孫志勇
(林口縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,黑龍江 雞西 157699)
本文通過公豬性行為的鑒定,詳細(xì)敘述公豬精液的采集和檢查。公豬精液檢查可有效提高種公豬的繁殖性能,是實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)增效的重要技術(shù)手段之一。
采集精液可用于檢查公豬的性欲以及公豬交配和射精能力,也是一次射精嘗試;交配前的行為涉及視覺和嗅覺刺激,公豬有節(jié)奏的發(fā)出呼嚕和嚎叫聲、咬牙、流涎、出現(xiàn)典型的用頭接觸母豬的行為,或者假意跟隨著母豬,以鼻翼摩擦母豬身側(cè),以試探母豬是否愿意接受交配。應(yīng)觀察公豬的這些行為,因?yàn)楫惓5男孕袨榭赡軙?huì)導(dǎo)致不育,沒有經(jīng)驗(yàn)的公豬常出現(xiàn)持續(xù)在母豬頭部爬跨的行為。性欲低下更可能是由于性行為不正確導(dǎo)致的,而不是內(nèi)分泌的問題。與年長(zhǎng)公豬和母豬打斗以及被征服可能會(huì)抑制年輕公豬的性欲,同樣可見品種和應(yīng)變壓力的差異;膽小、緊張不安、不好斗的傾向性,可以通過在幾代育種選擇中逐漸明朗化,最終導(dǎo)致公豬性欲低下。生殖器病變或肌肉骨骼不適引起的疼痛對(duì)性欲有很強(qiáng)的負(fù)面影響,陌生環(huán)境會(huì)降低性欲,陌生人在場(chǎng)或飼料的誘惑都可能使公豬精力分散,從而影響性欲。一旦公豬嗅聞母豬外陰、開始爬跨、陰莖勃起并伸出等現(xiàn)象出現(xiàn)時(shí),應(yīng)密切注意陰莖病變或損傷以及異常勃起。先天性和遺傳性疾病包括不完全勃起、陰莖發(fā)育不良、憩室以及持久性包皮系帶。
采集公豬精液主要有兩種方法:戴手套采精以及電刺激采精。相比手套采集法更好,方法較簡(jiǎn)單,同時(shí)也可以檢測(cè)公豬的性行為。用于人工采集精液的公豬經(jīng)訓(xùn)練后,可以對(duì)模型母豬爬跨,采精人員應(yīng)從后側(cè)悄悄接近公豬,不要接觸或驚嚇公豬。采精前應(yīng)首先摩擦包皮使包皮內(nèi)液體流出,防止污染采集的精液,用手套背側(cè)頂住公豬腹部,使陰莖插入戴手套的手掌中,在陰莖遠(yuǎn)側(cè)3~6 cm處施加一些壓力。如果刺激適當(dāng),公豬的陰莖會(huì)伸至最長(zhǎng)并變得非常安靜,隨后立刻射精,一旦陰莖頭部已經(jīng)完全堅(jiān)挺并且開始射精,持續(xù)至少3~7 min。當(dāng)抓握公豬陰莖時(shí)會(huì)出現(xiàn)假爬跨,應(yīng)任由其嘗試幾次假爬跨直到其積極開始再次試圖插入。精神緊張的公豬可能拒絕操作者握住其陰莖,有時(shí)嘗試多次也不能成功,在這種情況下,可讓公豬與母豬自然交配,在公豬陰莖插入母豬子宮頸內(nèi)開始射精時(shí)迅速將公豬陰莖抽出并握住,公豬會(huì)繼續(xù)射精,采取這種方法可以收集到大部分精液。使用預(yù)熱的溫水瓶(37 ℃)或泡沫塑料杯作為精液收集容器既方便又經(jīng)濟(jì)。先射出的5~15 mL 精液通常棄掉,公豬隨后會(huì)射出小部分凝固狀的精液,需要用雙層粗紗布來過濾(放置在收集容器口)此部分精液,因?yàn)槠淠痰陌牍腆w狀會(huì)影響后續(xù)的精液品質(zhì)檢驗(yàn)。而后公豬會(huì)射出乳白色至奶油色的富含精子的精液,最后射出含少量精子、大量液體與膠狀物質(zhì)的精液。應(yīng)謹(jǐn)慎地讓公豬完成射精,公豬會(huì)自主從手中抽回陰莖并停止爬跨,有些公豬在自主停止爬跨前會(huì)進(jìn)行2 次或更多次完整的射精。通過電刺激采精須麻醉公豬,建議注射麻醉劑進(jìn)行全身麻醉15~30 min。手部潤(rùn)滑后伸入直腸,清空糞便,再插入潤(rùn)滑的探針。使用海綿鉗和外科手術(shù)海綿,輕輕抓裹住距龜頭5~10 cm 遠(yuǎn)端的陰莖,將用此法射出的精液,收入罩在龜頭處透明的潔凈塑料袋中。
檢查公豬精液質(zhì)量的指標(biāo)包括精子活力、形態(tài)、密度和總精子數(shù)。在精液處理和分析中應(yīng)確保精液不受溫度、滲透壓以及pH變化的影響,所有與精液接觸的材料和設(shè)備都應(yīng)預(yù)先加熱到35~39 ℃。在收集精液后應(yīng)盡快檢測(cè)精子活力。使用光鏡觀察活動(dòng)精子總數(shù)是最好的判斷標(biāo)準(zhǔn)。為此,可在預(yù)熱的載玻片上滴5~10μL的精液,蓋上蓋玻片,然后在20 倍光鏡下,在總面積約5%的隨機(jī)視野內(nèi)檢測(cè)精子活力。
精子形態(tài)是評(píng)價(jià)生育能力的很有價(jià)值的指標(biāo),特別是評(píng)價(jià)畸形精子比例較高的精液。使用光鏡,染色樣片可提供足夠的對(duì)比度以評(píng)估精子形態(tài);使用較高分辨率的顯微鏡時(shí),可用戊二醛或福爾馬林做緩沖液對(duì)樣本進(jìn)行保存,最少應(yīng)檢測(cè)100(200更為合適)個(gè)精子運(yùn)動(dòng)時(shí)頭部、中段和主段的形態(tài)。精子形態(tài)可分為3 種類型,即正常型、頭部異常型與尾部異常型。進(jìn)一步可以檢測(cè)大量精子,明確主要異常點(diǎn)和次要異常點(diǎn),還可進(jìn)行精子頂體形態(tài)檢測(cè)。
測(cè)量精子濃度更直接的方法是血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或計(jì)數(shù)室,即將過濾的精液稀釋到1:200。先將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)充滿精液,時(shí)長(zhǎng)5 min。當(dāng)精子完全進(jìn)入視野中的計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi),使用顯微鏡觀察,精子計(jì)數(shù)與正常紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法相同。
在計(jì)算每毫升精子濃度后,可通過精子濃度乘以無凝膠的精液總體積(mL)來計(jì)算一次射精的總精子數(shù)。射精量可通過預(yù)熱的測(cè)量裝置或通過測(cè)定射精精液的重量(1 g 相當(dāng)于1 mL)來測(cè)量。通常采用電腦自動(dòng)化精液分析系統(tǒng)測(cè)定精子活力、精子濃度和精子形態(tài)。