胡銀亨 梁麗靜

摘要：基于對長江上游經(jīng)濟魚類黃顙魚寄生車輪蟲的調(diào)查研究，采用國際統(tǒng)一的干銀法染色顯示車輪蟲的附著盤結(jié)構(gòu)和口圍繞度，采用瑞氏-姬姆薩染色以顯示細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，并用Lom（1958）倡導(dǎo)的“統(tǒng)一的特定方法”進(jìn)行測量，采用Bassion和van As提供的方法描述車輪蟲齒體。在黃顙魚鰓涂片上發(fā)現(xiàn)2種車輪蟲，分別是新種黃顙魚三分蟲（Tripartiella fulvidraco sp. n.）和我國首記錄種微小車輪蟲（Trichina minuta）。

關(guān)鍵詞：黃顙魚;黃顙魚三分蟲;直齒三分蟲;微小車輪蟲;小車輪蟲

中圖分類號： S941.5 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號：1002-1302（2019）22-0204-05

1973年，陳啟流在對黃顙魚寄生車輪蟲的研究中，發(fā)現(xiàn)其鰓上的粗棘杜氏車輪蟲（Trichodina domerguei f.）和中華杜氏車輪蟲（T.domerguei f.sinensis）[1]（粗棘杜氏車輪蟲是杜氏車輪蟲T.domerguei的同種異名[2]），1984年發(fā)現(xiàn)了寄生于黃顙魚的卵形車輪蟲（T. oviformis）（卵形車輪蟲是鱗三分蟲的同種異名[2]）、黑色車輪蟲（T.nigra）和眉溪小車輪蟲（Trichodinella myakkae）[3][眉溪小車輪蟲為流行小車輪蟲（T.epizootica）的同種異名[4]]。筆者于2014年在黃顙魚鰓上發(fā)現(xiàn)流行小車輪蟲[4]，2015年又發(fā)現(xiàn)了黃顙魚車輪蟲（Trichodina fluvidraco）、指狀三分蟲（Tripartiella dactylodentata）和矮小三分蟲（Tripartiella nana）[5]。同時，筆者在對2009年采集的黃顙魚鰓涂片用顯微鏡檢查時，又發(fā)現(xiàn)了新種黃顙魚三分蟲，在2018年采集的黃顙魚鰓涂片上發(fā)現(xiàn)了我國首記錄種微小車輪蟲（Trichina minuta）。

1 材料與方法

寄主黃顙魚2009—2018年采集于四川省瀘州市江陽區(qū)，采用寄主的鰓作涂片、自然干燥后，使用國際統(tǒng)一干銀法染色[6]以顯示車輪蟲的附著盤結(jié)構(gòu)和口圍繞度，采用瑞氏-姬姆薩染色顯示細(xì)胞核結(jié)構(gòu)。染色的涂片自然干燥后，再用高濃度乙醇脫水，采用中性膠封片制成永久裝片。并用鳳凰PH50-3A43L-A顯微鏡觀察，借助MC-D500U（C）在100倍油鏡下拍攝顯微照片。車輪蟲形態(tài)學(xué)特征的描述依據(jù)Lom倡導(dǎo)的“統(tǒng)一的特定方法”（Uniform Specific Characteristic System）[7]進(jìn)行，車輪蟲附著盤中的齒體定位描述則依據(jù)Basson和van As提供的從車輪蟲附著盤中央引線至齒鉤邊緣的“定位描述法”[8]進(jìn)行。由圖1可知，齒體定位圖借助于CorelDraw X6繪制。采用CorelDraw X6的標(biāo)注工具測量數(shù)據(jù)[9]，用Microsoft Excel 2010統(tǒng)計數(shù)據(jù)，一般數(shù)據(jù)統(tǒng)計模式為Min～Max（x±s），即最小值～最大值（平均值±標(biāo)準(zhǔn)差），幅線數(shù)和齒體數(shù)統(tǒng)計模式為Min～Max（Mode），即最小值～最大值（眾數(shù)）。

小核相對于大核的位置，采用Lom引用的Dogiel提出的標(biāo)準(zhǔn)[7]，即+y位：小核在大核一臂的外側(cè);-y位：小核在大核臂端的對立側(cè)面;-y1位：小核在大核一臂的內(nèi)側(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃顙魚三分蟲新種

