劉姜伶

深圳市龍華區(qū)婦幼保健院婦保科，廣東深圳 518131

B族鏈球菌是造成新生兒和孕產(chǎn)婦感染的重要原因，B族鏈球菌感染還有可能造成流產(chǎn)、早產(chǎn)以及胎兒窘迫等不良結(jié)局，嚴(yán)重的可能影響到新生兒神經(jīng)功能、誘發(fā)敗血癥及腦膜炎等[1-2]。西方國家對(duì)孕婦生殖道進(jìn)行B族鏈球菌進(jìn)行篩查，通過針對(duì)性的藥物治療，很大程度上降低了新生兒的死亡率。既往研究主要探究B鏈球（groupBstreptococci，GBS）的流行水平，但母嬰傳播的風(fēng)險(xiǎn)、妊娠結(jié)局的預(yù)防均不清楚。本研究分析孕婦發(fā)生B 族溶血性鏈球菌感染與胎膜早破的相關(guān)性，預(yù)測母嬰傳播風(fēng)險(xiǎn)和分析影響因素，為采取有效的預(yù)防與控制措施以遏制母嬰GBS 流行提供理論依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取龍華區(qū)2015年7月～2017年6月期間因胎膜早破住院的宮內(nèi)單胎妊娠的100例作為研究對(duì)象，入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）B超檢查顯示為單胎活胎，且為頭位；（2）孕婦年齡20～35。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）拒絕配合本研究者；（3）患者泌尿系感染、內(nèi)科其他合并癥或產(chǎn)科并發(fā)癥。年齡22～35歲，平均（27.5±2.4）歲；平均體重（62.3±2.7）kg；孕周均為36～38周。另選擇年齡、孕周與觀察組相匹配的正常孕婦100例作為對(duì)照組。年齡20～35歲，平均（27.1±2.1）歲；平均體重（61.2±2.5）kg；孕周均為36～38周。兩組患者年齡、孕周、體重、生產(chǎn)次數(shù)等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 GBS檢測方法

所有孕婦采用膀胱截石位，使用氯化鈉對(duì)陰道口以及肛周進(jìn)行清潔之后采集分泌物，使用無菌棉拭子在陰道下輕輕旋轉(zhuǎn)，然后使用潔凈的無菌棉拭子插入孕婦肛門，得到直腸分泌物，選1份樣本送檢。嚴(yán)格遵照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定，洗脫之后使用肉湯顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)，在37℃的環(huán)境下培養(yǎng)24h，對(duì)比使用選擇性顯色平板以及普通血培養(yǎng)基，疑似的樣本使用進(jìn)口生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定[3-5]。

1.3 分子分型方法

對(duì)分離的GBS菌株進(jìn)行血清型、脈沖場凝膠電泳（PFGE）分型、MLST分型檢測。（1）多位點(diǎn)序列分型（multilocus sequence typing，MLST）：根據(jù)MLST數(shù)據(jù)庫（http://www.mlst.net）設(shè)計(jì)檢測7個(gè)管家基因（adhP，pheS，atr，glnA，sdhA，glcK，tkt）所用的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）即引物、反應(yīng)體系、反應(yīng)條件。PCR產(chǎn)物純化后進(jìn)行雙向測序，結(jié)果通過MLST分型數(shù)據(jù)庫（http://www.mlst.net）進(jìn)行分型。采用eBURST 程序?qū)赀M(jìn)行遺傳進(jìn)化分析。（2）PFGE電泳：細(xì)菌DNA提取物包埋于瓊脂塊中，用SmaI限制性核酸內(nèi)切酶在原位對(duì)整個(gè)細(xì)菌染色體進(jìn)行酶切，設(shè)置電泳參數(shù)電泳，得到的條帶應(yīng)用Quantity one軟件進(jìn)行聚類分析，分析菌株間的遺傳距離和同源性[6-8]。

1.4 治療方法

GBS感染患者采取治療措施進(jìn)行干預(yù)，選擇在孕婦臨產(chǎn)或者破膜之后預(yù)防性使用抗生素進(jìn)行治療，給予2.0g氨芐青霉素（華北制藥集團(tuán)先泰藥業(yè)有限公司，H10983081）加入生理鹽水20mL中快速靜脈滴注，48h之后給予1g藥物加入生理鹽水中持續(xù)性靜脈滴注，指導(dǎo)孕婦分娩。對(duì)于青霉素過敏的患者則選擇克林霉素靜脈用藥，直到分娩。

