李晞， 鄭樂(lè)婷， 石昌荊， 王芃， 徐涓娟， 王健△

廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 1檢驗(yàn)科， 2風(fēng)濕免疫科， 3醫(yī)療保險(xiǎn)科， 4體檢中心(廣西南寧 530021)

自身抗體是以自身抗原成分為靶抗原產(chǎn)生的免疫球蛋白，是自身免疫應(yīng)答和自身免疫性疾病(autoimmune diseases，AID)最重要的特征。近年來(lái)，自身抗體在臨床上已被廣泛應(yīng)用于AID的診斷、鑒別診斷及治療預(yù)后[1]。另外，自身抗體的預(yù)警作用也被各國(guó)學(xué)者相繼報(bào)道[2-3]。自身抗體先于臨床癥狀出現(xiàn)前若干年就已經(jīng)出現(xiàn)在患者血清中[4]，這對(duì)患者的早期診斷、早期干預(yù)、早期治療、提高患者的預(yù)后及生存質(zhì)量有至關(guān)重要的意義。本研究擬通過(guò)對(duì)健康體檢者進(jìn)行自身抗體篩查，并對(duì)自身抗體結(jié)果異?；颊哌M(jìn)行半年以上的臨床隨訪，明確自身抗體在健康體檢人群中的陽(yáng)性率，探討篩查自身抗體對(duì)健康體檢人群的預(yù)警作用及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014年3月至2016年12月廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢中心1 157名健康體檢人群，年齡14～86歲，男767名，占66.3%，女390名，占33.7%。體檢人員均進(jìn)行自身抗體相關(guān)項(xiàng)目、常規(guī)血液、免疫學(xué)指標(biāo)等檢測(cè)。所有人群均采集清晨空腹靜脈血，并分離血清備用。所有項(xiàng)目均在抽血當(dāng)天完成檢測(cè)。

1.2 方法 采用間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence assay，IIF)檢測(cè)血清抗核抗體(antinuclear antibody，ANA)、抗雙鏈DNA(double stranded DNA，dsDNA)抗體，線性免疫印跡技術(shù)(line immunoassay，LIA)檢測(cè)抗核抗體譜(ANAs)。ANA，抗dsDNA抗體和ANAs均采用試劑盒(德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司)，LIA采用全自動(dòng)免疫印跡儀(德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司)及EUROLineScan自動(dòng)判別軟件(德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司)。ANA抗體滴度為1∶100時(shí)判讀為弱陽(yáng)性，>1∶100為陽(yáng)性，并記錄熒光核型?？筪sDNA抗體滴度為1∶10判讀為弱陽(yáng)性，>1∶10為陽(yáng)性。ANAs結(jié)果≤5為陰性，6～10為弱陽(yáng)性，≥11為陽(yáng)性。HITACHI 7600全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)免疫學(xué)功能指標(biāo)C反應(yīng)蛋白(CRP)、IgG、IgA、IgM。MONITOR100血沉分析儀檢測(cè)血沉(ESR)。

2 結(jié)果

2.1 1 157名體檢者自身抗體的陽(yáng)性率 1 157名體檢者ANA陽(yáng)性率為7.35%，其中女性陽(yáng)性率高于男性陽(yáng)性率(12.56%vs4.69%，2=23.528，P=0.000)，ANAs的總體陽(yáng)性率為3.80%，其中女性陽(yáng)性率高于男性陽(yáng)性率(5.90%vs2.73%，2=7.055，P=0.008)。抗dsDNA抗體及ANAs各項(xiàng)特異性抗體在男性和女性健康體檢者中的陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 1 157名健康體檢者自身抗體結(jié)果 例(%)

注：抗Sm抗體、抗組蛋白抗體、抗核糖體抗體無(wú)陽(yáng)性，未做統(tǒng)計(jì)

