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        外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及組織ER表達(dá)情況及與子宮肌瘤的相關(guān)性研究

        2019-01-30 07:49:20李輝劉麗偉
        關(guān)鍵詞:平滑肌肌瘤外周血

        李輝,劉麗偉

        (平頂山市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)一科,河南 平頂山 467000)

        流行病學(xué)研究顯示,子宮肌瘤的發(fā)病率可達(dá)233~455/1萬(wàn)人左右[1]。臨床上子宮肌瘤治療后的總體病情緩解率較低,治療后的復(fù)發(fā)率較高。在探討子宮肌瘤的發(fā)病機(jī)制的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),細(xì)胞生物學(xué)因子的改變可能在促進(jìn)瘤體的增大、平滑肌細(xì)胞膜受體敏感性的改變等過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。其中胰島素樣生長(zhǎng)因子 (insulin like growth factor,IGF)的高表達(dá)能夠通過(guò)誘導(dǎo)平滑肌細(xì)胞的增殖,抑制平滑肌細(xì)胞的凋亡等,進(jìn)而促進(jìn)瘤體的形成[2,3];雌激素受體(estrogen receptor,ER)的激活,能夠通過(guò)誘導(dǎo)下游雌激素信號(hào)通路的上調(diào),增加瘤體纖維成分的增生,促進(jìn)包膜的形成[4,5]。部分研究在探討子宮肌瘤發(fā)病機(jī)制的過(guò)程中已經(jīng)揭示了ER受體與子宮肌瘤的發(fā)病關(guān)系,認(rèn)為高表達(dá)的ER受體是促進(jìn)肌瘤發(fā)生的重要風(fēng)險(xiǎn),但關(guān)于IGF的分析研究不足。為了進(jìn)一步揭示IGF等因子與子宮肌瘤的發(fā)病關(guān)系,從而為臨床上子宮肌瘤的綜合性治療提供理論基礎(chǔ),本次研究選取2016年2月-2017年8月在我院接受子宮部分切除術(shù)的患者為研究對(duì)象,探討了相關(guān)指標(biāo)的表達(dá),報(bào)告如下。

        1 對(duì)象與方法

        1.1 研究對(duì)象 選取2016年2月-2017年8月在我院接受子宮部分切除術(shù)的150例患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn):⑴年齡≥18周歲;⑵因子宮肌瘤或器官脫垂等因素行子宮部分切除者;⑶無(wú)其他盆腔病變者。排除標(biāo)準(zhǔn):⑴合并其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者;⑵合并惡性腫瘤疾病者。根據(jù)病理結(jié)果分為對(duì)照組和觀察組,其中對(duì)照組65例,年齡19~50歲,平均36.23±4.79歲;觀察組85例,年齡 20~48歲,平均36.25±4.38歲。兩組患者年齡分布等一般資料方面無(wú)明顯差別,具有可比性。本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^(guò),且所有患者均知情同意。

        1.2 檢測(cè)方法 采集空腹靜脈血約5ml并分作兩份,一份自然抗凝后以3000r/min離心10min,取上清液采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平,檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物有限公司,具體檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

        采用石蠟切片脫蠟至水,采用離子水進(jìn)行反復(fù)洗滌,加入牛奶液體封閉抗體,封閉時(shí)間為5min,加入ER蛋白抗體(鼠來(lái)源,ABCUM公司),37℃孵育2h,采用磷酸鹽緩沖液洗滌3次,滴加熒光染色標(biāo)記的二抗抗體 (購(gòu)自abcum公司),37℃孵育30min,加入磷酸鹽緩沖液進(jìn)行洗滌,采用南京凱基生物制劑公司生產(chǎn)的顯色劑進(jìn)行顯色,封片,鏡下觀察。

        1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) 觀察兩組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達(dá)。比較不同特征子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達(dá)的差異,分析影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達(dá)的因素。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)錄入后,采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)和計(jì)量資料分別采用例和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平的比較采用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析,ER表達(dá)情況的比較采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行處理,采用回歸分析法分析影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達(dá)的因素。P<0.05:差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽(yáng)性表達(dá)的比較 表1顯示,觀察組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組。

        表1 兩組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽(yáng)性表達(dá)的比較

        2.2 不同特征子宮肌瘤患者IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽(yáng)性表達(dá)的比較 表2顯示,未絕經(jīng)、肌瘤數(shù)目≥2個(gè)、肌瘤直徑≥5cm的子宮肌瘤患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽(yáng)性表達(dá)率較高,不同年齡、生育史、合并高血壓、糖尿病患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)差別。

        表2 不同特征子宮肌瘤患者IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽(yáng)性表達(dá)的比較

        2.3 影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達(dá)的因素分析 回歸分析結(jié)果顯示,是否絕經(jīng)、肌瘤數(shù)目是影響子宮肌瘤患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽(yáng)性表達(dá)率的因素。見(jiàn)表3。

