付強(qiáng) ，陳培培，李紹山，劉波，周慶九

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科；2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院臨床營(yíng)養(yǎng)科，新疆 烏魯木齊 830054)

星形細(xì)胞瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的腫瘤，約占神經(jīng)上皮組織腫瘤的61.4%，此類(lèi)腫瘤起源于神經(jīng)上皮組織，屬于膠質(zhì)瘤的一種，是由星形細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的具有特定形態(tài)的腫瘤，多發(fā)于大腦半球、小腦、腦干等部位[1]。臨床研究指出，星形細(xì)胞瘤具有高侵襲性和浸潤(rùn)性，手術(shù)切除難以根治，復(fù)發(fā)率較高，其中的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者生存期均為14個(gè)月[2]，因而早期確診及治療對(duì)該病具有重要意義。星形細(xì)胞瘤傳統(tǒng)病理診斷方式包括影像學(xué)、組織病理診斷等，其中影像學(xué)難以準(zhǔn)確區(qū)分低級(jí)與高級(jí)病變，病理學(xué)診斷屬于有創(chuàng)操作，且診斷時(shí)間較長(zhǎng)，隨著近些年分子生物學(xué)的發(fā)展，使星形細(xì)胞瘤的診斷與預(yù)后判斷出現(xiàn)了新的變革[3-4]。磷酸化絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶(p-AKT)在人體腦組織、心臟及肺組織中表達(dá)較多，肌酸肌醇3激酶(PI3K)能夠通過(guò)激活A(yù)KT來(lái)達(dá)到誘發(fā)腫瘤細(xì)胞增殖、抑制其凋亡[5]。本文作者通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，p-AKT、PI3K的高表達(dá)與星形細(xì)胞瘤患者浸潤(rùn)深度、TNM分期、腫瘤分化程度、是否出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移及患者生存期間存在相關(guān)性，可以通過(guò)對(duì)p-AKT、PI3K表達(dá)的檢測(cè)來(lái)判斷星形細(xì)胞瘤患者預(yù)后，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年1月于本院進(jìn)行治療的76例星形細(xì)胞瘤患者為研究對(duì)象，其中男性35例，女性41例，年齡26～72歲，平均年齡(41.06±1.59)歲，吸煙者36例，不吸煙者40例，TNM分期中I期患者31例，II期22例，III期23例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49例，未轉(zhuǎn)移27例。同時(shí)選擇同期來(lái)本院體檢的76例健康者的癌旁組織作為對(duì)照組，其中男性34例，女性42例，年齡27～74歲，平均年齡(42.12±1.23)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)納入對(duì)象均經(jīng)病理學(xué)診斷為星形細(xì)胞瘤；(2)病歷資料齊全；(3)未接受放化療治療者；(4)未接受根治術(shù)者；(5)經(jīng)院內(nèi)委員會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施調(diào)研；(6)患者及其家屬對(duì)本次調(diào)研過(guò)程、方法、原理清楚明白并簽署知情同意書(shū)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并精神疾患者；(2)合并意識(shí)障礙者；(3)合并其他器質(zhì)性疾病如冠心病、肺炎者；(4)合并凝血功能障礙者；(5)依從性較差者。

1.2 方法

取納入對(duì)象星形細(xì)胞瘤部位及癌旁組織(距離癌變部位距離>5 cm)樣本，使用10%的甲醛進(jìn)行固定，而后石蠟包埋制作病理蠟塊，使用蘇木精-伊紅進(jìn)行染色處理，讀取制作的樣本蠟片，判斷樣本腫瘤類(lèi)型、分化程度、浸潤(rùn)深度、是否出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等；對(duì)制作的癌變部位及癌旁組織的切片進(jìn)行免疫組化染色，使用光學(xué)顯微鏡對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行觀察，結(jié)果由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)生進(jìn)行讀取，高倍視

