程 雁 郭 恒 何蔚葒 王亞南 安明理 周付忠

（河南省科學(xué)院生物研究所有限責(zé)任公司/河南省微生物工程重點實驗室，河南鄭州450008）

加拿大森林面積4億多公頃，占其國土總面積的31%。加拿大地處亞寒帶及寒帶地區(qū)，森林以亞寒帶針葉林為主。山火過后的森林土壤適合野生羊肚菌的生長，每年都有大批羊肚菌采摘者前往加拿大西北地區(qū)“淘金”，野生羊肚菌的價格大致在每磅30加元（約328元/kg）。加拿大人工栽培羊肚菌較少，所以羊肚菌價格還有上升的空間。

筆者應(yīng)加拿大ECO CONNECT INC公司的邀請，前往加拿大溫哥華指導(dǎo)當(dāng)?shù)氐南湓约忭斞蚨蔷▓D1）。ECO CONNECT INC以工廠化生產(chǎn)金針菇、杏鮑菇、蟹味菇、灰樹花等品種為主，產(chǎn)品在加拿大菌類高端市場有一定的影響力。

1 羊肚菌生長的環(huán)境條件

1.1 溫度

羊肚菌菌絲體在3～28℃均能生長，最適溫度為18～22℃，低于3℃停止生長，高于28℃停止生長或死亡；羊肚菌子囊孢子散發(fā)的適宜溫度為15～18℃，孢子萌發(fā)的適宜溫度為15～18℃；晝夜溫差大可促進(jìn)子囊果的形成。

1.2 濕度

羊肚菌適宜在濕潤的環(huán)境中生長，在營養(yǎng)生長階段對土壤含水量要求不高，30%～70%均能生長，但以45%～55%最為適宜，人工栽培羊肚菌的培養(yǎng)基含水量以60%～65%最為適宜；子實體發(fā)育過程中空氣相對濕度以80%～90%最為適宜。

1.3 光照

羊肚菌營養(yǎng)生長階段不需要光照，光照過強(qiáng)會抑制菌絲生長，菌絲在暗處或微光條件下生長快。光照對子實體的形成有一定的促進(jìn)作用。羊肚菌有較強(qiáng)的趨光性，其子囊果往往朝著有光方向彎曲生長。覆蓋物過厚或樹林過密以及全天候太陽直射的地方都不適宜羊肚菌子實體的生長。

1.4 空氣

羊肚菌菌絲生長階段對空氣無明顯反應(yīng)，但是在子實體的形成和生長發(fā)育階段對空氣比較敏感。在子實體生長期，若二氧化碳濃度超過0.03%，則必須及時通風(fēng)換氣。此外，羊肚菌與蔬菜、花草等植物間作更有利于高產(chǎn)。

1.5 pH

羊肚菌生長的適宜pH為6.5～8.0，最適pH為7.0～7.9；若pH下降至4.5以下或高于9.0，菌絲停止生長或死亡。

2 箱栽羊肚菌栽培技術(shù)

2.1 培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：黃豆芽300 g煮汁，羊肚菌基腳土100 g懸浮液，玉米粉100 g，麩皮40 g，葡萄糖20 g，蘋果 50 g，KH2PO41 g，MgSO41 g，瓊脂 20 g，加水至1000 mL。在121℃下滅菌30 min，冷卻后用于母種的分離及純化培養(yǎng)。

原種培養(yǎng)基：硬木木屑75%，黃豆粉5%，麩皮10%，玉米粉5%，石膏1%，蔗糖1%，過磷酸鈣1%，林下腐殖土1%，泥炭土1%，水110%。混勻、裝瓶滅菌后用于原種培養(yǎng)。

