潘莉,朱敏,邰建飛
支原體(MP)是引起兒童社區(qū)獲得性肺炎最常見的病原體之一[1],有報(bào)道顯示兒童支原體肺炎(MPP)可引起高達(dá)40%的社區(qū)獲得性肺炎[2]。支原體感染主要引起呼吸道感染,少數(shù)也可引起嚴(yán)重的肺外表現(xiàn),如腦炎[3],心肌炎[4],腎炎[5]等。MPP大多數(shù)癥狀較輕,是良性、自限性的過程,使用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素臨床癥狀及體征可得到緩解。病原菌的直接作用及機(jī)體的免疫反應(yīng)均在MPP中起重要作用。既往有研究報(bào)道,血清中某些細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-17(IL-17)、干擾素-γ(INF-γ)在MPP的發(fā)生及發(fā)展中起重要作用。其水平變化對(duì)判斷MPP病情及預(yù)后有重要的臨床價(jià)值[6-10]。白細(xì)胞介素-36(IL-36)是細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1(IL-1)家族中的成員,主要在皮膚、肺及腸等臟器的上皮細(xì)胞及免疫細(xì)胞中,誘導(dǎo)細(xì)胞的活動(dòng)及細(xì)胞因子的分泌[11],但目前國內(nèi)尚無其與MPP相關(guān)性的臨床報(bào)道。本文通過對(duì)MPP患兒IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ測(cè)定,旨在為臨床診療提供理論基礎(chǔ)。
1.1一般資料本資料選取2011年11月1日至2015年11月1日在常州市金壇區(qū)人民醫(yī)院住院的確診為MPP的患兒45例為MMP組,以腹股溝疝修補(bǔ)術(shù)的19例患兒為對(duì)照組。本研究通過常州市金壇區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),病人或近親屬對(duì)研究方案簽署知情同意書。MMP組入選標(biāo)準(zhǔn):①肺炎診斷符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》的診斷標(biāo)準(zhǔn),即:具備發(fā)熱、咳嗽、肺部啰音等呼吸道表現(xiàn),伴胸部影像學(xué)單側(cè)或雙側(cè)異常改變;②痰液MP熒光定量PCR陽性和血MP-IgM抗體陽性或雙份血清第二份血清IgG抗體滴度上升4倍;③病史資料完整;④除外先天性心臟病、遺傳代謝疾病、神經(jīng)系統(tǒng)及支氣管肺發(fā)育不良以及免疫抑制患兒。
1.2研究方法入院24 h內(nèi)采集MPP組與對(duì)照組的外周靜脈血行血常規(guī)、血生化、體液免疫、細(xì)胞免疫及血清細(xì)胞因子測(cè)定。行細(xì)胞因子測(cè)定時(shí),外周血經(jīng)3 000 r/min離心后,分離出血清并保存在溫度為-80 ℃的冰箱中待檢測(cè)。采用ELISA方法檢測(cè)血清中細(xì)胞因子IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ的含量。MPP組在出院前再次抽外周靜脈血行細(xì)胞因子測(cè)定。所有檢測(cè)操作嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)程完成。
2.1基本資料MPP患兒的臨床及實(shí)驗(yàn)室資料見表1。兩組性別及年齡均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。MPP組中3歲以下15例(33.3%),3歲以上30例(66.6%)。MPP組中支氣管肺炎占20例(44.4%),大葉性肺炎占25例(55.6%),其中5例伴有胸腔積液,均為大葉性肺炎。
表1 MPP患兒的臨床及實(shí)驗(yàn)室資
2.2MPP組及對(duì)照組患兒血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平MPP患兒血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平在急性期為:[(723±263)、(398±218)、(413±291)、(3 144±1 932)] ng/L;而對(duì)照組為:[(481±198)、(212±39)、(302±87)、(1 632±917)] ng/L,可見較對(duì)照組均明顯增高(均P<0.05),見圖1。
圖1 MPP組與對(duì)照組血清IL-4,IL-36,IL-17及INF-γ水平比較
圖2 大葉性肺炎與支氣管肺炎患兒血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平比較
圖3 MPP患兒治療前后血清IL-4、IL-36、IL-17及INF-γ水平比較
2.3支氣管肺炎及大葉性肺炎患兒血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平大葉性肺炎患兒血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平較支氣管肺炎患兒增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),結(jié)果見圖2。