野(×400)下隨機(jī)選取5個(gè)視野，計(jì)算染色陽(yáng)性細(xì)胞所占比例：≤10%為0分，11%～25%為1分，25%～50%為2分，>50%為3分；根據(jù)其染色強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)分：無(wú)著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，褐色為3分；將兩種分?jǐn)?shù)相乘可以得到最終染色得分，其中p-AKT評(píng)分中位數(shù)為4分，PI3K評(píng)分中位數(shù)為6分，得分高于中位數(shù)記為高表達(dá)，低于中位數(shù)記為低表達(dá)[6]。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)癌變組織與癌旁組織p-AKT及PI3K表達(dá)陽(yáng)性率進(jìn)行比對(duì)，每次選取5個(gè)視野，得分進(jìn)行平均計(jì)算，計(jì)算組織表達(dá)陽(yáng)性程度；對(duì)癌變組織p-AKT及PI3K表達(dá)與癌組織浸潤(rùn)深度、TNM分期、腫瘤分化程度及是否出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)性進(jìn)行分析；對(duì)p-AKT及PI3K表達(dá)相關(guān)性進(jìn)行分析；對(duì)p-AKT及PI3K表達(dá)與患者生存期關(guān)系進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 不同組織p-AKT及PI3K表達(dá)差異

經(jīng)觀察比較，癌旁組織p-AKT及PI3K表達(dá)陽(yáng)性率明顯低于癌變組織，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 不同組織p-AKT及PI3K表達(dá)差異[n(%)]

2.2 癌變組織p-AKT及PI3K表達(dá)與其臨床病理關(guān)系

經(jīng)分析對(duì)比，發(fā)現(xiàn)p-AKT及PI3K表達(dá)與患者癌變組織浸潤(rùn)深度、TNM分期、腫瘤分化程度及是否出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性(P<0.05)，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

2.3 p-AKT及PI3K表達(dá)相關(guān)性分析

經(jīng)相關(guān)性分析，p-AKT及PI3K的表達(dá)存在一定相關(guān)性(r=0.694，P=0.015)。

表2 癌變組織p-AKT及PI3K表達(dá)與其臨床病理關(guān)系

2.4 不同p-AKT及PI3K表達(dá)與患者生存期比較

經(jīng)評(píng)估對(duì)比，p-AKT高表達(dá)組患者的中位生存期為25.39個(gè)月，低表達(dá)組為33.68個(gè)月，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.068，P=0.021)；PI3K高表達(dá)組患者的中位生存期為25.33個(gè)月，而低表達(dá)組中位生存期為26.43個(gè)月，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.986，P=0.022)，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)圖1。

3 討論

星形細(xì)胞瘤是最常見(jiàn)的神經(jīng)上皮腫瘤，報(bào)道顯示星形細(xì)胞瘤的發(fā)生率約占顱內(nèi)腫瘤的13%～26%，占膠質(zhì)瘤的21.2%～51.6%，星形細(xì)胞瘤具有高度的侵襲性，在機(jī)體內(nèi)與正常腦組織的邊界不清，因而手術(shù)治療無(wú)法完全切除病灶，復(fù)發(fā)率較高，雖然近些年該病放射治療、化學(xué)治療取得了一定進(jìn)展，但星形細(xì)胞瘤患者的中位生存期仍較短[7]。罹患星形細(xì)胞瘤的患者多因腫瘤對(duì)正常腦組織的擠壓而出現(xiàn)頭痛、嘔吐、運(yùn)動(dòng)性肌無(wú)力、記憶力減退、意識(shí)混亂等癥狀，會(huì)嚴(yán)重降低患者的生活質(zhì)量。近些年隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，有研究指出參與正常細(xì)胞分裂的一些中心體蛋白在腫瘤細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)，多數(shù)學(xué)者分析認(rèn)為這些蛋白與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、凋亡等事件具有一定相關(guān)性[8-9]，認(rèn)為可以通過(guò)對(duì)這些分子的研究來(lái)對(duì)解釋星形細(xì)胞瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移等過(guò)程。

