胡明明，王治維，孫 杰，寧 艷，雷 沖，王 錦，趙 凱，圖門巴雅爾，付國(guó)兵，白艷艷，趙勝杰，雷宇平，韋欣捷，王仲兵

（1. 山西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山西太原 030027；2. 晉中市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，山西晉中 030600；3. 榆林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西榆林 719000；4. 河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南鄭州 450000；5. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種以發(fā)熱、奇癢（豬除外）及腦脊髓炎為主要癥狀的多種家畜和野生動(dòng)物共患的重要傳染病。豬感染發(fā)病最為多見(jiàn)，是重要的病毒貯存宿主和傳染源[1]，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。豬群感染PRV后，其臨床癥狀因性別和生長(zhǎng)階段不同而異，如：母豬感染后常出現(xiàn)返情或?qū)遗洳辉?；懷孕母豬易發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)死胎或木乃伊胎；幼齡仔豬表現(xiàn)為腹瀉及神經(jīng)癥狀，死亡率可高至100%；育肥豬表現(xiàn)為生長(zhǎng)遲緩，飼料報(bào)酬降低等[2]。北美和歐洲的許多國(guó)家通過(guò)實(shí)施嚴(yán)格的PR凈化計(jì)劃，通過(guò)大規(guī)模的gE基因缺失疫苗免疫、野毒抗體監(jiān)測(cè)，以及淘汰陽(yáng)性豬只、加強(qiáng)生物安全等綜合防控措施，已成功在家豬中凈化了該病[3]。我國(guó)也在《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》[4]中，將PR列為優(yōu)先防治的動(dòng)物疫病病種。

PR作為仔豬死亡、母豬繁殖障礙的主要病因之一，嚴(yán)重影響了養(yǎng)豬業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[5]。為了解晉中市規(guī)模豬場(chǎng)母豬PR場(chǎng)群流行率，找出規(guī)模豬場(chǎng)母豬群PRV感染的風(fēng)險(xiǎn)因素，本研究通過(guò)血清學(xué)檢測(cè)和問(wèn)卷調(diào)查，對(duì)晉中市75個(gè)規(guī)模豬場(chǎng)開(kāi)展了橫斷面研究，以期為規(guī)模豬場(chǎng)PR防控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和防控建議。

1 研究方法

1.1 病例定義

個(gè)體水平：血清檢測(cè)為PRV gpI抗體陽(yáng)性的母豬，為陽(yáng)性個(gè)體，無(wú)抗體的為陰性個(gè)體。

場(chǎng)群水平：場(chǎng)內(nèi)有1只及以上陽(yáng)性個(gè)體的場(chǎng)群為陽(yáng)性場(chǎng)群，無(wú)陽(yáng)性個(gè)體的場(chǎng)群為陰性場(chǎng)。

1.2 研究類型與對(duì)象

采用橫斷面研究和病例對(duì)照研究，將晉中市所有母豬存欄數(shù)量為100頭及以上的規(guī)模豬場(chǎng)作為目標(biāo)群。由于母豬是PR的高風(fēng)險(xiǎn)群[6]，因此本研究的研究單元是規(guī)模場(chǎng)的母豬。

1.3 抽樣策略

采用兩階段隨機(jī)抽樣策略：第一階段，確定豬場(chǎng)的抽樣數(shù)；第二階段，確定豬場(chǎng)內(nèi)母豬個(gè)體的抽樣數(shù)。

1.3.1 第一階段 使用WinEpi流行病學(xué)軟件，設(shè)預(yù)期群流行率50%、置信水平95%、可接受誤差8%，采用估計(jì)流行率方法[7]，計(jì)算抽樣豬場(chǎng)數(shù)量為51個(gè)。對(duì)全市75個(gè)符合條件的豬場(chǎng)進(jìn)行編號(hào)，通過(guò)在線隨機(jī)數(shù)字發(fā)生器，抽取51個(gè)豬場(chǎng)。

