沈金峰 羅富里 黃偉 晏子友

江西中醫(yī)藥大學(xué)（南昌330006）

腎間質(zhì)纖維化是各類慢性腎系疾病進(jìn)展終末腎衰竭的的共同病理改變。抑制腎間質(zhì)纖維化的病理進(jìn)程是減緩慢性腎臟病進(jìn)展的主要治療方法。EMT 參與腎間質(zhì)纖維化發(fā)生的關(guān)鍵步驟，如果能阻斷EMT 形成過(guò)程，那么可以阻斷腎纖維化的進(jìn)程。Wnt∕β-catenin 信號(hào)通路是目前研究細(xì)胞EMT調(diào)控機(jī)制中三條主要通路之一。研究發(fā)現(xiàn)Wnt∕β-catenin 信號(hào)通路參與慢性腎臟病的發(fā)生發(fā)展，誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化的發(fā)展［1］。抑制Wnt4、β-catenin蛋白的表達(dá)可能成為治療腎間質(zhì)纖維化的靶點(diǎn)。單側(cè)輸尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）大鼠模型是目前研究腎小管間質(zhì)進(jìn)行性纖維化較為成熟的一種實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物模型［2］。腎衰方是治療慢性腎臟病常用的臨床經(jīng)驗(yàn)方，我們前期研究己證明其具有抗腎間質(zhì)纖維化的作用。腎衰方由補(bǔ)虛藥物及祛邪藥物組成，具有祛邪扶正的作用，利用其復(fù)方及拆方可進(jìn)一步證明腎間質(zhì)纖維化是否為本虛標(biāo)實(shí)之證。研究采用UUO 誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化小鼠模型，觀察腎衰方及其拆方對(duì)Wnt4、β-catenin 蛋白的表達(dá)影響及探討腎間質(zhì)纖維化中醫(yī)是否屬于本虛標(biāo)實(shí)之證，為臨床上應(yīng)用腎衰方延緩腎間質(zhì)纖維化進(jìn)展提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物分組與造模 SPF 級(jí)雌性大鼠72 只（購(gòu)于浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCSK（浙）20170001），體質(zhì)量180～200 g，適應(yīng)1 周，尿蛋白陰性者方可使用。隨機(jī)分為：（1）假手術(shù)組；（2）模型組；（3）腎衰方組；（4）補(bǔ)虛方組；（5）袪邪方組；（6）貝那普利組，每組12 只。UUO大鼠模型制備參考文獻(xiàn)［3］進(jìn)行，用5.0%水合氯醛（10 mL∕kg 體質(zhì)）腹腔注藥麻醉后，進(jìn)行輸尿管游離，從輸尿管上1∕3 與下2∕3 處進(jìn)行結(jié)扎，分層縫合肌肉、皮膚層即制備得UUO 動(dòng)物模型。假手術(shù)組只是分離左側(cè)輸尿管但是不予結(jié)扎。

1.2 實(shí)驗(yàn)用藥 腎衰方組（生黃芪30 g、六月雪20 g、生大黃后下10 g、淫羊藿15 g、白花蛇舌草20 g、生地10 g、淮山藥15 g、山萸肉10 g、丹參20 g、澤瀉10 g、土茯苓20 g、黨參15 g 共13 味中藥）、補(bǔ)虛方組（生黃芪30 g、黨參15 g、生地10 g、山萸肉10 g、山藥15 g、淫羊藿15 g 共7味中藥）、袪邪方組（生大黃10 g、丹參20 g、白花蛇舌草20 g、六月雪20 g、土茯苓20 g、澤瀉10 g 共6 味中藥）3組，以上中藥都是經(jīng)過(guò)江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片廠專家鑒定后進(jìn)行采用，將上述中藥組進(jìn)行煎煮，然后進(jìn)行濃縮，將腎衰方組、補(bǔ)虛方組、祛邪方組分別制成每mL 含生藥量1.2 g、0.4 g、0.8 g，4 ℃冰箱保存。鹽酸貝那普利（商品名：洛丁新），規(guī)格10 mg∕片，批號(hào)：H2003014，從北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)后購(gòu)買(mǎi)。