栽培種培養(yǎng)基：小麥粒25%，雜木屑30%，谷殼14%，長1 cm玉米芯顆粒30%，每50 kg料再加KH2PO420 g，MgCl 5 g，蔗糖 500 g，過磷酸鈣 500 g。拌勻后加含腐殖質(zhì)豐富的土壤浸出液，含水量60%左右，裝入17 cm×33 cm聚丙烯塑料袋，每袋裝料約500 g，在121℃下滅菌120 min，冷卻后于無菌室內(nèi)接入原種。

2.2 菌種的分離及培養(yǎng)

將采收的新鮮羊肚菌子實體用流水沖洗3～5 min，經(jīng)75%酒精擦洗后，置于0.1%的HgC1溶液中浸泡2 min，無菌水沖洗3～5次后，用無菌紗布吸干表面水。然后從菌蓋和菌柄內(nèi)側(cè)各取一塊米粒大小組織，接入已滅菌的平板培養(yǎng)基中，22～24℃無菌箱內(nèi)弱光培養(yǎng)2～3 d后，挑選生長良好的菌絲轉(zhuǎn)接于試管斜面培養(yǎng)基中純化培養(yǎng)，以獲得純母種。將所得的純母種接種到原種培養(yǎng)基上培養(yǎng)，即可得到原種。再將原種接入栽培種培養(yǎng)基，置于23～25℃下培養(yǎng)30 d左右，待菌絲長滿袋1周后，即可用于栽培。

圖1 箱栽羊肚菌

圖2 放置營養(yǎng)液

2.3 栽培基質(zhì)的配制及播種

箱栽羊肚菌培養(yǎng)料的主要組成為30%硬木木糠（屑）、硬木樹皮和70%腐殖質(zhì)泥土。腐殖質(zhì)泥土主要包含30%食用菌下腳料堆肥，30%泥炭土，40%泥土以及適量的石灰粉、石膏粉和草木灰。

先將硬木木糠（屑）和硬木樹皮培養(yǎng)料高壓滅菌，冷卻后倒入攪拌機(jī)，然后加入腐殖質(zhì)泥土及羊肚菌菌種，用電動攪拌機(jī)充分?jǐn)嚢?，再?jīng)傳送帶運(yùn)送到每一箱，料面上人工覆蓋3～4 cm厚的腐殖質(zhì)泥土。

2.4 覆土要求

選擇當(dāng)年生長過羊肚菌的地方，鏟取土層30 cm以內(nèi)的腐殖土作為覆土。土質(zhì)越好，出菇越多，產(chǎn)量也就越高。

2.5 菌絲培養(yǎng)

在16～18℃培養(yǎng)5～7 d，可以看到菌絲爬到泥土表面。菌絲培養(yǎng)15 d后開始放置營養(yǎng)瓶。將瓶身縱向劃開，使瓶內(nèi)基質(zhì)與箱內(nèi)培養(yǎng)基質(zhì)相接觸（圖2）。

2.6 出菇管理

羊肚菌子實體形成的適宜溫度為4～16℃，低于4℃或高于18℃都不利于子實體的生長發(fā)育。羊肚菌菌絲生理成熟時，基質(zhì)內(nèi)形成的菌核上會出現(xiàn)晶亮的小水珠，從小水珠中間形成子實體原基凸起。原基開始為小油菜籽大小的黑點，然后慢慢長高、長大；發(fā)育到小麥粒大小時，可分辨出羊肚菌子實體的輪廓，看清菌柄和菌蓋的特征。小黑點生成后大概1 d就完全分裂形成指甲蓋大小羊肚菌子實體。慢慢地羊肚菌會長大，一般半個拳頭大，但也有更大的。網(wǎng)面完全張開即可采收。

2.7 采收加工

子實體出土后7～10 d成熟，顏色由深灰色逐漸變成淺灰色或黃褐色，菌蓋表面的蜂窩狀凹陷充分伸展時即可采收。采收后應(yīng)及時清理泥土，按質(zhì)量分等級及時出售或者曬干（干制時勿弄破菌蓋）。將成品裝于塑料袋內(nèi)密封，置陰涼、干燥、通風(fēng)處保存。