宋 涌

（贛州市白塔水上木材檢查站，江西 贛州 341000）

1 材料和方法

1.1 材料來源

加快沉香樹組織繁殖培育實(shí)驗(yàn)的種子材料是半年生的同期沉香樹種子苗，選用優(yōu)良種子苗，以有效保障試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.2 研究方法

選取沉香樹種子苗優(yōu)株上生長健壯的枝條，并除掉葉片，用干凈自來水沖洗大約30min，除掉雜質(zhì)。在進(jìn)行高度清潔和消毒工作的工作臺上消毒處理枝條表面。用75%的試驗(yàn)用酒浸泡30s，然后用0.1%升汞液浸泡7min，最后用標(biāo)準(zhǔn)的無菌水沖洗7～8次，保證枝條上不帶有除試驗(yàn)添加的液體之外的其他液體。接著用無菌吸水紙吸干無菌水，下一步切去與藥液直接接觸的枝條傷口部分，將試驗(yàn)枝條切成1.5～2.5cm的小長段，帶有1～2個(gè)葉芽，將切好的長段作為備用。培養(yǎng)基的選用是以MS培養(yǎng)基，附加3%的蔗糖，0.6%的卡拉膠以及不同濃度配比的激素，調(diào)制pH值為5.8，嚴(yán)格按照植物生長所需的植物激素制作培養(yǎng)基，保證培養(yǎng)基里的各項(xiàng)物質(zhì)和數(shù)值都在試驗(yàn)預(yù)設(shè)的控制下[1]。另外，培養(yǎng)溫度應(yīng)控制在25℃左右，溫差不超過2℃，光照時(shí)間應(yīng)在10h/d，光照強(qiáng)度應(yīng)在2000～3000Lx。同時(shí)，在開展對照實(shí)驗(yàn)的過程中要保證實(shí)驗(yàn)條件的一致性，在實(shí)驗(yàn)的過程中遵循單一變量原則。

2 結(jié)果探究

2.1 不同培養(yǎng)基中沉香樹外殖體的發(fā)展?fàn)顟B(tài)

為了更好地探究各種培養(yǎng)基的組成要素對沉香樹外殖體的誘導(dǎo)功效，尋找最優(yōu)良的培養(yǎng)基組成模式，每1個(gè)處理接種40個(gè)枝段，同時(shí)有4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)為10枝段，基本的培養(yǎng)基是1/2Ms。

當(dāng)外殖體接種7d時(shí)，葉芽處于萌芽抽長的狀態(tài)，20d以后，大量的基部脹大，在35d時(shí)，對外殖體芽的誘導(dǎo)率進(jìn)行了1次統(tǒng)計(jì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，外殖體的誘導(dǎo)率是隨著對培養(yǎng)基中所加入的6BA的濃度不同而變化的。外殖體的誘導(dǎo)出芽率會隨著所添加的6BA的濃度加大而變得更低。伴隨著6BA濃度的不斷上升，外殖體的誘導(dǎo)出芽率變得越來越異常，甚至呈現(xiàn)出玻璃化的狀態(tài)。通過對比觀察發(fā)現(xiàn)，對不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的最佳選項(xiàng)是1號，1號培養(yǎng)基的平均誘導(dǎo)率是最高的，且外殖體的表現(xiàn)情況也是最好，其平均誘導(dǎo)率高達(dá)85%。

2.2 不同的培養(yǎng)基對沉香樹芽的增殖造成不同影響

分割誘導(dǎo)出的葉芽，在1號培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖，之后的繼代增殖試驗(yàn)培養(yǎng)基展開。每個(gè)都接30芽，設(shè)計(jì)了3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)都為10芽，基礎(chǔ)的培養(yǎng)基是2/3Ms，對增殖率的統(tǒng)計(jì)于40d進(jìn)行，得到了相應(yīng)的結(jié)果。通過觀察發(fā)現(xiàn)，在沉香樹芽的增長過程中，生長素的6BA的濃度以及水解乳蛋白添加都會對沉香樹葉芽的增長產(chǎn)生巨大的影響。通過添加水解乳蛋白能顯著提高沉香葉芽的增殖率。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，6BA的濃度和沉香葉芽的增殖率呈現(xiàn)反比。從培養(yǎng)基5～8號的對比中可以看出，5號培養(yǎng)基是最佳的選擇。