2.1.1 分類

門：纖毛門（Ciliophora）

綱：寡膜綱（Oligohymenophora）

目：緣毛目（Peritriehia Stein）

科：車輪蟲科（Trichodinidae）

屬：三分蟲屬（Tripartiella）

種：黃顙魚三分蟲新種（Tripartiella fulvidraco）

寄主：黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）

寄主科：科（Bagridae）

寄生部位：鰓

采集時間：2009年5月

采集地：中國四川瀘州（28°51′20.41″N，105°23′25.43″E）

模式種：正模標(biāo)本LZY201/2009，副模標(biāo)本LZY203/2009存放于瀘州職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物學(xué)實驗室。

命名說明：以寄主黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）種名fulvidraco命名。

2.1.2 描述 小型車輪蟲，由圖2可知，蟲體直徑16.0～19.5（17.7±1.3） μm，附著盤直徑13.6～17.0（15.4±1.2） μm，齒環(huán)直徑6.2～10.5（8.5±1.2） μm，緣膜1.0～2.7（1.8±1.0） μm，輻線數(shù)3～4（4）根/齒體，齒體數(shù)20～24（22）個。齒體縱長3.1～7.2（5.5±1.1） μm，齒長1.4～5.1（3.1±1.0） μm，齒鉤長0.4～5.6（3.5±1.3） μm，齒錐寬 0.1～3.9（0.7±0.9） μm，齒棘長0.1～2.4（1.3±0.5） μm?？趪@度185.6°～191.8°（188.7°±3.1°）。小核相對于大核的位置-y1位，即小核在大核一臂的內(nèi)側(cè)。

齒鉤外切緣鈍圓、高于骨突、個別外切緣呈直線。齒鉤前緣和其他三分蟲不同，齒鉤凸點（齒鉤最前端）位于齒鉤前緣和齒鉤外切緣交界處，齒鉤前緣向下向后凹曲，再向下向前后急轉(zhuǎn)，形成1個約60°鉤突，鉤突2不明顯。齒鉤后緣從外切緣向下向前彎曲，然后向后彎曲（突起），此處突起看作齒鉤后突起，齒鉤后突起發(fā)達(dá)，齒鉤后緣再向前彎曲，在接近y軸時急轉(zhuǎn)向后，形成約45°角，與前緣鉤突下面部分形成齒鉤連接，與齒錐相連。齒錐在y軸和y-1軸約1/2處。齒錐x軸上錐和x軸下錐基本相等。齒棘較粗、頂點鈍圓、無棘突，齒棘主要位于y軸和y-1軸內(nèi)，指向稍偏y-1軸，與y軸呈約10°左右夾角（圖3）。

2.1.3 討論 Lom于1959年在車輪蟲科中創(chuàng)建三分蟲屬（Tripartiella Lom，1959）[10]，并將以前發(fā)表的具有本屬特征的車輪蟲的種重命名放入該屬中。目前為止，世界范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)的在淡水魚類外寄生三分蟲有近20種。本屬的種存在許多同種異名，下面進(jìn)行整理和澄清，有同種異名者，以第1個正確命名為準(zhǔn)。本屬有以下種：

（1）鱗三分蟲Tripartiella bulbosa（Davis，1947） Lom，1959[10]，以下種為同種異名[2]（syn）：Trichodina bulbosa，1947（球形車輪蟲）;Cyclochaeta leucisci Suzuki，1950（雅羅魚環(huán)毛蟲）;Trichodina ovaliformis Chen，1955（卵形車輪蟲）;Trichodinella（Tripartiella） bubosa Lom，1959（球形小車輪蟲/三分蟲）;Tripartiella bubosa Stein，1962（球形三分蟲）;Trichodina leucisci（Suzki，1950） Stein，1968（雅羅魚車輪蟲）;Tripartiella tilapiae Duncan，1977（羅非魚三分蟲）;以下種也是鱗三分蟲syn[11]：T. lechridens Basson & van As，1987[12]（斜齒三分蟲）;T.macrosoma Basson & van As，1987[12]（大型三分蟲）;T. leucisci（Suzuki，1950） Lom & Haldar，1977[13]（雅羅魚三分蟲）。