1.3.2 第二階段 使用WinEpi流行病學(xué)軟件，設(shè)預(yù)期個(gè)體流行率10%[5]、置信水平95%，采用發(fā)現(xiàn)疫病的抽樣策略，計(jì)算出抽取個(gè)體數(shù)量為30個(gè)。采用系統(tǒng)隨機(jī)抽樣方法，按照一定的間隔，抽取定位欄中的母豬個(gè)體，間隔數(shù)量n=母豬存欄數(shù)N/30。

1.4 檢測(cè)方法

采用IDEXX公司的PRV gpI-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行母豬野毒感染抗體檢測(cè)，獲得本市規(guī)模豬場(chǎng)PR場(chǎng)群表觀流行率。試驗(yàn)的敏感性（Se）為98%，特異性（Sp）為99%[8]。

1.5 問(wèn)卷設(shè)計(jì)

設(shè)計(jì)“晉中市規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估調(diào)查表”，對(duì)規(guī)模豬場(chǎng)基礎(chǔ)信息、地理位置、生產(chǎn)管理、消毒措施、免疫情況等進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。

1.6 數(shù)據(jù)分析

1.6.1 場(chǎng)群流行率估計(jì) 場(chǎng)群表觀流行率（HAP）=陽(yáng)性規(guī)模場(chǎng)數(shù)/總抽樣規(guī)模場(chǎng)數(shù)。場(chǎng)群真實(shí)流行率（HTP）計(jì)算公式為：

HTP=(HAP+HSp-1)/(HSe+HSp-1)，HSe=1-[1-

p×Se-(1-p)(1-Sp)]n，HSp=Spn。其中p為群內(nèi)預(yù)期流行率，Se為試驗(yàn)的敏感性，Sp為試驗(yàn)的特異性，n為場(chǎng)內(nèi)豬只抽樣數(shù)量。

1.6.2 風(fēng)險(xiǎn)因素分析 將血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果和問(wèn)卷調(diào)查中收集到的豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理信息，用SPSS軟件進(jìn)行單因素分析；將疾病狀態(tài)和每個(gè)解釋變量之間的關(guān)聯(lián)，通過(guò)卡方檢驗(yàn)，篩選出P＜0.05的變量，然后進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 問(wèn)卷調(diào)查情況

本次調(diào)查的51個(gè)種豬場(chǎng)中，母豬存欄數(shù)在500頭以上的豬場(chǎng)占25.49%（13/51），存欄數(shù)在300～499頭的豬場(chǎng)占21.57%（11/51），存欄數(shù)300頭以下的豬場(chǎng)占52.94%（27/51）。從問(wèn)卷調(diào)查調(diào)查結(jié)果看，37.25%（19/51）的豬場(chǎng)方圓3 km內(nèi)有其他家畜養(yǎng)殖場(chǎng)、交易市場(chǎng)或者屠宰場(chǎng)，分別有45.10%（23/51）的豬場(chǎng)1年內(nèi)引進(jìn)豬只和引進(jìn)公豬精液（表1）。

2.2 場(chǎng)群流行率

對(duì)來(lái)自51個(gè)場(chǎng)的1 530份血清樣品進(jìn)行PRV gpI-ELISA抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)28個(gè)場(chǎng)的523份樣品為陽(yáng)性。群表觀流行率為：HAP=28/51=54.90%，計(jì)算得出真實(shí)流行率為40.90%（95%CI：27.3%～54.5%）。

2.3 風(fēng)險(xiǎn)因素分析

2.3.1 單因素分析 對(duì)調(diào)查問(wèn)卷中收集的 22個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行單因素分析，結(jié)果篩選到 3個(gè)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素（P＜0.05）：“方圓3 km內(nèi)有其他家畜養(yǎng)殖場(chǎng)、交易市場(chǎng)或者屠宰場(chǎng)”為風(fēng)險(xiǎn)因素，“引進(jìn)豬只檢測(cè)PRV感染抗體和1年內(nèi)引進(jìn)公豬精液”為保護(hù)性因素（表2）。