2.3 生長素IBA、NAA對沉香樹不定芽生根的影響

將繼代增殖培養(yǎng)基上生長長度為2～3cm的沉香樹芽切下來，接種在培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基為1/3MS，再添加不同濃度的IBA和NAA，總共有4種處理方式，每1處理接30芽，設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)10個(gè)芽，50d統(tǒng)計(jì)生根率，得出結(jié)果。

表1 外植體種于不同培養(yǎng)基的表現(xiàn)情況

表2 不同培養(yǎng)基對沉香樹芽增殖的影響

表3 生長素IBA，NAA對沉香樹誘導(dǎo)不定芽生根的影響

結(jié)果顯示，NAA對接種芽誘導(dǎo)不定根、根數(shù)和根的長度效果均比IBA明顯，生根率和培養(yǎng)基的濃度成反比，生根率多的培養(yǎng)基濃度比較低。通過各個(gè)濃度培養(yǎng)基中生根率的對比，易發(fā)現(xiàn)哪一組的培養(yǎng)基更適合提高沉香樹生根率。

2.4 栽培基質(zhì)對沉香樹培苗移栽成活率的影響

組培苗經(jīng)過生根培養(yǎng)工作，長根以后才可以進(jìn)行移栽。移栽前株苗應(yīng)該7～10d，然后將小苗洗干凈以后粘附在卡拉膠上，再用1500倍液的甲基托布津浸泡6min，種植在消毒過的基質(zhì)上，要求棚內(nèi)空氣濕度80%～95%，然后統(tǒng)計(jì)小苗移栽成活率?？傻贸?，不同濃度的栽培基質(zhì)對沉香樹組織培苗成活率和苗的生長影響比較大。泥炭土與河沙的比值為2∶1的基質(zhì)，沉香樹苗的移栽成活率和芽長度以及根的長度生長發(fā)育最快最好，其他種類比例的基質(zhì)移栽成活率相對較低。

3 結(jié)論

綜上所述，在沉香樹組織培養(yǎng)過程中，每個(gè)階段都有最合適的培養(yǎng)基，在不定芽誘導(dǎo)的階段，最合適的培養(yǎng)基為1號培養(yǎng)基，而芽的繼代增殖培養(yǎng)基的選擇，最佳選擇是5號培養(yǎng)基。而生根培養(yǎng)基的最佳選擇則是9號培養(yǎng)基。在沉香樹的增殖過程中，6BA的濃度有著舉足輕重的作用。6BA的濃度越高，導(dǎo)致芽的增值率越低，嚴(yán)重的會使芽表現(xiàn)出玻璃化或是基部的過渡膨大。而LH會促進(jìn)芽的增殖率的提高。在沉香組培苗生根階段，生長素IBA和NAA對其會產(chǎn)生不同的影響。芽對NAA有更強(qiáng)烈的反應(yīng)，能夠有效提高沉香樹組培苗的生根率。而IBA則稍遜一籌，芽苗的反應(yīng)并不理想，對生根率沒有明顯的提高。

4 結(jié)語

沉香樹不論是從醫(yī)學(xué)上還是環(huán)境學(xué)上來講，都極有益于社會，但因?yàn)椴糠衷颍纳L速度不能滿足需求，故沉香樹組織培養(yǎng)技術(shù)的研究發(fā)展對社會有巨大貢獻(xiàn)。在現(xiàn)代科技環(huán)境下，沉香樹的培養(yǎng)技術(shù)有更大的發(fā)展空間，試驗(yàn)條件和技術(shù)都在不斷改進(jìn)和發(fā)展，未來沉香樹組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展能夠有望滿足社會需求。