2.4MPP組患兒治療前后血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平患兒治療前后血清IL-4、IL-36、IL-17及INF-γ水平均較前下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),結(jié)果見圖3。
2.5MPP組患兒治療前不同年齡組中血清IL-4,IL-17,IL-36及INF-γ水平3歲以下MPP患兒這四種細(xì)胞因子血清水平分別為[(513.2±239.0)、(468.4±337.8)、(445.7±231.6)、(3 489.5±1 722.7)] ng/L。3歲以上患兒這四種細(xì)胞因子血清水平分別為[(782.0±325.3)、(321.6±187.5)、(303.5±180.9)、(2 335.9±1 457.9)]ng/L,均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
近年來MP感染率呈逐年增高的趨勢(shì)[12]。免疫反應(yīng)一方面可保護(hù)機(jī)體免受病原菌侵害,但過度的炎癥反應(yīng)可加重疾病的進(jìn)程。免疫炎癥中產(chǎn)生的細(xì)胞因子相互影響、相互作用、相互關(guān)聯(lián),形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)體系,在疾病的發(fā)展過程中起重要作用,同時(shí)對(duì)判斷疾病的進(jìn)程有指導(dǎo)意義。本研究我們通過對(duì)MPP患兒血清細(xì)胞因子測(cè)定,發(fā)現(xiàn)MPP患兒血清IL-4,IL-17,IL-36及INF-γ水平在急性期較對(duì)照組均明顯增高,在恢復(fù)期下降,且大葉性肺炎,>3歲年齡組MPP患兒這四個(gè)細(xì)胞因子均明顯增高。
劉賀臨等[6]發(fā)現(xiàn)MPP患兒血清IL-4水平急性期明顯高于恢復(fù)期和健康對(duì)照組,與我們結(jié)果相同,但血清INF-γ水平在急性期、恢復(fù)期及對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,MPP患兒急性期血清IL-4/INF-γ比值增高提示Th2細(xì)胞在MPP的免疫炎癥中起主要作用。而左慧敏等[13]發(fā)現(xiàn),IFN-γ質(zhì)量水平急性期較恢復(fù)期和對(duì)照組明顯升高,說明急性期血清IFN-γ水平對(duì)疾病的發(fā)展有重要提示作用。Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IFN-γ增高激活NK細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞,增加對(duì)病原體的殺傷能力。而IL-4通過B淋巴細(xì)胞分泌IgE,介導(dǎo)過敏反應(yīng),其水平增高在一定程度上可為機(jī)體的自我防御反應(yīng),以減輕MP所致的炎癥反應(yīng),有利于機(jī)體增強(qiáng)抗炎效應(yīng)、保護(hù)自身及清除病原,使機(jī)體的損害減少到最低。IFN-γ及IL-4的升高在一定程度上能反應(yīng)Th1及Th2細(xì)胞的功能。但在MP感染免疫中,究竟哪類免疫反應(yīng)起主導(dǎo)作用一直存在爭(zhēng)論。IL-17在肺炎支原體中的作用早在2007年就被報(bào)道,是Th17細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子。王冬梅[9]等發(fā)現(xiàn)MPP急性期IL-17水平明顯高于恢復(fù)期和對(duì)照組,與我們結(jié)果相同,說明IL-17在急性期明顯增加,參與MPP免疫應(yīng)答反應(yīng)。
大葉性肺炎患兒細(xì)胞因子較支氣管肺炎患兒增高差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,一方面,與大葉性肺炎多見于大年齡組患兒,免疫功能相對(duì)發(fā)育完善,免疫應(yīng)答反應(yīng)較劇有關(guān);另一方面,說明MP引起的大葉性肺炎本身炎性反應(yīng)較劇,與大葉性肺炎患兒胸腔積液發(fā)生率高相符,同時(shí)也與本研究中>3歲患兒血清細(xì)胞因子相對(duì)增高相符合。
IL-36與MPP的相關(guān)性既往無類似報(bào)道。有研究表明,吸煙、TNF-α、IL-1β,IL-17等刺激下,支氣管上皮細(xì)胞分泌IL-36增加[14-15]。IL-36可引起肺組織中的中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞數(shù)量增多,氣道反應(yīng)性增高及黏液分泌增加[10],本研究中血清IL-36水平在急性期、大葉性肺炎、>3歲患兒中明顯增高,可能與MPP患兒血清TNF-α水平增高及MP對(duì)支氣管上皮細(xì)胞刺激有關(guān),但其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。
綜上所述,在MPP急性期、大葉性肺炎、>3歲年齡組中IL-4,IL-17,IL-36及INF-γ明顯增高,對(duì)病情評(píng)估有一定指導(dǎo)意義,有助于進(jìn)一步指導(dǎo)MPP的臨床治療。