強的抑制作用。鈣具備抑制后熟與維持細胞壁結(jié)構(gòu)穩(wěn)定作用的同時,也是細胞信號重要的傳導(dǎo)物質(zhì),過多的增加鈣又會促進果實后熟生理代謝中信號的傳導(dǎo),本研究結(jié)果顯示,用2%的CaCl2處理伽師瓜,較0.5%與1%處理濃度對果實后熟的抑制作用強,但用4%的CaCl2處理果實,對后熟的抑制作用反而減弱。1-MCP能夠阻斷乙烯與受體的正常結(jié)合,從而抑制乙烯的催熟作用,并能減少由后熟所導(dǎo)致的乙烯進一步釋放。在本實驗中,用0.25、0.5、1、2 μL/L的1-MCP處理樣本均能降低果實呼吸強度與乙烯釋放量,其中用1、2 μL/L的1-MCP處理樣本,果實沒有出現(xiàn)躍變現(xiàn)象,馬文平等[10]用1-MCP處理甜瓜也得到類似結(jié)果。但用1、2 μL/L的1-MCP處理樣本,果實呼吸強度與乙烯釋放量均無顯著差異,由此可知,1-MCP對乙烯受體的競爭結(jié)合存在飽和性,超過飽和值,并不能進一步增強抑制作用。將CaCl2與1-MCP聯(lián)合使用,即鈣能拮抗乙烯的催熟作用,1-MCP能夠阻斷殘留乙烯的信號傳導(dǎo),使兩種抑制后熟的作用機制形成互補。在本實驗中,用2%的CaCl2與1 μL/L的1-MCP 聯(lián)合處理樣本,對果實呼吸作用與乙烯釋放的抑制作用較單獨使用時更強,且更穩(wěn)定。

        原果膠水解成為可溶性果膠,是果實發(fā)生軟化的重要因素[29]。劉耀娜等[21]對厚皮甜瓜果實后熟軟化研究顯示,甜瓜果實在軟化過程中,原果膠含量不斷降低,可溶性果膠含量逐漸上升,而纖維素含量則變化較小[30]。本文參考前人研究,選擇果膠為切入點,對果膠含量變化、果膠酶活性與酶基因表達量進行檢測。結(jié)果顯示,在貯藏過程中,對照組與處理組中原果膠含量均逐漸降低,而可溶性果膠含量則均不斷上升。在本研究中,對照組果實硬度在第6天至第8天快速下降,這一時期原果膠水解產(chǎn)生可溶性果膠的速度也較快,與WEI等[31]的研究結(jié)果類似。

        對照組中,PG、PME、PL活性與酶基因表達量均有躍變現(xiàn)象,PG、PL在貯藏第8天出現(xiàn)峰值,且與呼吸強度與乙烯釋放量的峰值時間一致,PME峰值出現(xiàn)在第6天,BRUMMELL認為貯藏前期PME首先啟動果膠降解,為其他降解酶如PG等提供底物[32],這可能是PME活性與酶基因表達量峰值出現(xiàn)較早的原因。對照組PG活性與酶基因表達水平始終高于處理組,而PME和PL則分別在在第14天與第16天后低于處理組。在處理組中,CaCl2組PG活性與酶基因表達量存在小幅度的躍變情況,在第12天出現(xiàn)峰值,1-MCP與聯(lián)合處理組沒有出現(xiàn)躍變現(xiàn)象。結(jié)合樣本果膠含量與硬度變化分析可知,酶活性與酶基因表達量發(fā)生躍變對原果膠水解與果實硬度下降起至關(guān)重要的作用,平穩(wěn)緩慢的變化則影響較小。

        此外,在貯藏初始期,對照組果膠酶活性及其酶基因表達量均高于處理組,說明在用CaCl2與1-MCP處理樣本的過程中已對果實的后熟生理代謝產(chǎn)生了影響。

        4 結(jié)論

        CaCl2與1-MCP均能降低伽師瓜貯藏過程中呼吸強度、乙烯釋放量,并能有效抑制躍變現(xiàn)象,推遲甜瓜的后熟,同時能夠使果膠水解酶活性及酶基因表達量降低,延緩果實的軟化;將2%的CaCl2與1 μL/L的1-MCP聯(lián)合使用,對果實后熟的抑制作用較單獨使用時更強,且更穩(wěn)定,能更好地延緩果實軟化。

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