范欽磊，張衍海，劉俊輝，王 棟，劉 飛，鄭增忍，蔣正軍

（中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

動物疫病監(jiān)測是獸醫(yī)工作的重要內(nèi)容，是保障動物疫病防控效果的重要手段，是無疫區(qū)建設(shè)、管理和維持動物疫病無疫狀態(tài)的關(guān)鍵措施[1]?？茖W(xué)開展監(jiān)測工作，獲取監(jiān)測數(shù)據(jù)和信息，可為發(fā)現(xiàn)動物疫病，監(jiān)視疫病流行趨勢，驗證動物衛(wèi)生措施合理性，證明無疫病或無感染狀態(tài)，建立公共衛(wèi)生決策和評估動物衛(wèi)生狀況等獸醫(yī)工作提供信息和決策依據(jù)。

1 監(jiān)測在無疫區(qū)建設(shè)中的作用

1.1 證明無疫

按照“防控實現(xiàn)無疫、監(jiān)測證明無疫、監(jiān)管維持無疫、應(yīng)急恢復(fù)無疫”的總體要求，2008年農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《無規(guī)定動物疫病區(qū)現(xiàn)場評審表》[2]共涉及區(qū)域區(qū)劃、疫病狀況、基礎(chǔ)體系、預(yù)防監(jiān)測、檢疫監(jiān)管、應(yīng)急管理等6部分內(nèi)容，包括96項評審要素，其中10項關(guān)鍵項中與監(jiān)測相關(guān)的占4項，分別是在規(guī)定時間內(nèi)沒有發(fā)生規(guī)定動物疫病；在規(guī)定時間內(nèi)無規(guī)定動物疫病病原感染，并有相應(yīng)的監(jiān)測記錄；規(guī)定動物疫病監(jiān)測范圍、監(jiān)測頻率和樣品數(shù)量符合要求；監(jiān)測記錄及結(jié)果真實、完整，檢測結(jié)果按規(guī)定報告?？茖W(xué)開展監(jiān)測是各無疫區(qū)建設(shè)、管理和維持的關(guān)鍵因素，其中監(jiān)測樣品數(shù)量、監(jiān)測方式、檢測技術(shù)、監(jiān)測結(jié)果分析和處理等關(guān)系到是否能夠證明區(qū)域的無疫狀態(tài)。

1.2 提供早期預(yù)警參考

1.3 提供風(fēng)險分析數(shù)據(jù)和信息

無疫區(qū)建設(shè)和評估，要求獸醫(yī)機構(gòu)定期組織風(fēng)險分析工作，無論是無疫區(qū)的外源風(fēng)險還是內(nèi)源風(fēng)險，如規(guī)定動物疫病的流行率、流行病學(xué)調(diào)查情況、監(jiān)測情況、引入動物是否存在病原擴散可能、動物及動物產(chǎn)品加工過程是否存在病原擴散的可能等風(fēng)險因素，均需要通過開展監(jiān)測獲取相關(guān)支持信息和數(shù)據(jù)。

1.4 探索流通監(jiān)管新模式

目前，對進入無疫區(qū)的繼續(xù)飼養(yǎng)用易感動物普遍采用產(chǎn)地檢疫、指定通道進入和二次檢疫的監(jiān)管模式。積極探索建立以風(fēng)險評估和相關(guān)動物疫病實驗室檢測為前提的產(chǎn)地檢疫制度，增加了產(chǎn)地檢疫的技術(shù)含量，減少了主觀因素對產(chǎn)地檢疫結(jié)果判定的不利影響，使得產(chǎn)地檢疫程序更加合理，判定更加科學(xué)，結(jié)果更加權(quán)威，能夠進一步強化對輸入無疫區(qū)易感動物的監(jiān)管[3]。

2 國際無疫區(qū)監(jiān)測要求

2.1 世界動物衛(wèi)生組織（OIE）

《陸生動物衛(wèi)生法典》動物衛(wèi)生監(jiān)測要求：動物衛(wèi)生監(jiān)測根據(jù)監(jiān)測目的不同主要分為證明無疫或無感染的監(jiān)測，確定動物疫病分布情況和發(fā)生狀況的監(jiān)測。證明無疫監(jiān)測的抽樣數(shù)量應(yīng)滿足統(tǒng)計學(xué)的相關(guān)要求，計算抽樣數(shù)量需要考慮置信水平、預(yù)期流行率和診斷檢測方法的敏感性和特異性等因素，預(yù)期流行率的確定是基于當(dāng)前或歷史動物疫病的流行病學(xué)狀況。

