趙 陽，趙新望，徐文華，伍燕宏，羅 蔚，朱梓銘，鄭景輝

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué) 南寧 530001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院 南寧 530001）

干細胞是一類具有自我增殖能力與多向分化潛能的細胞，能在心臟微環(huán)境中分化成心肌細胞和血管內(nèi)皮細胞，從而修復(fù)壞死的心肌細胞，改善心臟功能和心肌血運，從根本上治療缺血性心臟病[1]。而通過中藥干預(yù)干細胞，能使干細胞起到更好的治療效果，根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，益氣溫陽活血方（主要是人參、黃芪、附子、丹參）能夠動員體內(nèi)干細胞增殖、分化；丹參、葛根、銀杏葉、藜蘆、龜板等藥不僅可以促進干細胞增殖，而且可以引導(dǎo)干細胞朝心臟定向遷移；川芎、鹿茸、三七、黃芪、淫羊藿、丹參、地黃等藥有誘導(dǎo)干細胞朝心肌細胞定向分化的作用[2-5]。目前，通過中醫(yī)藥干預(yù)干細胞治療缺血性心臟病是當(dāng)前研究的熱點之一。本文通過文獻計量學(xué)分析，探索該領(lǐng)域的研究的現(xiàn)狀與學(xué)術(shù)前沿，并且希望能夠為該領(lǐng)域今后的相關(guān)研究提供一些參考。

1 資料與方法

1.1 資料來源與檢索策略

檢索中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫和PubMed數(shù)據(jù)庫中收錄的關(guān)于中醫(yī)藥干預(yù)干細胞治療缺血性心臟病的文獻。檢索時間均從建庫至2018-01-31。具體檢索策略如圖1、圖2。

1.2 分析方法

應(yīng)用書目共現(xiàn)分析系統(tǒng)軟件（BICOMB）[6]提取檢索文獻的發(fā)表的年代、期刊國家、語種、及高頻詞，生成高頻詞之間的共現(xiàn)矩陣，運用IBM.SPSS.V21.統(tǒng)計分析軟件對高頻詞進行聚類分析，并生成聚類圖。并用CytoScape3.6.1軟件[7]將高頻詞共現(xiàn)矩陣?yán)L制成共現(xiàn)分析圖。

2 結(jié)果

2.1 文獻檢索的結(jié)果

中國知網(wǎng)檢索結(jié)果如下：#1為167472篇，#2為61579篇，#3為1980270篇，#4為116篇。

PubMed檢索結(jié)果如下：#1為250010篇，#2為129828篇，#3為151055篇，#4為44篇。

2.2 文獻的年代、發(fā)表期刊的國家、語種的分布

所有檢索出的文獻發(fā)表時間均是從2005年至2017年（表1）。從中國知網(wǎng)檢索的文獻全部發(fā)表在國內(nèi)的期刊上，發(fā)表的語種均為中文；從PubMed檢索的文獻所發(fā)表的期刊分布各國，分別是美國（21篇）、中國（9篇）、英格蘭（6篇）、荷蘭（5篇）、澳大利亞（1篇）、愛爾蘭（1篇）、日本（1篇），其中36篇為英文文獻，9篇為中文文獻（表2）。

2.3 高頻詞的統(tǒng)計

中國知網(wǎng)（CNKI）數(shù)據(jù)庫共檢索116篇文獻，提取關(guān)鍵詞250個，頻次≥3次的高頻詞有43個，占所有關(guān)鍵詞的17.2%，高頻詞的頻次占所有關(guān)鍵詞頻次的58.18%（見表3）。PubMed數(shù)據(jù)庫共檢索文獻44篇，提取主題詞208個，頻次≥3的高頻詞有35個，占所有主題詞的16.8%，高頻詞的頻次占所有主題詞頻次的55.36%（表4）。

2.4 高頻詞的共現(xiàn)

中國知網(wǎng)檢索文獻的高頻詞之間共有226對共現(xiàn)關(guān)系，共有34對共現(xiàn)關(guān)系是與中藥、益氣溫陽活血方、丹參、丹參注射液、三七總皂苷、地黃低聚糖這6個中醫(yī)藥相關(guān)的高頻詞發(fā)生的，這34對共現(xiàn)關(guān)系發(fā)生的頻次排名前10的是：①中藥-動員、②中藥-歸巢、③中藥-分化、④益氣溫陽活血-心功能、⑤地黃低聚糖-旁分泌、⑥三七總皂苷-大鼠、⑦丹參注射液-VECF、⑧丹參注射液-CD31、⑨丹參注射液-干細胞移植、⑩丹參-心功能（圖3）。