（2）牛狀三分蟲T.bursiformis（Davis，1947） Lom，1959[10]，syn[2]：Trichodina bursiformis Davis，1947（帽形車輪蟲）。

（3）鏟形三分蟲T.spatula van As & Basson，1986[14]，syn[11]：棒齒三分蟲T. clavodonta Basson & van As，1987[12]。

（4）鈍形三分蟲T.obtusa Lom，1959[10]，Paratrichodina notopterlae Saha，Bandopadhyay & Haldar，1995[15]（弓背魚擬車輪蟲）具有鈍形三分蟲特征，是鈍形三分蟲的同種異名。

（5）豐富三分蟲T. copiosa Lom，1959[10]。

（6）三分蟲T. lata Lom，1963[16]。

（7）卡氏三分蟲T. kashkovskyi Lom & Haldar，1977[13]。

（8）鶇形三分蟲T. cichlidarum Basson，van As & Paperna，1983[17]。

（9）小棘三分蟲T. leptospina Basson & van As，1987[12]。

（10）直齒三分蟲T. orthodens Basson & van As，1987[12]。

（11）矮小三分蟲T. nana Basson & van As，1987[12]。

（12）指狀三分蟲T. dactylodentata Al-Rasheid et al. 2000[18]。

（13）非洲攀鱸魚三分蟲T. ctenopomae Basson & van As，2002[19]。

（14）細(xì)梳攀鱸魚三分蟲T.microctenopomae Basson & van As，2002[19]。

鯽三分蟲T. carassii（Dogiel，1940） Lom，1959后來歸類到流行小車輪蟲，小三分蟲T. minuta Chen，1956缺失銀染標(biāo)本，描述不完整，還需要進(jìn)一步研究和重新描述[2]。

在我國發(fā)現(xiàn)的淡水魚寄生的三分蟲有：鱗三分蟲[20]（syn：球形車輪蟲[21]、卵形車輪蟲[3]大型三分蟲[20，22-23]）、牛狀三分蟲（syn：帽形車輪蟲[3]）、直齒三分蟲[24]、指狀三分蟲和矮小三分蟲[5]。

在所有三分蟲中，幾乎沒有和黃顙魚三分蟲（Tripartiella fulvidraco sp. n.）相似的車輪蟲。它和直齒三分蟲（T.orthodens Basson & van As，1987）略為相似，直齒三分蟲是Basson和van As 1987年在南非的倫氏羅非魚（Tilapia rendalli swierstrai）鰓上發(fā)現(xiàn)的[12]。2種車輪蟲的差異很大，特別是齒體形態(tài)上（圖3）。從齒鉤形態(tài)上看，二者完全不一樣，黃顙魚三分蟲的齒鉤寬大，而直齒三分蟲的狹長，黃顙魚三分蟲齒鉤最前端在齒鉤外切緣和齒鉤前緣交界處，而直齒三分蟲的在鉤突處，黃顙魚三分蟲的齒鉤鉤突在y軸和y+1軸約1/2處，而直齒三分蟲的超過y+1軸，黃顙魚三分蟲的齒鉤連接短，而直齒三分蟲的狹長;二者的齒棘頂點指向，黃顙魚三分蟲略偏向y-1軸，與y軸呈約10°夾角，而直齒三分蟲的觸及y-1軸，與y軸呈約22°夾角?？趪@度，黃顙魚三分蟲185.6°～191.8°，直齒三分蟲215°～270°。

黃顙魚三分蟲比直齒三分蟲小，在同批標(biāo)本中，比指狀三分蟲、矮小三分蟲都還要小，在測量的數(shù)據(jù)上非常明顯，如黃顙魚三分蟲和直齒三分蟲：蟲體直徑16.0～19.5 μm vs. 27.6～

