鄭 奇，楊 麗，曾 霖，桂夢(mèng)嵐，郭秀梅

(成飛醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 成都 610092)

慢性乙型肝炎(CHB)是臨床常見(jiàn)肝病，隨著病情進(jìn)展，可演變?yōu)楦斡不?，甚至發(fā)展成為肝癌，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康[1，2]。早期發(fā)現(xiàn)及監(jiān)測(cè)CHB病情發(fā)展并積極干預(yù)尤為重要。但目前對(duì)于CHB仍缺乏高敏感性且特異性的血清指標(biāo)來(lái)進(jìn)行病情嚴(yán)重程度及治療療效的評(píng)價(jià)。谷氨酸脫氫酶(GLDH)是一種線(xiàn)粒體酶，與谷氨酸代謝及能量代謝密切相關(guān)，近年研究發(fā)現(xiàn)，其在慢性肝病患者血清中呈高表達(dá)，能夠反映肝細(xì)胞損傷程度[3]。肝病患者常伴有脂質(zhì)代謝異常。載脂蛋白對(duì)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)及結(jié)合有重要作用，載脂蛋白A-I(ApoA I)、載脂蛋白B100(ApoB100)是其中兩類(lèi)主要載脂蛋白，其表達(dá)與慢性肝病患者脂質(zhì)代謝紊亂有緊密聯(lián)系[4]。本研究通過(guò)觀察CHB患者治療前后血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量的動(dòng)態(tài)變化，以期為CHB病情監(jiān)測(cè)及療效評(píng)價(jià)提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年1～8月我院收治的CHB患者50例，均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015版)》[5]中CHB診斷標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病。男29例，女21例，年齡26～70歲[(45.23±9.24)歲]；選取同期我院健康體檢者50例為對(duì)照組，男26例，女24例，年齡25～68歲[(43.58±8.68)歲]。兩組均排除肝腎疾病、自身免疫性疾病、其他影響脂質(zhì)代謝的疾病等。兩組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均對(duì)研究知情并簽署同意書(shū)。

1.2 方法所有患者均予以常規(guī)保肝治療，多烯磷脂酰膽堿膠囊(國(guó)藥準(zhǔn)字H20059010，賽諾菲北京制藥有限公司)，每次口服456 mg，每天3次。必要時(shí)予以抗病毒治療，恩替卡韋(國(guó)藥準(zhǔn)字H20120039，江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司)，每次口服0.5 mg，每天1次。對(duì)于丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)明顯升高(超過(guò)正常上限1倍)者，予以肝細(xì)胞保護(hù)劑異甘草酸鎂，根據(jù)病情可予以營(yíng)養(yǎng)支持(白蛋白、血漿等)。持續(xù)治療28天。

1.3 血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量檢測(cè)所有患者均于治療前后采集外周靜脈血，對(duì)照組于體檢時(shí)采集外周靜脈血。采用全自動(dòng)生化分析儀(BECKMAN AU5800型)，應(yīng)用α-酮戊二酸底物法檢測(cè)血清GLDH活性，試劑盒購(gòu)于北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司；應(yīng)用免疫比濁法測(cè)定血清ApoA I、ApoB100含量，試劑盒購(gòu)于英國(guó)Abacm公司。所有檢測(cè)操作步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 肝功能Child分級(jí)評(píng)定參照文獻(xiàn)[6]中相關(guān)方法進(jìn)行Child分級(jí)評(píng)分，內(nèi)容包括肝性腦病存在情況及程度、腹水情況、血清膽紅素、白蛋白水平和凝血酶原時(shí)間(PT)五個(gè)指標(biāo)。評(píng)分越高表示肝臟損傷越嚴(yán)重。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)系數(shù)法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級(jí)評(píng)分比較與對(duì)照組相比，CHB組血清GLDH活性及Child分級(jí)評(píng)分明顯較高(P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量明顯較低(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級(jí)評(píng)分比較

2.2 CHB治療前后血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級(jí)評(píng)分變化治療后，CHB血清GLDH活性及Child分級(jí)評(píng)分較治療前明顯降低，血清ApoA I、ApoB100含量較治療前明顯升高(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 CHB治療前后血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級(jí)評(píng)分變化

2.3 CHB患者血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量與Child分級(jí)評(píng)分的相關(guān)性治療前CHB組血清GLDH活性與Child分級(jí)評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.589，P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量與Child分級(jí)評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.605、-0.584，P<0.05)；治療后CHB組血清GLDH活性亦與Child分級(jí)評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.602，P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量與Child分級(jí)評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.613、-0.568，P<0.05)。

2.4 血清GLDH、ApoA I、ApoB100檢測(cè)對(duì)于CHB的診斷效能血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100水平診斷CHB的曲線(xiàn)下面積分別為0.933、0.863、0.722，截?cái)嘀捣謩e為12.86U/L、0.81 g/L、0.64 g/L，靈敏度分別為82.1%、79.6%、63.7%，特異度分別為89.2%、81.4%、77.6%。見(jiàn)圖1。