兔抗大鼠β-catenin 多克隆抗體、兔抗大鼠Wnt4 多克隆抗體，以1∶100 稀釋。Masson 染色試劑盒、DAB 顯色試劑盒、免疫組化超敏SP 試劑盒由福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司提供；磷酸緩沖液（PBS）由檸檬酸緩沖液由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 治療方法 手術(shù)后3 d，各中藥組及貝那普利大鼠給藥均按10 倍于臨床用藥劑量折算為等效劑量給藥，即腎衰方組、補(bǔ)虛方組、祛邪方組大鼠分別按分別按1.95、0.95、1.00 g∕mL 腎衰方濃縮劑給藥，即給藥劑分別為19.5、9.5、10.0 g∕（kg·d）進(jìn)行灌胃；予貝那普利組給貝那普利1.5 mg∕（kg·d）進(jìn)行灌胃，假手術(shù)組、模型組大鼠給等量生理鹽水灌胃。術(shù)后7、14 d 分別處死各組大鼠。

1.4 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.4.1 一般情況觀察 觀察各組大鼠食欲、體質(zhì)量、計(jì)算左腎（術(shù)側(cè)）濕重、腎臟器系數(shù)（腎濕重∕質(zhì)量×100%）；

1.4.2 24 h 尿蛋白定量測(cè)定 處死大鼠前1 d 各組大鼠分別用大鼠金屬代謝籠收集24 h 尿液標(biāo)本，留尿期間禁食，不禁水，記錄尿量后取4 mL，2 000 r∕min 離心10 min，去除沉渣并于-20 ℃保存待測(cè)。24 h 尿蛋白定量用雙縮脲法測(cè)定。

1.4.3 腎功能檢測(cè) 全自動(dòng)生化儀測(cè)定血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、24 h 尿蛋白定量（24 h UP）。

1.4.4 腎組織學(xué)檢查 大鼠處死后，馬上分離梗阻側(cè)腎臟，進(jìn)行稱量重量。用4%甲醛溶液將腎組織全部浸潤(rùn)，使其脫水，用石蠟包埋裹，將其制備成厚度大概為4 μm 切片，再通過(guò)HE 和Masson 染色，觀察腎臟組織光鏡下的改變。

1.4.5 腎小管損傷程度評(píng)分及腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)測(cè)定 HE 染色評(píng)定：運(yùn)用顯微鏡（光鏡）進(jìn)行觀察（× 400 倍），根據(jù)每個(gè)視野腎小管病變（腎小管上皮細(xì)胞空泡變性、腎小管擴(kuò)張、腎小管萎縮、紅細(xì)胞管型、蛋白管型、間質(zhì)水腫、間質(zhì)纖維化、間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等）累及的小管數(shù)目評(píng)定腎小管間質(zhì)損傷指數(shù)損傷按Banff 分級(jí)進(jìn)行0～3 級(jí)半定量計(jì)分［4］，0 分：腎小管結(jié)構(gòu)正常，未見(jiàn)病變；1 分：腎小管病變數(shù)目＜3 個(gè)；2 分：腎小管病變數(shù)目3～5 個(gè)；3 分：腎小管病變數(shù)目＞5 個(gè)或腎小管結(jié)構(gòu)消失。Masson 染色半定量分析：在400 倍視野下，每只大鼠選取梗阻側(cè)腎組織5 張切片，每張切片隨機(jī)選擇10 個(gè)不相重疊視野的腎小管皮質(zhì)處，然后計(jì)算其平均值［5］。通過(guò)觀察整個(gè)視野中膠原染色陽(yáng)性面積所占總面積的百分比評(píng)判腎間質(zhì)纖維化指數(shù)，評(píng)分如下：0 分，纖維化陽(yáng)性面積＜2%；1 分，纖維化陽(yáng)性面積2%～10%；2 分，纖維化陽(yáng)性面積11%～20%；3 分，纖維化陽(yáng)性面積21%～30%；4 分，纖維化陽(yáng)性面積＞30%。