2.2 巴西、哥倫比亞等國家

一是重視被動監(jiān)測。強化對水泡性疫病的監(jiān)測和確診力度，對任何疑似病例均按照口蹄疫確診患病動物處理。二是科學(xué)開展主動監(jiān)測。主要是根據(jù)OIE的原則要求，開展兩步法抽樣監(jiān)測，其中被采樣單位的牛只為6～24月齡犢牛，按月齡分為6～12、13～18、19～24月齡3組，僅對牛抽樣監(jiān)測，不監(jiān)測豬。進行兩步法抽樣監(jiān)測時，設(shè)定的群間預(yù)期流行率為1%，群內(nèi)預(yù)期流行率為5%。三是強化對邊界區(qū)域和高風(fēng)險監(jiān)測區(qū)的主動監(jiān)測。清楚區(qū)域內(nèi)輸入車輛和易感動物的數(shù)量，對易感動物疑似畜群和動物開展檢疫檢測，對自然村的所有易感動物都要進行檢疫，撲殺來源不清的易感動物[4]。

3 國內(nèi)無疫區(qū)監(jiān)測要求

農(nóng)業(yè)部自2014年以來，在《國家動物疫病監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查計劃》[5]中逐步納入了免疫無口蹄疫區(qū)監(jiān)測計劃、免疫無高致病性禽流感區(qū)監(jiān)測計劃和廣州從化無規(guī)定馬屬動物疫病區(qū)監(jiān)測計劃，要求已建成或申請評估的無疫區(qū)參照相關(guān)計劃開展監(jiān)測工作。

3.1 免疫無口蹄疫區(qū)和免疫無高致病性禽流感區(qū)監(jiān)測要求

每個無疫區(qū)每年至少主動監(jiān)測兩次，其中每次抽樣數(shù)量為，海南省不少于4 500份，遼寧、吉林省和膠東半島無疫不少于9 000份（包括保護區(qū)）。每個抽樣點易感動物抽樣數(shù)量不少于30頭/只，不足30頭/只的全采；對牛采樣時，采樣月齡為6～24月齡。區(qū)域內(nèi)有易感野生動物的，應(yīng)對易感野生動物開展監(jiān)測。

3.2 廣州從化無規(guī)定馬屬動物疫病區(qū)監(jiān)測要求

3.2.1 主動監(jiān)測 每年至少開展兩次主動監(jiān)測，其中對馬屬動物開展馬流行性感冒、馬傳染性貧血、馬鼻疽、日本腦炎、伊氏錐蟲病、馬病毒性動脈炎、馬梨形蟲病及馬媾疫監(jiān)測，抽樣點應(yīng)覆蓋無疫區(qū)和保護區(qū)。對豬、牛、羊等易感動物開展日本腦炎和伊氏錐蟲病監(jiān)測，抽樣點應(yīng)覆蓋無疫區(qū)和保護區(qū)的養(yǎng)殖場、屠宰場、自然村和生物安全通道等。對蟲媒和野生動物開展日本腦炎、伊氏錐蟲病、尼帕病、亨德拉、西尼羅河熱及水泡性口炎的調(diào)查和監(jiān)測。

1) 對相鄰回波互相關(guān)函數(shù)進行FFT變換得到式(7)，最大值譜線處對應(yīng)的速度值為vm，假設(shè)左右次譜線處對應(yīng)的速度值分別為v1，v2，則真實速度v∈(v1,v2)；

3.2.2 被動監(jiān)測 對疑似患病、病死、病因不明的馬屬動物以及豬、牛、羊、野鳥、蝙蝠等其他動物，100%采樣送檢。

4 無疫區(qū)監(jiān)測中存在的問題

4.1 缺乏科學(xué)有效的數(shù)據(jù)

缺乏科學(xué)有效的流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)及歷史監(jiān)測數(shù)據(jù)，大部分動物疫病歷史流行狀況不清楚，很難科學(xué)確定無疫區(qū)規(guī)定動物疫病的群間或群內(nèi)預(yù)期流行率，也難以科學(xué)界定流行病學(xué)單元[6]。

4.2 缺乏特定動物疫病監(jiān)測方案

沒有定期、科學(xué)、系統(tǒng)和持續(xù)的病原及抗體監(jiān)測計劃，沒有足夠證據(jù)證明動物的無疫狀態(tài)及免疫效果。一些在建無疫區(qū)所在省份的監(jiān)測工作仍然是以完成國家監(jiān)測計劃為主，沒有針對無疫區(qū)建設(shè)制定相應(yīng)的監(jiān)測方案，也沒有相應(yīng)的無疫區(qū)監(jiān)測經(jīng)費支持[6]。

4.3 部分監(jiān)測方法和試劑沒有經(jīng)過標(biāo)化和評估

多數(shù)診斷試劑沒有注明敏感性和特異性值，導(dǎo)致在進行抽樣計算時樣品量計算不準(zhǔn)確。以口蹄疫檢測為例，口蹄疫3ABC非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性的排除方法相對單一，商品化檢測試劑與國際接軌程度有待提高[6]。