2.2 100例自身抗體異常者隨診情況 對(duì)100名自身抗體檢測(cè)結(jié)果異常患者進(jìn)行臨床隨訪，每3～6個(gè)月隨訪1次，隨訪持續(xù)時(shí)間為0.5～2.5年，隨訪過(guò)程中，確診AID患者14例，其中女10例，占10%，男4例，占4%。確診非AID患者24例，其中女10例，占10%，男14例，占14%。另外62名體檢者臨床隨診未能確診任何疾病，囑其繼續(xù)臨床隨診。見(jiàn)表2。

2.3 確診AID與非AID患者自身抗體與免疫學(xué)功能檢測(cè)分析 AID組ANA弱陽(yáng)性與陽(yáng)性分別占42.9%和57.1%，ANAs陽(yáng)性率為78.6%，非AID患者ANA弱陽(yáng)性與陽(yáng)性分別為66.7%和25%，ANAs陽(yáng)性率為16.6%。AID組免疫學(xué)指標(biāo)CRP和ESR均高于非AID組(P<0.05)。IgG、IgA、IgM在兩組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表3。

3 討論

隨著醫(yī)務(wù)工作者認(rèn)識(shí)水平的提高、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的推廣普及，自身抗體在臨床的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，確診AID的患者越來(lái)越多?，F(xiàn)今自身抗體已成為了AID的診斷性生物標(biāo)志物，并且與疾病的分化、臨床轉(zhuǎn)歸及治療預(yù)后密切相關(guān)[1]。此外，隨著人們健康意識(shí)的增加，研究者在研究自身抗體診斷價(jià)值的同時(shí)，進(jìn)一步挖掘了自身抗體的預(yù)警價(jià)值。Arbuckle等[4]追蹤系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者確診前的血清標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)自身抗體出現(xiàn)異常要早于臨床確診前9.4年，Jonsson等[3]也證實(shí)早在原發(fā)性干燥綜合征患者出現(xiàn)臨床癥狀前3.7年，這些患者血清中就可以檢測(cè)到ANA及抗SSA、SSB等疾病特異性自身抗體。而原發(fā)性膽汁性肝硬化患者甚至可以在臨床發(fā)病前十幾年就存在抗線粒體抗體[5]。這些研究表明，自身抗體的篩查為預(yù)防及預(yù)測(cè)AID的過(guò)程提供了線索。

表2 100例自身抗體異常者隨診情況及臨床診斷

項(xiàng)目例數(shù)ANA(±)ANA(+)ANAs(+)CRP(mg/L)ESR(mm/h)IgG(g/L)IgA(g/L)IgM(g/L)AID患者14681110.80±7.0523.20±11.2913.73±4.612.46±1.281.23±0.66非AID患者2416640.32±0.136.13±3.3812.41±1.832.21±1.171.22±0.86U值3.3245.550.8230.4140.22P值0.0290.0000.4220.6850.985

