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        血清TPS、B7H4水平與結(jié)直腸癌患者腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系

        2019-01-30 07:49:16李艷玲莊競馮偉宇王娜
        關(guān)鍵詞:癌細(xì)胞分化直腸癌

        李艷玲,莊競,馮偉宇,王娜

        (鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院、河南省腫瘤醫(yī)院,河南 鄭州 450003)

        結(jié)直腸癌的發(fā)生,主要考慮與長期的腸道黏膜上皮細(xì)胞病理性異常增生有關(guān)[1]。臨床上隨訪觀察發(fā)現(xiàn),結(jié)直腸癌導(dǎo)致的患者病死率的上升較為顯著,患者的5年生存率可不足45%[2]。在探討結(jié)直腸癌發(fā)生的基礎(chǔ)性機(jī)制中,可以發(fā)現(xiàn)蛋白或者腫瘤相關(guān)因子的改變,能夠影響到結(jié)直腸上皮細(xì)胞的異常增生、凋亡抑制或者病理性核異型性。其中組織多肽特異性抗原(TPS)的表達(dá)能夠反應(yīng)多種腫瘤細(xì)胞的異常增生過程,在癌細(xì)胞核DNA持續(xù)性復(fù)制的過程中,部分凋亡的癌細(xì)胞可以顯著促進(jìn)TPS的分泌[3];負(fù)性共刺激分子(B7H4)是共刺激家族相關(guān)因子,其能夠提高癌細(xì)胞上游癌基因的轉(zhuǎn)錄活性,提高癌細(xì)胞的粘附和浸潤能力,并能夠加劇癌對于基底膜組織的突破和轉(zhuǎn)移的能力[4]。部分研究者探討了TPS、B7H4在其他消化系統(tǒng)腫瘤患者中的表達(dá)情況,認(rèn)為TPS、B7H4的表達(dá)上升與胃癌或者肝癌的發(fā)生具有一定的關(guān)聯(lián)[5,6],但在結(jié)直腸癌患者中的探討不足。為了深入揭示TPS、B7H4的表達(dá)與結(jié)直腸癌的關(guān)系,從而為臨床上結(jié)直腸癌的診療提供一定的理論方面的參考,本次研究選取2016年1月至2017年8月我院確診的結(jié)直腸癌患者100例,探討了血清中TPS、B7H4蛋白的表達(dá)情況,報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 選取2016年1月至2017年8月我院確診的結(jié)直腸癌患者100例(腫瘤組)、同期健康體檢對象100例(對照組)。腫瘤組,年齡33~72歲,平均 57.5±10.6歲,男 55例、女 45例,TNM分期:Ⅰ期21例、Ⅱ期40例、Ⅲ期30例、Ⅳ期9例;發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移52例;高分化30例、中分化38例、低分化32例;發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移23例。對照組,年齡 35~75歲,平均 55.5±13.2歲,男 50例、女 50例。兩組研究對象的年齡、性別比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

        納入標(biāo)準(zhǔn):⑴結(jié)腸癌、直腸癌患者的診斷以腸鏡取活組織病理學(xué)檢查作為金標(biāo)準(zhǔn);⑵對照組為健康體檢志愿者;⑶納入研究對象的年齡范圍在75歲以內(nèi);⑷本研究取得醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)、研究對象的知情同意。

        排除標(biāo)準(zhǔn):⑴已經(jīng)接受了手術(shù)治療;⑵轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌;⑶既往具有放化療病史;⑷甲狀腺功能疾病;⑸類風(fēng)濕、強(qiáng)直性脊柱炎、結(jié)締組織疾病。