1.4.6 免疫組化檢測(cè) 用SP 法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠腎間質(zhì)Wnt4、β-catenin 的蛋白表達(dá)。每組取6 只（7 和14 d 各6 只）大鼠的術(shù)側(cè)腎臟，嚴(yán)格按SP 試劑盒說(shuō)明進(jìn)行免疫組化技術(shù)操作，用PBS 代替一抗作陰性對(duì)照，DAB 顯色，蘇木素復(fù)染。免疫組化結(jié)果借助用Image-Pro Plus 5.0 圖像分析軟件進(jìn)行計(jì)算機(jī)圖象分析。每張切片隨機(jī)選取5 個(gè)高倍視野（×400），對(duì)所選視野內(nèi)的免疫組化陽(yáng)性信號(hào)經(jīng)計(jì)算機(jī)圖像分析，通過(guò)積分吸光度值反映蛋白表達(dá)的高低。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 19.0 軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。連續(xù)型變量采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)描述。組間比較采用方差分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般觀察及病理檢查 外觀性觀察：模型組大鼠的皮毛松軟、灰暗，消瘦，厭食，少動(dòng)。腎衰方組、祛邪方組、補(bǔ)虛方組、貝那普利組大鼠的食量、體質(zhì)量、存活率、活動(dòng)狀況等無(wú)明顯差異，但比模型組稍好。

肉眼觀察：假手術(shù)組術(shù)側(cè)大鼠腎臟紅潤(rùn)、柔軟，其7、14 d 時(shí)未見(jiàn)明顯改變；UUO組大鼠造模術(shù)側(cè)腎臟體積大于對(duì)側(cè)，顏色變淡，剖面表現(xiàn)出缺血狀，腎皮質(zhì)為尤為明顯。腎實(shí)質(zhì)變薄，皮髓質(zhì)邊界模糊不清，腎盂、腎盞擴(kuò)張，內(nèi)含尿液，術(shù)后7 d 變化不明顯，術(shù)后第14 d 出現(xiàn)明顯變化。模型組及腎衰方組、祛邪方組、補(bǔ)虛方組、貝那普利組大鼠術(shù)側(cè)腎臟顏色淺白，表面覆蓋一層薄而萎縮樣的物質(zhì)，其內(nèi)含有液體，腎乳頭表現(xiàn)為空洞狀，與假手術(shù)組相比各治療組腎濕重降低。非術(shù)側(cè)大鼠腎臟術(shù)后7、14 d 較假手術(shù)組變化不明顯。與模型組相比，腎衰方組、祛邪方組、補(bǔ)虛方組、貝那普利組術(shù)側(cè)大鼠腎臟顏色、質(zhì)量、濕度、積液有著不同程度的改善。

各組大鼠左側(cè)腎腎臟器系數(shù)（腎濕重∕體質(zhì)量×100%）比較：與假手術(shù)組，同時(shí)期模型組左腎臟器指數(shù)顯著升高（P＜0.05），表明左腎衰竭模型制備成功。與模型組相比，經(jīng)治療后，腎衰方及其拆方組和貝那普利組左腎腎臟器指數(shù)下降（P＜0.05），其中第14 天腎衰方組大鼠術(shù)側(cè)腎腎臟器系數(shù)明顯低于其他3 個(gè)治療組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 各組大鼠術(shù)側(cè)腎臟組織Wnt4、β-catenin 蛋白表達(dá)比較 如圖1、2 所示，假手術(shù)組大鼠在腎小球系膜細(xì)胞、腎小管細(xì)胞見(jiàn)少量Wnt4 蛋白表達(dá)，β-catenin 蛋白僅少量表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞基底側(cè)。造模后各組大鼠Wnt4、β-catenin 蛋白表達(dá)明顯高于假手術(shù)組（P＜0.05），并隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)，其表達(dá)隨之增強(qiáng)。經(jīng)干預(yù)治療后，各治療組大鼠Wnt4、β-catenin 蛋白表達(dá)顯著低于模型組，但明顯高于假手術(shù)組（P＜0.05）；其中腎衰方組明顯低于其他3 個(gè)治療組（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表1 各組大鼠術(shù)側(cè)腎腎臟器系數(shù)變化比較Tab.1 Changes of renal and renal organ coefficients in each group of rats ±s

表1 各組大鼠術(shù)側(cè)腎腎臟器系數(shù)變化比較Tab.1 Changes of renal and renal organ coefficients in each group of rats ±s

