秦 娜 寇秋霜 馬超越 關(guān)婷婷

(1.焦作市畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)中心,河南焦作 454003;2.焦作市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,河南焦作 454003)

1 高效液相色譜法概述

高效液相色譜法作為畜產(chǎn)品安全檢測(cè)的重要分析方法，需要在高壓條件下進(jìn)行樣品檢測(cè)，使樣品組分在固定相和流動(dòng)相間多次連續(xù)分配，從而利用兩相的不同分配系數(shù)和吸附力實(shí)現(xiàn)樣品分離。作為化學(xué)分離分析方法的一種，高效液相色譜法具有較高分析速度，能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化操作，結(jié)果的靈敏度較高。

2 高效液相色譜法在畜產(chǎn)品檢測(cè)中的應(yīng)用

2.1 在獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

未能科學(xué)飼養(yǎng)畜禽，將導(dǎo)致獸藥使用量超出需求量，不僅無法改善畜產(chǎn)品品質(zhì)和預(yù)防動(dòng)物疾病，還將造成畜產(chǎn)品中殘留過多未能代謝的藥物及其代謝中間產(chǎn)物，經(jīng)人體食用后將給消費(fèi)者身體健康帶來較大危害。按照國家標(biāo)準(zhǔn)SN/T 1751.3-2011，需要采用高效液相色譜法完成動(dòng)物源性食品中喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)[1]。在四環(huán)素類獸藥檢測(cè)上，可以聯(lián)合采用高效液相色譜法與質(zhì)譜法。目前在豬肉、雞肉、雞蛋等畜產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)中，都可以采用高效液相色譜法，如在雞肉中四環(huán)素類抗生素檢測(cè)上，可以采用乙腈和磷酸二氫鈉溶液作為流動(dòng)相，利用前超聲波脫氣，能夠快速完成獸藥殘留檢測(cè)，并且檢測(cè)結(jié)果可靠、準(zhǔn)確性高。在家禽寄生蟲病防治上，常采用伊維菌素，屬于廣譜抗寄生蟲藥。對(duì)動(dòng)物血清中的伊維菌素進(jìn)行測(cè)定，可以采用245nm紫外檢測(cè)波長，配合采用甲醇一水流動(dòng)相，方法檢出限最低能夠達(dá)到0.01mg/L，樣品回收率在94%-100%之間。

2.2 在違禁物檢測(cè)中的應(yīng)用

為謀取暴利，畜產(chǎn)品中也會(huì)被加入“瘦肉精”、“蘇丹紅”等違禁物。而食用大量殘留在畜產(chǎn)品中的“瘦肉精”，將導(dǎo)致人出現(xiàn)惡心、心慌等癥狀，患有甲亢、高血壓等疾病的人甚至?xí)l(fā)疾病，嚴(yán)重時(shí)將導(dǎo)致人死亡?！笆萑饩睂?shí)際為羥甲叔丁腎上腺素，在飼料中添加能夠加速動(dòng)物生長，促使動(dòng)物肌體瘦肉率得到提高，在動(dòng)物內(nèi)臟和組織中會(huì)發(fā)生蓄積性殘留，帶有嚴(yán)重毒副作用。應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行豬肉中“瘦肉精”的檢測(cè)，可以采用磷酸二氫鈉和甲醇作為流動(dòng)相，并且使用紫外線檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，只需較短時(shí)間就能完成樣品檢測(cè)[2]。在可食用性動(dòng)物產(chǎn)品進(jìn)出口方面，將呋喃唑酮列為禁用藥，因?yàn)樵摲N物質(zhì)具有較強(qiáng)致癌性。在雞蛋中呋喃唑酮檢測(cè)上，應(yīng)用基體固相擴(kuò)散和固相萃取技術(shù)完成呋喃唑酮提取和凈化后，可以利用高效液相色譜法實(shí)現(xiàn)分離檢測(cè)，回收率能夠達(dá)到80%-91%，結(jié)果具有良好重現(xiàn)性。

2.3 在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

在畜禽養(yǎng)殖期間，殘留農(nóng)藥將通過植物果實(shí)、水等途徑到達(dá)畜禽體內(nèi)，超出一定量后將在畜產(chǎn)品中蓄積，被人食用后容易誘發(fā)糖尿病、心腦血管疾病等各種疾病。從畜產(chǎn)品檢測(cè)情況來看，可能殘留的農(nóng)藥包含擬除蟲菊酯、有機(jī)磷等多種，可以采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。在有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)上，相較于傳統(tǒng)的氣相色譜法，高效液相色譜法能夠使樣品熱不穩(wěn)定問題得到解決，檢測(cè)結(jié)果精密度高，并且擁有較好重復(fù)性。在擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留檢測(cè)上，常用靈敏度較高的氣相色譜-質(zhì)譜法，但衍生試劑擁有較大毒性，并且過程繁瑣。采用高效液相色譜法，可以利用固相萃取技術(shù)完成樣品萃取，然后利用Zorbox SB C18色譜柱進(jìn)行分離檢測(cè)，方法檢出限能夠達(dá)到0.78μg/ml，在畜產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中應(yīng)用可以降低技術(shù)成本。但從總體來看，高效液相色譜法多與氣相色譜法及質(zhì)譜法聯(lián)合使用，能夠一次完成數(shù)百種殘留農(nóng)藥的檢測(cè)。

2.4 在有害物質(zhì)檢測(cè)中的應(yīng)用

在畜產(chǎn)品加工期間，可能引入有害的外源性物質(zhì)，并且產(chǎn)品本身可能存在生物毒素，如黃曲霉毒素等，從而給產(chǎn)品安全帶來威脅。針對(duì)外源性物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，采用高效液相色譜法能夠完成肉鴨加工表皮殘留松香的檢測(cè)，先利用固相萃取法完成樣品純化和富集，然后將縱酸當(dāng)成是標(biāo)記物，利用薄層色譜法完成松香殘留物檢測(cè)，處理過程相對(duì)復(fù)雜。在黃曲霉毒素檢測(cè)中，可以利用流動(dòng)相實(shí)現(xiàn)甲醇一水提取液凈化處理，樣品回收率能夠達(dá)到80%以上，因此相較于商業(yè)檢測(cè)方法費(fèi)用更低。在霉菌霉素檢測(cè)中，可以采用高效液相色譜法與質(zhì)譜聯(lián)用方式，具有較高的檢測(cè)靈敏度。實(shí)際在方法應(yīng)用過程中，需要結(jié)合生物毒素樣品特征進(jìn)行適合前處理方法的選擇，聯(lián)合采用高效液相色譜法和質(zhì)譜法能夠使基質(zhì)復(fù)雜、存在污染物干擾等問題得到解決，因此更能在畜產(chǎn)品毒素檢測(cè)中適用。

3 結(jié)論

綜上所述，在畜產(chǎn)品安全檢測(cè)方面，高效液相色譜法能夠在獸藥殘留檢測(cè)、違禁物檢測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用。但在實(shí)際應(yīng)用過程中，還應(yīng)結(jié)合樣品前處理需求進(jìn)行方法的科學(xué)應(yīng)用，必要時(shí)聯(lián)合采用其他檢測(cè)技術(shù)，以便高效、科學(xué)的開展畜產(chǎn)品檢測(cè)工作。