5 有關(guān)思考

5.1 提高監(jiān)測方案的科學(xué)性

制定無疫區(qū)監(jiān)測方案時應(yīng)考慮監(jiān)測范圍的覆蓋面、監(jiān)測時間框架和時效性以及監(jiān)測陽性結(jié)果的后續(xù)處理等因素，重點關(guān)注外引易感動物監(jiān)測、高風(fēng)險區(qū)易感動物監(jiān)測和易感野生動物的監(jiān)測，強化對被動監(jiān)測工作的要求等，進一步提升無疫區(qū)監(jiān)測方案的科學(xué)性。

5.2 注重監(jiān)測工作的銜接性

開展無疫區(qū)建設(shè)的省份應(yīng)根據(jù)年度國家動物疫病監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查計劃的相關(guān)要求，制定本省的無疫區(qū)監(jiān)測計劃或方案，其他規(guī)定動物疫病定點監(jiān)測、常規(guī)監(jiān)測或?qū)ｍ椓餍胁W(xué)調(diào)查中所涉及的抽樣檢測的樣品和結(jié)果，均可以用于證明規(guī)定動物疫病的無疫狀態(tài)。

5.3 重視被動監(jiān)測的重要性

我國基層獸醫(yī)機構(gòu)在監(jiān)測工作中常常忽視了被動監(jiān)測工作的重要性，對養(yǎng)殖、屠宰、加工和流通環(huán)節(jié)的利益相關(guān)方宣傳和培訓(xùn)力度不夠，導(dǎo)致利益相關(guān)方難以有效履行發(fā)現(xiàn)臨床疑似病例或疫情的義務(wù)，獸醫(yī)機構(gòu)在證明無疫狀態(tài)時，因缺少有效的被動監(jiān)測數(shù)據(jù)支撐，而使監(jiān)測方案的科學(xué)性受到質(zhì)疑。無疫區(qū)建設(shè)省份應(yīng)重視被動監(jiān)測工作，及時對上報的臨床疑似病例開展流行病學(xué)調(diào)查和確診等工作。

6 制定無疫區(qū)監(jiān)測方案的建議

6.1 明確監(jiān)測目標(biāo)和要求[7]

6.1.1 明確目標(biāo) 無疫區(qū)監(jiān)測方案旨證明無疫區(qū)在規(guī)定時間內(nèi)沒有發(fā)生規(guī)定動物疫病，且沒有監(jiān)測到規(guī)定動物疫病病原。

6.1.2 明確部門職能

6.1.2.1 省級獸醫(yī)主管部門 負(fù)責(zé)組織區(qū)域內(nèi)的規(guī)定動物疫病監(jiān)測和監(jiān)測方案的制定工作，監(jiān)測方案應(yīng)明確監(jiān)測范圍、監(jiān)測方式、抽樣方法以及對無疫狀態(tài)的監(jiān)測要求等；掌握區(qū)域內(nèi)易感動物（包括易感野生動物）的分布情況及易感動物的養(yǎng)殖方式、種類和數(shù)量等。

6.1.2.2 省級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu) 具體實施監(jiān)測工作，從事動物飼養(yǎng)、屠宰、經(jīng)營、隔離、運輸以及動物產(chǎn)品生產(chǎn)、經(jīng)營、加工及貯藏等活動的單位和個人應(yīng)予以配合。

6.1.2.3 監(jiān)測實驗室 建立保證檢測工作規(guī)范、準(zhǔn)確、公正運行的質(zhì)量保證體系。實驗室必須擁有為保證其質(zhì)量管理體系的運行、檢測所需的專業(yè)技術(shù)人員和管理人員，并應(yīng)定期對抽樣人員和實驗室工作人員進行培訓(xùn)。

6.1.3 明確監(jiān)測范圍與標(biāo)準(zhǔn)

6.1.3.1 監(jiān)測范圍 包括無疫區(qū)和保護區(qū)內(nèi)的種畜禽場、商品畜禽場、活畜禽交易市場、野生易感動物密集活動區(qū)和隔離、屠宰加工、運輸?shù)拳h(huán)節(jié)的易感動物（包括野生動物）及其相關(guān)傳播媒介。

6.1.3.2 檢測標(biāo)準(zhǔn) 采用國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢測方法、農(nóng)業(yè)部指定的檢測方法或OIE《陸生動物衛(wèi)生法典》和《陸生動物診斷試驗和疫苗手冊》的相關(guān)檢測方法；沒有檢測方法時，可采用其他國際標(biāo)準(zhǔn)或診斷試劑提供的方法進行檢測，但需對檢測方法進行驗證。