        1.2 指標(biāo)檢測方法 采集患者入院后24h內(nèi)或者治療后6~8h內(nèi)的肘部靜脈血4ml,1500r/min離心15min,收集上清液,在每個聚苯乙烯板中加入上述液體0.1ml,4℃過夜孵育,加入磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次,每次3min,在每個聚苯乙烯板孔中加入TPS、B7H4蛋白抗體(1:800購自南京伯斯金生物公司),37℃孵育30min,加入磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次,每次3min,每孔中加入TMB溶液底物0.1ml,37℃20min, 加入2M硫酸0.05ml終止反應(yīng),采用DG5033A酶標(biāo)儀(南京華東電子科技公司)進(jìn)行OD值檢測。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組研究對象的血清TPS、B7H4水平比較腫瘤組患者的TPS、B7H4水平顯著的高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);見表 1。

        表1 兩組研究對象的血清TPS、B7H4水平比較()

        表1 兩組研究對象的血清TPS、B7H4水平比較()

        組別腫瘤組對照組t值P值n TPS(U/L) B7H4(μg/L)100 100 149.7±32.8 70.2±19.5 20.834 0.000 57.8±17.0 30.1±9.0 14.401 0.000

        2.2 不同病理學(xué)特征的結(jié)直腸癌患者的血清TPS、B7H4水平比較 在不同TNM分期、不同分化程度的結(jié)直腸癌患者血清TPS水平比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);見表 2。

        表2 不同病理學(xué)特征的結(jié)直腸癌患者的血清TPS水平比較()

        表2 不同病理學(xué)特征的結(jié)直腸癌患者的血清TPS水平比較()

        因素 n TNM分期Ⅰ期+Ⅱ期Ⅲ期+Ⅳ期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移TPS(U/L) t值 P 值-6.9340.000 61 39 130.6±31.7 173.5±27.6 1.3890.168是 否52 48 152.2±30.0 143.6±31.9分化程度高+中低分化遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移-7.3440.000 68 32 134.7±30.8 182.6±29.6 1.4980.137是 否23 77 156.8±24.7 146.2±31.1

        在不同TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌患者血清B7H4水平比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);見表 3。

        表3 不同病理學(xué)特征的結(jié)直腸癌患者的血清B7H4水平比較()

        表3 不同病理學(xué)特征的結(jié)直腸癌患者的血清B7H4水平比較()

        因素 n TNM分期Ⅰ期+Ⅱ期Ⅲ期+Ⅳ期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移B7H4(μg/L) t值 P 值-5.5430.000 61 39 50.6±16.3 68.4±14.6 5.1790.000是 否52 48 65.2±16.3 48.5±15.9分化程度高+中低分化遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移-1.2430.217 68 32 56.2±15.5 60.4±16.3 5.5480.000是 否23 77 73.2±14.9 51.8±16.6

        3 討論

        炎癥性因子的刺激、遺傳性基因的突變或者自身核DNA基因的錯配修復(fù)能力的下降,均能夠提高結(jié)直腸癌的發(fā)生率。臨床上結(jié)直腸癌的發(fā)生能夠?qū)е禄颊邜翰≠|(zhì)、高腫瘤負(fù)荷臨床癥狀的出現(xiàn),導(dǎo)致腫瘤患者短期內(nèi)病死率的提升[7]?,F(xiàn)階段主要通過癌胚抗原或者CA125等指標(biāo)評估結(jié)直腸癌的發(fā)病風(fēng)險,雖然相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)能夠在結(jié)直腸癌的發(fā)病診斷過程中發(fā)揮作用,但單獨(dú)依靠癌胚抗原或者CA125診斷的局限性較為明顯[8,9]。而本次研究對于結(jié)直腸癌患者血清中TPS、B7H4的表達(dá)分析探討,一方面可以為揭示結(jié)直腸癌的病情進(jìn)展提供理論方面的參考,同時還能夠?yàn)榻Y(jié)直腸癌患者的血清學(xué)診斷提供新的研究性指標(biāo)。