p-AKT及PI3K均屬于PI3K/AKT信號(hào)傳導(dǎo)通路中的蛋白因子，該通路近些年是腫瘤研究的熱門(mén)通路，已被證實(shí)在多種腫瘤組織中存在蛋白表達(dá)失調(diào)現(xiàn)象。Iuchi等[10]的研究指出，PI3K在星形細(xì)胞瘤中存在兩種激活方式，一是與具有磷酸化酪氨酸殘基的生長(zhǎng)因子受體或連接蛋白相互作用，進(jìn)而引發(fā)二聚體結(jié)構(gòu)改變，二是直接活化自身，產(chǎn)生PIP3，PIP3與細(xì)胞內(nèi)的AKT和PDK1相結(jié)合，進(jìn)而促使AKT蛋白磷酸化，該機(jī)制已被Lastwika等[11]證實(shí)與非小細(xì)胞癌的發(fā)生具有重要關(guān)聯(lián)，能夠加快多種肺癌細(xì)胞的增殖、遷移和血管形成。而Neri Gómez等[12]的研究也指出，AKT是PI3K形成途徑中的重要因子，活化的AKT能夠磷酸化多種細(xì)胞激酶，從而起到調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡及蛋白質(zhì)形成等過(guò)程的作用。于震男[13]通過(guò)研究指出，p-AKT及PI3K在人腦星形細(xì)胞瘤中均呈現(xiàn)過(guò)表達(dá)狀態(tài)，同時(shí)與患者的預(yù)后存在較為密切的相關(guān)性，高表達(dá)患者生存時(shí)間要顯著低于低表達(dá)患者，該學(xué)者認(rèn)為p-AKT及PI3K與星形細(xì)胞瘤分化程度具有密切相關(guān)性，同時(shí)上述因子的高表達(dá)也是星形細(xì)胞瘤高侵襲性生長(zhǎng)的機(jī)制之一。馬建功[14]的研究也指出，AKT在星形細(xì)胞瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，非腦瘤組織中的陽(yáng)性表達(dá)率僅為16.7%，而癌變組織中的表達(dá)陽(yáng)性率高達(dá)53.2%，同時(shí)星形細(xì)胞瘤不同腫瘤分級(jí)間的AKT表達(dá)陽(yáng)性率也存在差異，提示AKT與星形細(xì)胞瘤TNM分期相關(guān)。

本文作者通過(guò)設(shè)立實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的方式，就p-AKT、PI3K與星形細(xì)胞瘤患者的臨床病理學(xué)特征及預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行了探究，結(jié)果顯示，星形細(xì)胞瘤癌組織中p-AKT及PI3K表達(dá)明顯高于癌旁組織，p-AKT及PI3K表達(dá)與患者癌組織浸潤(rùn)深度、TNM分期、腫瘤分化程度及是否出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性。本文作者分析認(rèn)為，其原因?yàn)閜-AKT及PI3K屬于介導(dǎo)癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移的重要因子，已有多項(xiàng)研究指出，p-AKT及PI3K與諸如肺癌、人支氣管上皮細(xì)胞惡變等病理改變相關(guān)；此外，AKT還能夠通過(guò)磷酸化p53蛋白來(lái)抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞從G1期進(jìn)展到S期，促進(jìn)細(xì)胞增殖，從而加快癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[6]。趙軍等[15]的研究也指出，AKT/PI3K轉(zhuǎn)導(dǎo)通路能夠參與腫瘤血管的形成，增加微血管的形成，因而對(duì)腫瘤的增殖也具有促進(jìn)作用。

總而言之，p-AKT、PI3K的高表達(dá)與星形細(xì)胞瘤患者浸潤(rùn)深度、TNM分期、腫瘤分化程度、是否出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移及患者生存期間存在相關(guān)性，可以通過(guò)對(duì)p-AKT、PI3K表達(dá)的檢測(cè)來(lái)判斷星形細(xì)胞瘤患者預(yù)后。