1.5 觀察指標(biāo)

對(duì)兩組患者的胎兒窘迫、新生兒肺炎、早產(chǎn)、產(chǎn)褥感染、剖宮產(chǎn)率、產(chǎn)后出血等情況進(jìn)行隨訪調(diào)查。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行研究分析，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組分泌物GBS陽性率比較

在觀察組患者中測得B族溶血性鏈球菌陽性患者為19例（19.0%)，對(duì)照組中5例（5.0%）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.034，P＜0.05）。見表1。

表1 兩組分泌物GBS陽性率

2.2 GBS感染與胎膜早破比較

GBS（+）患者中胎兒窘迫、新生兒肺炎、早產(chǎn)、產(chǎn)褥感染、剖宮產(chǎn)率、產(chǎn)后出血等發(fā)生率均明顯高于GBS（-），且兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 GBS感染與胎膜早破比較

3 討論

臨床研究發(fā)現(xiàn)，B族鏈球菌感染占圍產(chǎn)期感染的第一位，是造成圍產(chǎn)期感染的主要致病菌[9]。B族鏈球菌屬于條件致病菌，在直腸與陰道寄居，健康女性的生殖道和消化道中約有15%～35%存在B 族鏈球菌[10]，在身體健康的情況下不會(huì)致病，但是懷孕之后生理環(huán)境發(fā)生改變，很可能造成胎膜感染以及子宮內(nèi)膜感染等，還可能通過母嬰垂直傳播方式向新生兒傳染[7]。GBS是新生兒感染的最主要病原體，已成為新生兒感染性疾病發(fā)病和死亡的首位病因[11-13]。GBS感染可引起新生兒敗血癥、肺炎、腦膜炎，所造成新生兒感染性疾病負(fù)擔(dān)呈逐年上升趨勢[9]。

新生兒GBS感染主要分為早發(fā)型感染和晚發(fā)型感染[14-15]。早發(fā)型感染多發(fā)生在出生后至7d內(nèi)，尤其生后24h內(nèi); 主要臨床表現(xiàn)為肺炎和敗血癥。早發(fā)型感染主要通過產(chǎn)道由母親傳播給新生兒，但醫(yī)源性傳播在早發(fā)型感染中的作用仍然不清楚。晚發(fā)型感染，多見于出生后7d～3個(gè)月足月兒。主要表現(xiàn)為腦膜炎，常呈隱匿性發(fā)病[10-12]。而晚發(fā)型感染的傳播途徑仍未闡明，可能來源于GBS攜帶母親、感染的母乳、醫(yī)源性傳播、受污染的玩具等[16-18]。值得關(guān)注的是，國內(nèi)研究主要局限于GBS表型和血清型別分析，導(dǎo)致探究GBS傳播途徑的證據(jù)不足，母嬰傳播的風(fēng)險(xiǎn)仍未清楚[16]。

研究中發(fā)現(xiàn)，觀察組患者中測得B 族溶血性鏈球菌陽性患者為19例（19.0%)，對(duì)照組中5例（5.0%）兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；GBS（+）患者中胎兒窘迫、新生兒肺炎、早產(chǎn)、產(chǎn)褥感染、剖宮產(chǎn)率、產(chǎn)后出血等發(fā)生率均明顯高于GBS（-），且兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示妊娠晚期的孕婦感染B族溶血性鏈球菌導(dǎo)致妊娠結(jié)局產(chǎn)生嚴(yán)重的不良影響。長期以來我國對(duì)GBS的感染現(xiàn)狀重視不夠，然而近期國內(nèi)研究結(jié)果顯示新生兒肺炎死亡病例中，GBS是第一位的致病菌。再者，由于國內(nèi)抗生素的濫用，使得全國范圍對(duì)圍產(chǎn)期GBS的篩檢幾乎空白，如今國家不斷的出臺(tái)相關(guān)的政策，對(duì)抗生素的臨床應(yīng)用與管理進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控，加之GBS的危害比較嚴(yán)重，這使得GBS的篩檢尤為重要且必要。