36.5 μm，附著盤直徑13.6～17.0 μm vs. 26.0～48.0 μm，齒環(huán)直徑 6.2～10.5 μm vs. 12.8～16.3 μm;黃顙魚三分蟲和指狀三分蟲：蟲體直徑16.0～17.4 μm vs. 19.0～25.2 μm，附著盤直徑13.6～15.0 μm vs. 23.0～31.7 μm，齒環(huán)直徑6.2～10.5 μm vs. 17.1～26 μm;黃顙魚三分蟲和矮小三分蟲：蟲體直徑16.0～17.4 μm vs. 19.9～20.6 μm，附著盤直徑13.6～15.0 μm vs. 16.2～18.7 μm，齒環(huán)直徑6.2～10.5 μm vs. 16.2～18.7 μm。其他測量數(shù)據(jù)差異也非常大（表1）。

在這批標(biāo)本中原來發(fā)現(xiàn)了黃顙魚車輪蟲、指狀三分蟲和矮小三分蟲，黃顙魚車輪蟲為新種車輪蟲，指狀三分蟲和矮小三分蟲為我國首記錄種[5]。黃顙魚三分蟲太小，以至于在顯微鏡下多次鏡檢都沒有被發(fā)現(xiàn)。在目前發(fā)現(xiàn)的三分蟲中，黃顙魚三分蟲是最小的三分蟲之一，在低倍顯微鏡下根本觀察不到[（5～16）×10倍]，在高倍顯微鏡下[（5～16）×40倍]幾乎看不到，在油鏡下（10×100倍）才能觀察到，在同一張涂片標(biāo)本中，明顯看出它比指狀三分蟲小許多（圖4）。

綜合上述，黃顙魚三分蟲與直齒三分蟲和其他三分蟲有顯著區(qū)別，是新種三分蟲。

2.2 微小車輪蟲

2.2.1 描述 小型車輪蟲。由圖5可知，蟲體直徑37.9～45.7（41.8±3.4） μm，附著盤直徑30.9～35.1（33.7±1.7） μm，齒環(huán)直徑19.8～21.6（20.6±0.7） μm，緣膜1.9～5.3（4±1.3） μm，輻線數(shù)6～7（7）根/齒體，齒體數(shù)24～25（24）個。齒體縱長9.8～10.5（10.1±0.3） μm，齒長4.0～5.2（4.7±0.4） μm，齒鉤長4.5～5.5（5±0.4） μm，齒錐寬1.3～2.2（1.6±0.3） μm，齒棘長2.9～4.0（3.5±0.4） μm。

口圍繞度400.0°～415.1°（408°±2.2°），小核相對于大核的位置-y1位，即小核在大核一臂的內(nèi)側(cè)。

齒鉤形態(tài)近似矩形，齒鉤外切緣近似直線，齒鉤前緣和后緣走向幾乎平行，齒鉤凸點略超過y+1軸，鉤突不明顯。齒錐在y軸和y-1軸約1/3處，齒錐x軸上錐和x軸下錐基本相等。齒棘位于y軸和y+1軸內(nèi)，齒棘頂點接近y+1軸（圖6）。

2.2.2 討論 微小車輪蟲（Trichodina minuta）是Basson，van As和Paperna，1983年在南非的莫桑比克羅非魚（Oreochromis mossambicus）的鰭、鰓和皮膚上發(fā)現(xiàn)的[25]，1992年van As和Basson南非的長麗魚鰓和皮膚上發(fā)現(xiàn)了該車輪蟲[26]。本種與它的齒體基本相同，由圖6可知，較之寄生于莫桑比克羅非魚的微小車輪蟲外切緣略短而較鈍、齒鉤前緣略超過y+1軸。測量數(shù)據(jù)基本一致，較之寄生于莫桑比克羅非魚的微小車輪蟲稍大，見表2。

1956年，陳啟鎏在鰱和鳙鰓上發(fā)現(xiàn)一小型車輪蟲，定名為微小車輪蟲（T.minuta Chen，1956）[21]，但缺乏可比較的銀染標(biāo)本及非國際統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)描述，此車輪蟲須重新研究和描述，其口圍繞度及齒體形態(tài)符合三分蟲屬的定義[2]，而非微小車輪蟲T.minuta Basson，van As & Paperna，1983種。除南非外，世界上其他地方仍未發(fā)現(xiàn)微小車輪蟲（T.minuta Basson，van As & Paperna，1983）的記錄。微小車輪蟲T.minuta Basson，van As & Paperna，1983是我國的首記錄車輪蟲種，黃顙魚是微小車輪蟲的首記錄寄主。

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