注：與同時(shí)期模型組比較，*P ＜0.05；同時(shí)期與各治療組比較，#P＜0.05；14 d 時(shí)與其他3 個(gè)治療組比較，△P＜0.05

組別假手術(shù)組模型組腎衰方組祛邪方組補(bǔ)虛方組貝那普利組天數(shù)（d）7 14 7 14 7 14 7 14 7 14 7 14體質(zhì)量（g）197.27±13.41 210.10±12.51 217.60±11.63 250.32±17.04 200.75±9.80 220.73±19.94 202.61±7.53 223.92±13.27 205.82±9.01 231.52±19.95 207.10±7.22 237.21±18.73左腎重（g）1.77±0.18 2.30±0.21 1.15±0.18 1.39±0.076 1.41±0.090 2.05±0.25 1.37±0.093 2.01±0.091 1.31±0.063 1.92±0.096 1.29±0.057 1.85±0.061左腎器官指數(shù)（%）0.61±0.05#0.63±0.03#1.70±0.13*2.10±0.27*1.03±0.17 1.32±0.10△1.39±0.23 1.74±0.35 1.40±0.14 1.68±0.27 1.36±0.24 1.58±0.27

表2 各組大鼠腎組織Wnt4、β-catenin 蛋白表達(dá)Tab.2 Expression of Wnt4 and beta-catenin in renal tissues of rats in each group ±s

表2 各組大鼠腎組織Wnt4、β-catenin 蛋白表達(dá)Tab.2 Expression of Wnt4 and beta-catenin in renal tissues of rats in each group ±s

注：與同時(shí)期模型組及各治療組比較，*P＜0.05；與同時(shí)期各治療組比較，#P＜0.05；與同時(shí)期其他治療組比較，△P＜0.05

組別假手術(shù)組模型組腎衰方組祛邪方組補(bǔ)虛方組貝那普利組天數(shù)（d）7 14 7 14 7 14 7 14 7 14 7 14 Wnt4 1.2±0.32*3.10±0.88*7.88±1.56#10.05±1.23#4.10±0.89 5.10±0.66△5.22±0.76 6.58±1.20 4.62±0.91 6.91±0.81 5.63±0.76 6.88±0.69 β-catenin 3.0±0.58*4.30±0.66*8.54±1.32#13.62±0.77#4.54±0.66 5.48±0.59△6.10±0.88 8.35±1.13 6.13±1.74 8.78±1.44 5.98±1.23 8.11±1.45

2.3 各組大鼠BUN、Scr、24 h UP 水平比較 與假手術(shù)組相比，模型組Scr、BUN 水平和24 h UP 升高（P＜0.05），經(jīng)腎衰方、祛邪方、補(bǔ)虛方及貝那普利治療后均有所改善（P＜0.05），14 d 腎衰方在降低Scr、BUN 水平和24 h UP 優(yōu)于祛邪方、補(bǔ)虛方及貝那普利，表明腎衰方可以改善UUO 大鼠的腎功能及降低尿蛋白的作用，保護(hù)腎臟。見(jiàn)表3。

圖1 Wnt4 免疫組化結(jié)果Fig.1 Immunohistochemical results of Wnt4

圖2 β-catenin 免疫組化結(jié)果Fig.2 Immunohistochemical results of β-catenin

表3 各組大鼠血清SCr、BUN 水平和24 h UP 的比較Tab.3 SCr、BUN and 24 h UP data of rats in each group ±s

表3 各組大鼠血清SCr、BUN 水平和24 h UP 的比較Tab.3 SCr、BUN and 24 h UP data of rats in each group ±s