        表3 -1影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ水平的因素分析

        表3 -2影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅱ水平的因素分析

        表3 -3影響子宮肌瘤患者ER表達(dá)的因素分析

        3 討論

        多種因素均可以影響平滑肌細(xì)胞增殖、新生血管的形成,促進(jìn)平滑肌細(xì)胞敏感性的上升和子宮肌瘤的發(fā)病。在年齡大于35歲的育齡期女性人群中,子宮肌瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)更高[6]。手術(shù)治療或者保守性的治療措施如高頻消融等技術(shù)的應(yīng)用,已經(jīng)在子宮肌瘤的常規(guī)治療領(lǐng)域取得了較為理想的治療效果,但其治療后的復(fù)發(fā)率較高,反復(fù)子宮肌瘤手術(shù)導(dǎo)致的經(jīng)濟(jì)、心理負(fù)擔(dān)及個(gè)體創(chuàng)傷等方面的問(wèn)題仍然較為嚴(yán)重[7,8]。本研究通過(guò)對(duì)于子宮肌瘤發(fā)病過(guò)程中相關(guān)蛋白水平因子的表達(dá)分析探討,一方面可以為臨床上降低子宮肌瘤的復(fù)發(fā)問(wèn)題提供理論參考,另外可以為臨床上子宮肌瘤患者的綜合性藥物治療或者疾病的預(yù)防等提供依據(jù)。

        IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ是生長(zhǎng)因子家族的重要成員,其對(duì)于血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞成分的促增殖作用,能夠提高子宮平滑肌細(xì)胞的持續(xù)性增殖及間質(zhì)成分的纖維化,并為肌瘤病灶增大過(guò)程中的新生血管的形成、血流灌注的保障等提供前提。相關(guān)基礎(chǔ)方面的研究也顯示,IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ能夠通過(guò)對(duì)于平滑肌細(xì)胞DNA的誘導(dǎo)擴(kuò)增作用,提高平滑肌細(xì)胞DNA上游轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子及增強(qiáng)子的活性,促進(jìn)平滑肌細(xì)胞紡錘體分離、提高細(xì)胞分裂的速度[9,10];ER主要表達(dá)于卵巢上皮、子宮內(nèi)膜上皮及子宮平滑肌細(xì)胞膜表面,在與配體結(jié)合的過(guò)程中,可通過(guò)下游ER/AKT信號(hào)通路或者M(jìn)APK信號(hào)通路的激活,提高平滑肌細(xì)胞持續(xù)性增殖形成瘤體的風(fēng)險(xiǎn)[11]。部分研究已經(jīng)揭示了ER的表達(dá)在影響到子宮肌瘤的形成、復(fù)發(fā)等方面中的價(jià)值[12],但對(duì)于IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的探討較少。

        本研究通過(guò)血清學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)及免疫組化分析研究方法發(fā)現(xiàn),在子宮肌瘤患者的血清中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表達(dá)濃度明顯上升,同時(shí)在肌瘤病灶組織中ER蛋白的表達(dá)水平也明顯上升,高于正常子宮平滑肌組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ或者ER的異常表達(dá)可能均影響到了子宮肌瘤的病情進(jìn)展或者發(fā)生過(guò)程[13]:⑴IGF-Ⅰ、IGF-II的高表達(dá)對(duì)于子宮肌瘤的增殖影響,能夠通過(guò)增加平滑肌細(xì)胞膜表面糖蛋白受體的敏感性,促進(jìn)平滑肌細(xì)胞增生修復(fù)過(guò)程的激活和平滑肌細(xì)胞間質(zhì)成分中Ⅳ型膠原纖維的增生;ER蛋白的陽(yáng)性表達(dá)程度的提高,可以影響肌瘤組織變性、體積的改變過(guò)程,并能夠協(xié)同刺激新生毛細(xì)管內(nèi)皮細(xì)胞的移行,促進(jìn)新生血管的形成,增加肌瘤病灶組織的血流灌注。王波等[14]研究者在探討了73例樣本量的子宮肌瘤患者,發(fā)現(xiàn)IGF-Ⅰ、IGF-II表達(dá)水平可平均上升25%以上,同時(shí)患者的肌瘤病灶范圍越大、病程越長(zhǎng)、治療后的肌瘤復(fù)發(fā)率越高,IGF-Ⅰ、IGF-II濃度越高。在探討相關(guān)指標(biāo)與子宮肌瘤患者臨床病理特征的關(guān)系過(guò)程中發(fā)現(xiàn),在未絕經(jīng)、肌瘤數(shù)量較多、體積較大的患者中,外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽(yáng)性率均較高,這提示了相關(guān)指標(biāo)與肌瘤患者的病情進(jìn)展密切相關(guān),而其中的機(jī)制則主要考慮與外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平對(duì)于肌瘤周邊平滑肌細(xì)胞的細(xì)胞周期的調(diào)控影響有關(guān),同時(shí)未絕經(jīng)患者體內(nèi)殘存的性激素活性較高,ER受體的活躍程度或者陽(yáng)性表達(dá)率也可顯著上升[15]。但本次研究并未發(fā)現(xiàn)合并有基礎(chǔ)性疾病如糖尿病或者高血壓對(duì)于子宮肌瘤患者體內(nèi)相關(guān)指標(biāo)的影響,提示基礎(chǔ)性疾病并不能影響到體內(nèi)生物學(xué)因子的活性。最后,本研究發(fā)現(xiàn)是否絕經(jīng)、肌瘤數(shù)目是影響子宮肌瘤患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ等的重要因素,進(jìn)一步提示了IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ等與子宮肌瘤患者的病情關(guān)系。

        綜上所述,子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和組織中ER陽(yáng)性表達(dá)率較高,且與患者是否絕經(jīng)和子宮肌瘤的大小、數(shù)目具有一定的相關(guān)性。

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