圖1 血清GLDH、ApoA I、ApoB100水平診斷CHB的ROC曲線(xiàn)

3 討論

慢性肝病因受各種損傷因子持續(xù)作用，導(dǎo)致肝臟組織結(jié)構(gòu)遭到慢性破壞，假小葉形成，朝著肝纖維化進(jìn)展，引起肝功能持續(xù)損害[7]。肝穿刺活檢是判斷慢性肝病病情嚴(yán)重程度的金標(biāo)準(zhǔn)，但其檢查程序繁瑣、費(fèi)用昂貴，同時(shí)存在明顯創(chuàng)傷，無(wú)法用于動(dòng)態(tài)觀察[8]。目前，臨床評(píng)價(jià)慢性肝病病情嚴(yán)重程度多依靠Child分級(jí)評(píng)分，而該評(píng)分系統(tǒng)涉及內(nèi)容包括肝性腦病存在情況和其嚴(yán)重程度、腹水情況、血清膽紅素、白蛋白水平和PT五個(gè)指標(biāo)，評(píng)價(jià)項(xiàng)目較多、繁瑣，易產(chǎn)生偶然誤差及系統(tǒng)誤差[9]。因此，臨床急需尋找敏感、特異且可方便用于動(dòng)態(tài)評(píng)價(jià)慢性肝病肝損傷程度的血清學(xué)指標(biāo)。

GLDH是一種含鋅的線(xiàn)粒體酶，在肝臟、腎臟、心臟、腦等多種組織中有著廣泛分布，其中以肝臟中活性最高。GLDH主要存在于肝細(xì)胞線(xiàn)粒體中，且在肝小葉不同區(qū)域內(nèi)其表達(dá)水平是存在差異的，肝小葉中央靜脈肝細(xì)胞中的GLDH活性是周邊肝細(xì)胞的1.72倍[10]。正常情況下，血液中GLDH活性極低，當(dāng)肝細(xì)胞出現(xiàn)損傷或壞死時(shí)，GLDH隨著線(xiàn)粒體崩解而進(jìn)入血流，引起血清GLDH活性增高[11]。因此檢測(cè)血清GLDH活性有助于了解肝細(xì)胞損傷程度。GLDH活性不存在季節(jié)波動(dòng)，個(gè)體差異較小，且?guī)缀醪皇芷渌蛩赜绊?。研究顯示，肝功能異常者血清GLDH活性明顯升高，可反映肝細(xì)胞損傷程度及治療效果[12]。相關(guān)研究表明，GLDH對(duì)肝實(shí)質(zhì)損傷診斷的特異性相比于ALT、AST要高[13，14]。本研究顯示，與對(duì)照組相比，CHB組血清GLDH活性明顯升高，治療后血清GLDH活性降低，且血清GLDH活性與Child分級(jí)評(píng)分呈正相關(guān)，提示血清GLDH活性能夠反映患者肝損傷程度，并可動(dòng)態(tài)反映治療效應(yīng)。

載脂蛋白是一種多功能蛋白，可參與脂質(zhì)結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)、利用、分布等多種作用，對(duì)于脂質(zhì)代謝有著重要作用。其具體功能包括：①調(diào)節(jié)酶活性；②配體作用，能夠與相關(guān)受體結(jié)合；③脂蛋白的重要組成。ApoA I、ApoB100是其中兩類(lèi)主要載脂蛋白，前者是高密度脂蛋白(HDL)的主要蛋白成分，具有較強(qiáng)的卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)激活能力，在膽固醇代謝中扮演著重要角色；后者是低密度脂蛋白(LDL)的重要組成，其生理作用在于可識(shí)別LDL受體并與其結(jié)合，參與LDL的清除，有助于維持血清LDL、膽固醇水平的穩(wěn)定。肝臟是ApoA I、ApoB100的主要合成部位，當(dāng)肝功能出現(xiàn)損傷時(shí)，ApoA I、ApoB100合成障礙，血清ApoA I、ApoB100水平降低，并伴隨著血脂紊亂。本研究顯示，CHB組血清ApoA I、ApoB100水平明顯低于對(duì)照組，治療后出現(xiàn)升高，且血清ApoA I、ApoB100水平與Child分級(jí)評(píng)分呈負(fù)相關(guān)；因此血清ApoA I、ApoB100水平也可作為評(píng)估CHB患者肝損傷程度及治療療效的重要指標(biāo)。本研究還采用ROC曲線(xiàn)分析了血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100水平對(duì)CHB的診斷能力，結(jié)果顯示，其曲線(xiàn)下面積分別為0.933、0.863、0.722，表明三者均對(duì)CHB有重要輔助診斷價(jià)值。

綜上所述，CHB患者GLDH活性升高，ApoA I、ApoB100含量降低，經(jīng)治療后它們的水平得到一定恢復(fù)；且血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量與Child分級(jí)評(píng)分呈正相關(guān)，檢測(cè)這三項(xiàng)指標(biāo)有助于CHB的診斷及療效評(píng)估。