圖1 中國知網(wǎng)（CNKI）數(shù)據(jù)庫檢索策略

圖2 PubMed數(shù)據(jù)庫檢索策略

PubMed檢索文獻的高頻詞之間共有355對共現(xiàn)關(guān)系，共有28對共現(xiàn)關(guān)系是與Chinese Herbal（中草藥）這個中醫(yī)藥相關(guān)的高頻詞發(fā)生的，這28對共現(xiàn)關(guān)系發(fā)生的頻次排名前10的是：①Chinese Herbal-Cell Proliferation、②Chinese Herbal-Paracrine Communication、③ Chinese Herbal-Animals、④ Chinese Herbal-Cell Differentiation、⑤ Chinese Herbal-Cells,Cultured、⑥Chinese Herbal-Mesenchymal Stem Cell Transplantation、⑦Chinese Herbal-Mice、⑧Chinese Herbal-Stem Cell Transplantation、⑨ Chinese Herbal-Disease Models,Animal、⑩Chinese Herbal-Signal Transduction（圖4）。

2.5 高頻詞的聚類分析

運用IBM.SPSS.V21.統(tǒng)計分析軟件聚類分析中國知網(wǎng)檢索文獻的高頻詞和PubMed檢索文獻的高頻詞，并生成聚類圖（圖5，圖6）。

表1 中國知網(wǎng)（CNKI）數(shù)據(jù)庫和PubMed數(shù)據(jù)庫檢索文獻的發(fā)表年代

表2 中國知網(wǎng)（CNKI）數(shù)據(jù)庫和PubMed數(shù)據(jù)庫檢索文獻發(fā)表期刊的國家

表3 中國知網(wǎng)高頻詞的頻次分布

表4 PubMed高頻詞的頻次分布

圖3 中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫高頻詞共現(xiàn)圖

圖4 PubMed數(shù)據(jù)庫高頻詞共現(xiàn)圖

3 討論

本研究文獻分析顯示發(fā)表年代均是在2005年及以后，2005-2010年這一階段，發(fā)文數(shù)量呈快速增長的趨勢，之后2011-2017年這一階段，發(fā)文數(shù)量逐漸趨于穩(wěn)定，提示目前該領(lǐng)域的研究也逐漸趨于穩(wěn)定。而發(fā)表在國內(nèi)期刊上的文獻遠遠多于發(fā)表在國外期刊上的文獻，說明我國在該領(lǐng)域的研究已經(jīng)占有相當(dāng)?shù)牡匚缓陀绊懥Α?/p>

圖5 中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫高頻詞聚類圖

中國知網(wǎng)檢索的文獻中，與中醫(yī)藥相關(guān)的高頻詞共6個，分別為中藥、益氣溫陽活血方、丹參、丹參注射液、三七總皂苷、地黃低聚糖；PubMed檢索的文獻中，也包含與中醫(yī)藥相關(guān)的高頻詞Chinese Herbal（中草藥）。這說明在中醫(yī)藥干預(yù)干細胞治療缺血性心臟病的研究領(lǐng)域，這幾個方面是研究熱點。

中國知網(wǎng)檢索文獻的高頻詞之間的共現(xiàn)關(guān)系中，與中醫(yī)藥相關(guān)的有34對。統(tǒng)計共現(xiàn)關(guān)系出現(xiàn)頻次前10的共現(xiàn)關(guān)系，可以更具體、更詳細的了解在中醫(yī)藥干預(yù)干細胞治療缺血性心臟病的研究領(lǐng)域中，中醫(yī)藥研究范圍內(nèi)的研究熱點，為我們今后的研究提供參考。10對共現(xiàn)關(guān)系具體如下：①中藥-動員：目前通過干細胞治療缺血性心肌病主要有兩種途徑，一種是干細胞體外移植途徑，另外一種就是干細胞體內(nèi)動員途徑。由于心臟自身干細胞在心臟原位存在、無需歸巢并且能夠特異性分化為心肌細胞，而且干細胞體內(nèi)動員途徑能夠避免細胞移植和移植后存活及歸巢等問題，因此，通過藥物動員體內(nèi)的干細胞已成為進展最快的研究之一[8]。研究表明，中藥益氣溫陽方（主要組成為人參、丹參）具有較好的動員干細胞的作用，其動員作用較粒細胞集落刺激因子持久[9]。②中藥-歸巢：干細胞主要位于干細胞巢內(nèi)，當(dāng)發(fā)生心肌損傷時，促使干細胞遷移到心臟，是其分化為心肌細胞的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，研究表明，藜蘆、龜板[10,11]等均有促進干細胞遷移與歸巢的作用。③中藥-分化：干細胞在體內(nèi)朝心肌細胞定向分化是干細胞治療缺血性心臟病的關(guān)鍵，研究表明，川芎、鹿茸、三七、黃芪、淫羊藿、丹參、地黃等藥都有誘導(dǎo)干細胞朝心肌細胞定向分化的作用[3]。④益氣溫陽活血-心功能：研究表明，中藥益氣溫陽方（主要組成為人參、丹參）具有較好的動員干細胞的作用[9]，從而修復(fù)壞死的心肌細胞，改善心功能。⑤地黃低聚糖-旁分泌：地黃低聚糖是從地黃中提取的低分子量多糖成分，試驗證明，地黃低聚糖可以誘導(dǎo)干細胞分化為心肌樣細胞[12]，其機制可能主要通過促進干細胞旁分泌，分泌多種血管生成因子、抗細胞凋亡因子和促有絲分裂因子等細胞因子，從而發(fā)揮改善心臟功能的作用[13]。但在目前的條件下，移植到心臟的存活的干細胞向心肌細胞定向分化的效率仍然有限，值得進一步去研究。⑥三七總皂苷-大鼠：研究表明，三七總皂苷作為三七的主要成分，具有誘導(dǎo)干細胞朝心肌細胞定向分化的作用[5]，通過對大鼠的動物實驗，是目前驗證其干預(yù)作用的最普遍的方法。⑦丹參注射液-VECF；⑨丹參注射液-CD31；⑧丹參注射液-干細胞移植；⑩丹參-心功能：這4個共現(xiàn)關(guān)系都是與丹參有關(guān)的，研究表明，丹參既可以動員干細胞在體內(nèi)增殖，也可以促進干細胞在體外增殖，而且其主要成分丹酚酸B具有誘導(dǎo)干細胞朝心肌細胞定向分化的作用，因此丹參被廣泛用于干細胞治療缺血性心臟病的干預(yù)，具有修復(fù)心肌細胞及血管內(nèi)皮細胞，改善心功能的作用[5,14,15]。