2.3.2 多因素 Logistic 回歸分析 篩選出單因素分析P＜0.05的3個(gè)因素：“方圓3 km內(nèi)是否有其他家畜養(yǎng)殖場(chǎng)、交易市場(chǎng)或者屠宰場(chǎng)”（X1），“引進(jìn)豬只檢測(cè)PRV感染抗體”（X2），“1年內(nèi)引進(jìn)公豬精液”（X3）。對(duì)這3個(gè)因素應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)X1與X2之間有相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)為-0.580，故舍去X1，將其余兩個(gè)因素納入Logistic模型分析。多因素入Logistic 回歸結(jié)果顯示，最終進(jìn)入模型的因素是X2（表3）。擬合方程：LogP/(1-P)=2.303-3.401X2（-2LL=12.129）。模型的ROC曲線下面積為0.835（95%CI：0.658～1.000），見(jiàn)圖1。

表1 問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果

表2 傳播風(fēng)險(xiǎn)因素單變量分析結(jié)果

表3 傳播風(fēng)險(xiǎn)因素多因素Logistic回歸分析

圖1 回歸模型的ROC曲線

3 討論

相關(guān)資料表明，仔豬PRV gpI抗體呈陽(yáng)性并不代表其感染了PRV，也有可能是母源抗體。而且，母豬群帶毒是PR凈化的最大障礙，如果豬場(chǎng)不能控制后備母豬的PRV感染，則很難控制和凈化PR，為此對(duì)母豬群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查和分析更具意義[9]。

免疫PR疫苗可以使豬群形成有效的保護(hù)力，在一定程度上可以阻止臨床發(fā)病和降低經(jīng)濟(jì)損失，但不能完全防止病毒入侵，也不能清除已經(jīng)感染的病毒。因此，PRV凈化絕不能僅僅依賴疫苗，gpI抗體監(jiān)測(cè)、及時(shí)淘汰陽(yáng)性豬只和加強(qiáng)生物安全等綜合措施也非常重要。同時(shí)，開(kāi)展PR場(chǎng)間流行風(fēng)險(xiǎn)因素系統(tǒng)研究，找到PRV流行的主要風(fēng)險(xiǎn)因素，將有助于PR防控和凈化。

“1年內(nèi)引進(jìn)公豬精液”是本次研究找到的保護(hù)性因素，原因可能為引進(jìn)公豬精液的養(yǎng)殖場(chǎng)更加注重病原學(xué)檢測(cè)等生物安全措施。

本研究只抽取了晉中市的51個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，因樣本量較少，在數(shù)據(jù)分析時(shí)可能沒(méi)有找出所有的風(fēng)險(xiǎn)因素。所有檢測(cè)樣品均為豬場(chǎng)技術(shù)人員采集，工作人員未能進(jìn)場(chǎng)，在抽樣環(huán)節(jié)可能會(huì)存在一定程度的選擇偏倚。此次問(wèn)卷調(diào)查前，雖然對(duì)調(diào)查人員進(jìn)行了培訓(xùn)，問(wèn)卷回收率為100%，但依然存在回答問(wèn)卷不真實(shí)的情況，有些養(yǎng)殖場(chǎng)1年內(nèi)未引進(jìn)精液，但還是填寫(xiě)了引進(jìn)精液時(shí)進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。此外，由于部分豬場(chǎng)經(jīng)緯度填寫(xiě)不全，因此未能對(duì)PR陽(yáng)性場(chǎng)進(jìn)行空間分布描述。

4 結(jié)論

本次橫斷面調(diào)查顯示：山西省晉中市規(guī)模豬場(chǎng)PR群體流行率較高，達(dá)到40.90%（95%CI：27.3%～54.5%）；“場(chǎng)區(qū)周圍3 km內(nèi)有其他家畜養(yǎng)殖場(chǎng)、交易市場(chǎng)或者屠宰場(chǎng)”是重要風(fēng)險(xiǎn)因素，反映出飼養(yǎng)密度對(duì)疫病防控具有較大影響，因此新建養(yǎng)殖場(chǎng)要與其他家畜養(yǎng)殖場(chǎng)、交易市場(chǎng)或者屠宰場(chǎng)保持安全的養(yǎng)殖距離；“引進(jìn)豬只時(shí)檢測(cè)PRV感染抗體和1年內(nèi)引進(jìn)公豬精液”是保護(hù)性因素，因此規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)要堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，在引進(jìn)種豬和公豬精液時(shí)一定要進(jìn)行嚴(yán)格地PRV檢測(cè)。