注：與同時(shí)期模型組及各治療組比較，*P＜0.05；與同時(shí)期各治療組比較，#P＜0.05；與同時(shí)期其他治療組比較，△P＜0.05

組別假手術(shù)組模型組腎衰方組祛邪組補(bǔ)虛組貝那普利組BUN（mmol∕L）7 d 6.21±1.46*11.12±1.42#8.10±0.41 9.66±0.87 9.42±0.79 8.26±0.54 14 d 7.56±1.26*12.48±1.56#5.88±0.76△6.92±0.82 6.88±0.77 6.11±0.85 SCr（μmol∕L）7 d 25.38±4.42*60.46±10.54#40.43±5.28△50.29±7.22 51.28±8.38 44.76±6.10 14 d 31.73±5.28*67.32±14.24#39.86±4.80△49.31±6.21 49.47±9.64 45.63±2.61 24 h UP（mg）7 d 3.10±1.01*10.54±3.26#8.39±1.39 9.84±1.21 9.48±1.58 9.83±1.06 14 d 4.05±1.42*13.67±2.52#5.72±0.48△8.10±0.70 8.26±0.83 6.91±0.88

2.4 大鼠腎臟病理改變 如圖3所示，HE 染色見(jiàn)假手術(shù)組大鼠腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)清晰，腎小管排列緊密，腎小管周?chē)g質(zhì)無(wú)增寬；模型組大鼠術(shù)后第7 天起觀察到腎小管管腔擴(kuò)張，腎小管周?chē)g質(zhì)增寬、水腫并伴有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，隨梗阻時(shí)間延長(zhǎng)更加嚴(yán)重。但梗阻早期（術(shù)后第7 天）腎小球結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，各治療組大鼠較同期模型組上述病變有所改善。與假手術(shù)相比模型組腎小管損傷程度顯著升高（P＜0.05），經(jīng)腎衰方、祛邪方、補(bǔ)虛方、貝那普利治療后腎小管損傷程度與模型組比較顯著降低（P＜0.05），且第14 天腎衰方組大鼠腎小管損傷程度評(píng)分低于其他3 個(gè)治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。如表4、圖4所見(jiàn)，Masson染色見(jiàn)假手術(shù)組大鼠腎小球基底膜、系膜區(qū)及腎小管間質(zhì)無(wú)明顯膠原沉積；模型組大鼠腎組織可見(jiàn)條索狀膠原，呈藍(lán)紫色，梗阻時(shí)間越長(zhǎng)越明顯。模型組較假手術(shù)組膠原沉積顯著升高（P＜0.05），腎衰方組、祛邪方組、補(bǔ)虛方組、貝那普利組與模型組比較均下降（P＜0.05），且第14 天腎衰方組腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)明顯低于其他3 個(gè)治療組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 各組大鼠腎小管損傷程度評(píng)分及腎小管間質(zhì)纖維化指數(shù)Tab.4 HE and Masson scores in each group of rats x±s

3 討論

筆者認(rèn)為腎間質(zhì)纖維化的病機(jī)歸納為“虛”、“濕”、“瘀”、“毒”四個(gè)方面，“虛”是始因，濕、瘀是腎間質(zhì)纖維化微型癥積形成的病理基礎(chǔ)，而毒促進(jìn)腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展。腎間質(zhì)纖維化為本虛標(biāo)實(shí)之證，治療需標(biāo)本兼顧，但不同時(shí)期各有側(cè)重。在早期，標(biāo)實(shí)為主，以祛濕泄?jié)?，活血化瘀為法，到了晚期，正氣耗傷，?dāng)以扶正為主，補(bǔ)益脾腎，泄?jié)峤舛?。病機(jī)關(guān)鍵是“脾腎虧虛、濕濁內(nèi)蘊(yùn)，瘀毒閉阻”，故治療以益腎健脾、化瘀利濕、解毒泄?jié)釣榉?。腎衰方正是依據(jù)此病機(jī)研制而成，由生黃芪、生地、黨參、山萸肉、淮山藥、丹參、澤瀉、土茯苓、白花蛇舌草、蒲公英、六月雪、生大黃、淫羊藿組成，具有標(biāo)本兼顧的作用。腎衰方為參芪地黃湯化裁而來(lái)。方中用丹參換丹皮提高起活血化瘀的作用，人參用黨參替代以補(bǔ)益中氣，黨參配黃芪益氣健脾，生地滋養(yǎng)陰血、山萸肉補(bǔ)益肝腎、山藥固腎健脾、淫羊藿溫腎助陽(yáng)，以上諸藥可益氣健脾固腎，顧護(hù)其本；佐以生大黃，通臟腑，泄?jié)岫尽⒗鏊?，使?jié)岫緩哪c胃而出，白花蛇舌草、蒲公英解毒利水、六月雪健脾利濕，澤瀉活血利水、茯苓健脾滲濕，全方健脾益腎而祛濁毒，降濁毒而耗傷正氣，補(bǔ)中寓瀉，瀉中有補(bǔ)，以標(biāo)本共奏的功效。補(bǔ)虛方組（生黃芪、黨參、生地、山萸肉、山藥、淫羊藿）、袪邪方組（生大黃、丹參、白花蛇舌草、六月雪、土茯苓、蒲公英、澤瀉），通過(guò)拆方進(jìn)行治療，進(jìn)一步佐證腎間質(zhì)纖維化是否為本虛標(biāo)實(shí)之證。