PubMed檢索文獻的高頻詞之間的共現(xiàn)關(guān)系中，與Chinese Herbal（中草藥）相關(guān)的共現(xiàn)關(guān)系共有28對，統(tǒng)計共現(xiàn)關(guān)系出現(xiàn)頻次前10的共現(xiàn)關(guān)系，其中前8組共現(xiàn)關(guān)系分別與中國知網(wǎng)檢索文獻的高頻詞之間的共現(xiàn)關(guān)系相同或者相近，第⑨、⑩對共現(xiàn)是Chinese Herbal（中草藥）--Disease Models，Animal（動物疾病模型）與Chinese Herbal（中草藥）--Signal Transduction（信號傳導(dǎo)）：在動物疾病模型和信號傳導(dǎo)方面的研究，鄭景輝課題組從中醫(yī)微觀辨證角度出發(fā)，用動態(tài)、聯(lián)系、發(fā)展的多個現(xiàn)代化指標(biāo)合參條件下的“微環(huán)境”對MSCs進行干預(yù)誘導(dǎo)，結(jié)果表明體外模擬大鼠心血瘀阻證微環(huán)境能誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞分化為心肌樣細胞，實驗首次把微觀辨證的各種微觀指標(biāo)動態(tài)、有機的結(jié)合起來，觀察了在模擬心血瘀阻征微環(huán)境下，MSCs能稟受微環(huán)境信號刺激，接受這些遺傳信息，從而孕育表達心肌的表型，進而向心肌樣細胞分化[16]。

根據(jù)中國知網(wǎng)檢索文獻的高頻詞生成的聚類圖，如圖5，可將高頻詞按3級樹狀圖從上到下依次分為7組。其中第1組、第2組、第3組中沒有與中醫(yī)藥相關(guān)的高頻詞，第4組的高頻詞“丹參”與“心功能”、“細胞凋亡”聯(lián)系密切，可指導(dǎo)我們在研究丹參干預(yù)干細胞治療缺血性心臟病時，應(yīng)注意心功能的改善和凋亡壞死細胞的修復(fù)；第5組中高頻詞“中藥”、“益氣溫陽活血方”與“動員”、“歸巢”聯(lián)系密切，顯示出益氣溫陽活血方在動員體內(nèi)干細胞增殖及引導(dǎo)干細胞朝心臟遷移、歸巢方面有獨到之處，可以是我們今后研究的主要方向之一；第5組中高頻詞“三七總皂苷”與“心肌梗塞”聯(lián)系密切，也是值得我們進一步探究的；第6組中高頻詞“地黃低聚糖”與“旁分泌”聯(lián)系密切，當(dāng)前，不少研究者認(rèn)為，地黃低聚糖可能主要通過促進干細胞旁分泌來改善心功能，關(guān)于地黃低聚糖對干細胞的作用機理[13]，有待進一步研究；第7組僅“丹參注射液”1個高頻詞，丹參有著很好的“活血祛瘀”功效，是歷來中醫(yī)治療胸痹的不可或缺的藥物，研究證明丹參的主要成分丹酚酸B能體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化[14,15]，在今后該領(lǐng)域的研究中，丹參是不可忽視的藥物。

根據(jù)PubMed檢索文獻的高頻詞生成的聚類圖，如圖6，可將高頻關(guān)鍵詞按3級樹狀圖從上到下依次分為8組。Chinese Herbal（中草藥）所在第7組，該組還涵 蓋 了 Myocytes，Cardiac、Cell Differentiation、Signal Transduction、Rats、Rats，Sprague-Dawley、Cells，Cultured、Paracrine Communication、Mesenchymal Stromal Cells、MesenchymalStem CellTransplantation、 Animals、Myocardial Infarction、Male、Bone Marrow Cells、Time Factors這14個高頻詞，為系統(tǒng)的研究中醫(yī)藥干預(yù)干細胞治療缺血性心臟病提供了比較全面的參考。