6.2 確定監(jiān)測方式

6.2.1 開展被動監(jiān)測 從事動物飼養(yǎng)、隔離、屠宰加工、運輸及經(jīng)營等活動的有關(guān)單位和個人，發(fā)現(xiàn)臨床疑似病例或懷疑發(fā)生疫情時應(yīng)立即報告當(dāng)?shù)貏游镆卟☆A(yù)防控制機構(gòu)。從事動物疫病科研、診療、檢驗檢疫以及檢測的相關(guān)機構(gòu)或?qū)嶒炇野l(fā)現(xiàn)陽性或可疑結(jié)果時應(yīng)報當(dāng)?shù)貏游镆卟☆A(yù)防控制機構(gòu)，并定期向其報告日常診療和檢測匯總信息。動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)在接到疑似疫情報告、可疑或陽性病料（樣品）和疫情舉報后，應(yīng)立即開展現(xiàn)場核查、流行病學(xué)調(diào)查、抽樣和實驗室確診等工作。

6.2.2 開展主動監(jiān)測 無疫區(qū)主動監(jiān)測可通過流行病學(xué)調(diào)查、疫情監(jiān)視和實驗室監(jiān)測獲取數(shù)據(jù)和信息。

6.2.2.1 流行病學(xué)調(diào)查 省級獸醫(yī)主管部門可通過開展流行病學(xué)調(diào)查，系統(tǒng)獲取流行病學(xué)信息和監(jiān)測數(shù)據(jù)，分析動物疫病狀況。

6.2.2.2 疫情監(jiān)視 動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)可對動物飼養(yǎng)、屠宰加工、運輸、經(jīng)營和隔離檢疫等環(huán)節(jié)進行定期或不定期巡查或開展疫情普查，獲取相關(guān)信息。

6.2.2.3 實驗室監(jiān)測 （1）監(jiān)測頻率和監(jiān)測時間。綜合考慮動物疫病流行病學(xué)特點、易感動物生產(chǎn)周期和國家對監(jiān)測頻率的相關(guān)規(guī)定，確定監(jiān)測頻率和監(jiān)測時間。蟲媒性動物疫病的監(jiān)測時間應(yīng)主要集中在蟲媒活動高峰期和繁殖高峰期。（2）抽樣。通過調(diào)查動物疫病流行病學(xué)特點、歷史狀況和日常監(jiān)測情況等信息，確定流行病學(xué)單元和預(yù)期流行率，計算抽樣數(shù)量。群間預(yù)期流行率的確定應(yīng)考慮動物疫病的流行病學(xué)特征、區(qū)域內(nèi)每個流行病學(xué)單元之間的距離、歷史狀況和日常監(jiān)測情況等因素；群內(nèi)預(yù)期流行率的確定應(yīng)重點考慮動物疫病流行病學(xué)特征等因素。對區(qū)域養(yǎng)殖數(shù)量少，且易感動物養(yǎng)殖數(shù)量和分布清楚，證明無疫時可采取簡單隨機抽樣計算抽樣數(shù)量。對區(qū)域面積大，且易感動物養(yǎng)殖數(shù)量大，難以準(zhǔn)確掌握養(yǎng)殖數(shù)量和分布，證明無疫時可按照兩步法抽樣技術(shù)進行樣品采集。第一步抽取流行病學(xué)單元，第二步從流行病學(xué)單元內(nèi)抽取易感動物。樣品總量等于抽取的流行病學(xué)單元數(shù)量乘以抽取的易感動物數(shù)量。（3）抽樣原則。抽樣點包括區(qū)域內(nèi)的全部縣（市區(qū)），抽樣時應(yīng)覆蓋到每個縣（市區(qū)）中飼養(yǎng)、屠宰加工、運輸、經(jīng)營及隔離檢疫等所有環(huán)節(jié)，根據(jù)各環(huán)節(jié)的風(fēng)險權(quán)重大小確定抽樣比例和抽樣數(shù)量，每個環(huán)節(jié)不能重復(fù)抽樣。抽取的樣品應(yīng)涵蓋區(qū)域內(nèi)的所有易感動物，根據(jù)不同易感動物的數(shù)量確定抽樣比例和抽樣數(shù)量。對于蟲媒性動物疫病的監(jiān)測，應(yīng)根據(jù)傳播媒介生活和繁殖特性設(shè)置監(jiān)測點，在蟲媒活動高峰期和繁殖高峰期采集蟲媒進行監(jiān)測。抽樣工作必須在監(jiān)測方案下達后的規(guī)定時間內(nèi)完成。（4）采用血清學(xué)、病原學(xué)和分子生物學(xué)等檢測技術(shù)檢測抗體、病原或核酸。