圖3 各組大鼠腎組織HE 染色結(jié)果Fig.3 HE staining in renal tissues of rats in each group

圖4 各組大鼠腎組織Masson 染色結(jié)果Fig.4 Masson staining in renal tissues of rats in each group

Wnt∕β-catenin 是一種進(jìn)化保守、高度復(fù)雜信號(hào)通路［6］。Wnt 信號(hào)通路主要的生理功能是按程序規(guī)律地激活和靜止，它分泌的糖脂蛋白，是生物正常組織分化的誘導(dǎo)信號(hào)［7］。β-catenin 作為經(jīng)典Wnt 信號(hào)通路的核心蛋白，參與細(xì)胞代謝的增殖、分化和凋亡過(guò)程，具有介導(dǎo)細(xì)胞間黏附和參與基因表達(dá)的功能［8］。β-catenin 作為一種細(xì)胞骨架蛋白［9］。β-catenin 又是Wnt4 信號(hào)途徑下游的關(guān)鍵效應(yīng)因子，Wnt 信號(hào)途徑能引起胞內(nèi)β-catenin 積累。正常機(jī)體腎臟中wnt4、β-catenin 信號(hào)是相對(duì)沉默。Wnt4 信號(hào)途徑廣泛參與腎臟疾病的發(fā)生和發(fā)展，特別是在腎間質(zhì)纖維化［10］。激活Wnt 信號(hào)在腎間質(zhì)纖維化的發(fā)病機(jī)制至關(guān)重要［11］。慢性腎病大鼠腎組織的β-連環(huán)蛋白和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平升高，β-catenin 沉默可能是一種有治療對(duì)腎纖維化疾病的干預(yù)策略［12］。越來(lái)越多的證據(jù)表明，持續(xù)激活Wnt∕β-catenin 與腎纖維化病變有著密切的聯(lián)系［13］。通過(guò)抑制Wnt∕β-catenin 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能為治療腎纖維化提供新的突破口和干預(yù)靶點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)以貝那普利作為對(duì)照組，進(jìn)一步觀察腎衰方對(duì)大鼠腎間質(zhì)纖維化的作用。貝那普利為目前公認(rèn)具有抗腎間質(zhì)纖維化作用的藥物。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，本研究發(fā)現(xiàn)腎衰方及其拆方和貝那普利都能抑制Wnt4、β-catenin 蛋白的表達(dá)，改善腎小管損傷程度及減輕腎小管纖維質(zhì)指數(shù)，改善腎功能，減輕腎臟損害，延緩慢性腎臟病進(jìn)程，提示腎衰方及其拆方和貝那普利具有保護(hù)腎臟作用。且腎衰方抑制腎間質(zhì)纖維化效果優(yōu)于補(bǔ)虛方、祛邪方，可見(jiàn)單純補(bǔ)虛或單純祛邪抗腎間質(zhì)纖維化效果不佳，從腎衰方及其拆方的治療效果也進(jìn)一步佐證了腎間質(zhì)纖維化屬于本虛標(biāo)實(shí)之證，在治療上需標(biāo)本同顧，方能起到較好治療效果。

中藥腎衰方抗腎間質(zhì)纖維化作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制Wnt4、β-catenin 蛋白的表達(dá)，延緩腎間質(zhì)纖維化進(jìn)展，改善腎功能，其中醫(yī)屬于本虛標(biāo)實(shí)之證。