        腫瘤信號通路蛋白或者相關(guān)分子的改變,是促進(jìn)結(jié)直腸癌惡性腫瘤進(jìn)展的重要因素。TPS主要表達(dá)與消化道上皮、呼吸道上皮或者生殖道上皮組織,其結(jié)構(gòu)上包含了435個氨基酸結(jié)構(gòu),能夠通過結(jié)合癌細(xì)胞內(nèi)的NF-KB信號通路,進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞的持續(xù)性自我擴(kuò)增。相關(guān)研究還認(rèn)為,TPS的表達(dá)能夠提高腫瘤干細(xì)胞的特性,提高腫瘤干細(xì)胞對于增殖的維持作用[10];B7H4是共刺激相關(guān)分子,其能夠通過改變癌細(xì)胞的生物學(xué)特征,提高黏膜上皮細(xì)胞對于臨近正常組織的累及和浸潤能力,從而提高了早期腫瘤的發(fā)生速度,促進(jìn)了腫瘤患者中晚期的病情進(jìn)展[11]。部分研究者探討了TPS或者B7H4在直腸癌患者中的表達(dá)情況,認(rèn)為二者的高表達(dá)與直腸癌的發(fā)生具有一定的關(guān)系[12],但缺乏對于TPS、B7H4的表達(dá)與直腸癌患者臨床病理特征的分析。

        本次研究發(fā)現(xiàn)在結(jié)直腸癌患者血清中,TPS、B7H4蛋白的表達(dá)濃度均明顯上升,高于同期健康體檢組人群,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,提示了TPS、B7H4蛋白的高表達(dá)均能夠影響到結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展,分析其基礎(chǔ)方面的原因,則主要考慮由于TPS、B7H4的表達(dá)上升,能夠影響到癌細(xì)胞內(nèi)多種腫瘤信號通路如AKT的激活,提高了腫瘤細(xì)胞的持續(xù)性異常分化和凋亡抑制,進(jìn)而促進(jìn)了相關(guān)消化道惡性腫瘤的發(fā)生。部分研究者[5]在探討相關(guān)蛋白的表達(dá)過程中也發(fā)現(xiàn),TPS在直腸癌患者中的表達(dá)濃度可平均上升30%以上,同時在合并有明顯的惡病質(zhì)的患者中,TPS蛋白的表達(dá)濃度可持續(xù)上升。在探討TPS、B7H4蛋白的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系過程中發(fā)現(xiàn),在臨床分期較晚或者結(jié)直腸癌細(xì)胞分化程度較差的患者中,TPS蛋白的表達(dá)濃度可進(jìn)一步的上升,其表達(dá)濃度明顯高于臨床病理特征較低組,統(tǒng)計學(xué)差異顯著,提示了TPS蛋白的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者的病情密切相關(guān)。分析其基礎(chǔ)方面的原因,不同的文獻(xiàn)收集匯總后主要考慮與下列因素有關(guān)[13-15]:⑴TPS的表達(dá)上升能夠提高結(jié)直腸癌上皮細(xì)胞的浸潤深度,促進(jìn)了癌細(xì)胞對于臨近正常腸道組織的浸潤,從而促進(jìn)了臨床分期的進(jìn)展;⑵TPS蛋白的表達(dá)能夠?qū)е陆Y(jié)直腸上皮黏膜細(xì)胞的分化調(diào)控障礙,進(jìn)而導(dǎo)致低分化的發(fā)生。在探討B(tài)7H4的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者病情關(guān)系過程中發(fā)現(xiàn),發(fā)生了遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、臨床分期較晚或者發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中,血清B7H4水平比較高,提示了B7H4的表達(dá)與患者的病情同樣密切相關(guān),這主要由于B7H4的表達(dá)能夠?qū)е掳┘?xì)胞分化障礙的過程,影響到癌細(xì)胞對于盆腔淋巴結(jié)的粘附能力。臨床上可以通過隨訪檢測B7H4或者TPS的表達(dá),進(jìn)而評估結(jié)直腸癌患者的臨床病理特征進(jìn)展程度。

        綜上所述,在結(jié)直腸癌患者中,TPS、B7H4蛋白的表達(dá)均明顯上升,同時TPS、B7H4蛋白的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者的臨床病理特征密切相關(guān)。本次研究未能探討TPS、B7H4蛋白的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者的臨床預(yù)后的關(guān)系,存在一定的不足。

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