本研究對(duì)1 157名健康體檢者進(jìn)行血清自身抗體檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果異常者囑其臨床隨診。結(jié)果顯示，ANA總體陽(yáng)性率為7.35%，女性陽(yáng)性率要高于男性陽(yáng)性率(P<0.05)，ANAs總體陽(yáng)性率為3.8%，女性陽(yáng)性率要高于男性陽(yáng)性率(P<0.05)。本研究ANA及ANAs的陽(yáng)性率均低于國(guó)內(nèi)學(xué)者胡朝軍等[2]的研究結(jié)果11.27%和8.69%，其可能的原因是環(huán)境因素及人群差異。AID的發(fā)病是環(huán)境因素、遺傳因素及個(gè)體因素共同作用的結(jié)果[6]，研究所處的地域不同，環(huán)境因素不同，導(dǎo)致人群產(chǎn)生抗體的陽(yáng)性率也不相同。100名自身抗體異?；颊邍谄?～6個(gè)月進(jìn)行1次臨床隨診，在隨診過(guò)程中，經(jīng)風(fēng)濕免疫科和內(nèi)科全面系統(tǒng)診療，最終14例患者確診為AID，占1.21%，這提示在本研究中，ANA和(或)疾病特異性ANAs在AID患者臨床確診前就已存在患者血清中。自身抗體對(duì)疾病的臨床表現(xiàn)發(fā)展的預(yù)測(cè)價(jià)值部分與自身抗體的致病作用有關(guān)[7]。有文獻(xiàn)報(bào)道，將自身抗體注射到動(dòng)物模型體內(nèi)會(huì)引起動(dòng)物模型臨床表現(xiàn)的快速發(fā)生[8]。另外一些致病性自身抗體，如抗內(nèi)因子抗體，直接影響維生素B12的攝取，隨后的維生素B12缺乏癥和惡性貧血的發(fā)生發(fā)展則需要時(shí)間來(lái)進(jìn)行[9]。更甚者，自身抗體對(duì)于疾病的預(yù)測(cè)價(jià)值，不僅局限于抗體的數(shù)量，而且各種抗體的含量水平，如抗胰島細(xì)胞抗體、抗谷氨酸脫羧酶等都可以作為風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分準(zhǔn)確預(yù)測(cè)1型糖尿病的發(fā)生[10]。

自身抗體可出現(xiàn)在多種非AID中，如病毒性肝炎[11]、癌癥[12]等。本研究中有24名隨診體檢者確診非AID，占2.07%，包括腎臟疾病、甲狀腺疾病、消化系統(tǒng)疾病等。非AID中的自身抗體在疾病的發(fā)生過(guò)程中僅作為某些組織受損的標(biāo)志，或是由微生物感染所致[13]。另外，62名隨診的體檢者未發(fā)現(xiàn)異常，僅出現(xiàn)自身抗體結(jié)果異?；蛱幱趤喗】禒顟B(tài)，50歲以上體檢者約為2/3。隨著年齡的增長(zhǎng)，體內(nèi)自身抗原暴露的機(jī)會(huì)增大，體內(nèi)產(chǎn)生自身抗體的概率也相應(yīng)增加。而此類生理學(xué)自身抗體效價(jià)低，不足以引起自身組織的破壞，且可以協(xié)助清除衰老蛻變的自身成分，起到免疫自穩(wěn)效應(yīng)。

確診AID患者自身抗體結(jié)果顯示，ANA弱陽(yáng)性與陽(yáng)性率分別為42.9%和57.1%，ANAs的陽(yáng)性率為78.6%，這提示ANA作為篩查實(shí)驗(yàn)，出現(xiàn)弱陽(yáng)性結(jié)果時(shí)也需要引起注意，聯(lián)合疾病特異性ANAs或器官特異性自身抗體檢測(cè)可提高疾病診斷的陽(yáng)性率。CRP和(或)ESR作為免疫活動(dòng)功能常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)，AID患者均高于非AID患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明自身抗體聯(lián)合CRP和ESR對(duì)于健康體檢者篩查AID有一定的臨床意義。此外，Ig亞型卻沒(méi)有明顯的差異，可能的原因是不同的AID其Ig變化的類型及程度不同，導(dǎo)致無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異。

綜上所述，自身抗體可在AID臨床確診前出現(xiàn)在患者體內(nèi)，自身抗體對(duì)AID有預(yù)警作用。在健康體檢中將自身抗體列入常規(guī)檢查項(xiàng)目是非常必要和有價(jià)值的，特別是免疫功能常規(guī)指標(biāo)，如CRP、ESR等出現(xiàn)異常時(shí)，要警惕AID的發(fā)生。自身抗體篩查異常者建議臨床隨診，風(fēng)濕免疫科醫(yī)生需提供相關(guān)的隨訪咨詢及健康教育，以便對(duì)AID早期發(fā)現(xiàn)、早期干預(yù)、早期治療。