張敏

（濟(jì)南市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心組織人事科 山東濟(jì)南250000）

1 前言

隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，醫(yī)藥衛(wèi)生行業(yè)的建設(shè)取得了巨大成就[1]。藥品安全問(wèn)題已經(jīng)被當(dāng)今社會(huì)廣泛關(guān)注，在藥品的管理監(jiān)督過(guò)程中，要保證檢測(cè)過(guò)程規(guī)范有效，保證檢測(cè)結(jié)果的正確性和可靠性，以實(shí)現(xiàn)對(duì)藥品質(zhì)量的嚴(yán)格控制，從而更好地保證人們的生命健康[2]。本文對(duì)不同藥品檢測(cè)過(guò)程中采用的檢測(cè)技術(shù)分別進(jìn)行了研究分析，并做了簡(jiǎn)單介紹。

2 光譜檢測(cè)技術(shù)

2.1 紫外-可見(jiàn)分光光度法（UV-VIS）

UV-VIS 是紫外-可見(jiàn)分光光度法的簡(jiǎn)稱，藥物中存在10～800 mm 的相關(guān)物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)，可在光譜區(qū)對(duì)其進(jìn)行輻射吸收、分析測(cè)定。與其他檢測(cè)方法相比，這種檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)[3]，可以有效地測(cè)定物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)，采用比色法可對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定。在平時(shí)的檢驗(yàn)中，一些具有較大共軛體系或發(fā)色官能團(tuán)的化合物可以采用紫外-可見(jiàn)分光光度法進(jìn)行檢驗(yàn)，從而推導(dǎo)化合物分子骨架中是否含有共軛體系。在實(shí)際操作中，雖然紫色光譜應(yīng)用起來(lái)較為簡(jiǎn)便，但是紫外線中化合物吸收較為微弱，其表現(xiàn)出的特征并不明顯，因此，不能對(duì)相關(guān)藥品進(jìn)行完全鑒別，在實(shí)際中需要與其他相關(guān)方法配合進(jìn)行[4]。在平時(shí)的檢驗(yàn)中，UV-VIS 常被應(yīng)用于藥物相關(guān)含量的確定。

2.2 原子吸收光譜法（AAS）

AAS 的中文名稱為原子吸收光譜法，氣態(tài)原子可以對(duì)相關(guān)的光輻射波長(zhǎng)進(jìn)行選擇性吸收，從而使原子層表面形成電子跳躍，利用這一原理，通過(guò)原子吸收的光譜對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)；AAS 也可以通過(guò)郎伯-比爾定律對(duì)相關(guān)化合物的含量進(jìn)行測(cè)定，對(duì)相關(guān)藥物痕量組分及微量成分進(jìn)行分析時(shí)多采用該法，如金銀花、洋參等中藥材中金屬含量的檢測(cè)[5]。

AAS 具有選擇性好、檢出限低、準(zhǔn)確度高等多種優(yōu)點(diǎn)，但是也存在一定的局限性，比如，在操作前，樣品處理比較麻煩；只能對(duì)多種元素進(jìn)行逐個(gè)分析；相關(guān)設(shè)備的購(gòu)置費(fèi)用較高；光譜曲線的線性范圍不廣泛；對(duì)于較穩(wěn)定的化合物檢驗(yàn)效果不理想。

2.3 紅外光譜法（IR）

IR 是分子吸收光譜的一種，實(shí)質(zhì)上是一種根據(jù)分子內(nèi)部原子間的相對(duì)振動(dòng)和分子轉(zhuǎn)動(dòng)等信息來(lái)確定物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)和鑒別化合物的分析方法[6]。在經(jīng)過(guò)紅外線照射后，相關(guān)物質(zhì)輻射能量標(biāo)準(zhǔn)會(huì)逐漸與分子的轉(zhuǎn)動(dòng)頻率以及振動(dòng)頻率達(dá)成一致，被檢測(cè)物質(zhì)的分子就會(huì)產(chǎn)生特定的紅外線譜，從而鑒定出化合物中的原子團(tuán)[7]。IR 在很多方面都具有優(yōu)勢(shì)，比如，試樣用量少、測(cè)定速度快、操作簡(jiǎn)便以及特征性強(qiáng)等。一般情況下，分子中官能團(tuán)的信息能夠從紅外光譜中獲得，但對(duì)于一些較為復(fù)雜的化合物，尤其是新化合物，單一依靠IR 檢測(cè)技術(shù)會(huì)出現(xiàn)諸多問(wèn)題，必須與相關(guān)技術(shù)手段相配合，才可確定其結(jié)構(gòu)[8]。當(dāng)前對(duì)IR 的應(yīng)用研究較少，多用于農(nóng)藥成分含量的相關(guān)測(cè)定工作。

3 色譜檢測(cè)技術(shù)

3.1 薄層層析色譜法（TLC）

TLC 的工作原理是將合適的涂料均勻地涂抹在鋁基片或者玻璃板上，然后經(jīng)過(guò)活化將鋁基片或者玻璃板制成可以用來(lái)檢測(cè)的薄層板[9]，再運(yùn)用展開(kāi)劑對(duì)樣本進(jìn)行展開(kāi)檢測(cè)，對(duì)比對(duì)照品與在供試品相同條件環(huán)境下的比移值（Rf），從而對(duì)藥品的相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行快速的檢測(cè)鑒別。在檢測(cè)的過(guò)程中，TLC 與其他技術(shù)相比有很大的優(yōu)勢(shì)，特別是在操作過(guò)程的簡(jiǎn)單性上尤為突出，且該技術(shù)可以借助顯色對(duì)組織的種類歸屬進(jìn)行鑒定[10]。這種方法的展開(kāi)速率較快，15～20 min 就可以完成對(duì)常見(jiàn)藥品的檢測(cè)，并且檢測(cè)結(jié)果也有很高的準(zhǔn)確度。但TLC 同時(shí)也有許多局限性，比如，難以快速準(zhǔn)確地分離極度相似的化合物，如果相關(guān)的組織不具有顯色或者紫外線吸收特征，它就不能取得很好的檢測(cè)結(jié)果。因此，TLC 大多被用于甘草、香連丸等藥品的快速鑒別[11]。

3.2 薄層色譜掃描法（TLCS）

TLCS 操作的前期準(zhǔn)備工作與TLC 檢測(cè)方法類似[12]，但是這種方法需要對(duì)物質(zhì)的吸收進(jìn)行定量測(cè)量，對(duì)技術(shù)方面的要求也更為嚴(yán)格。一般要求薄層板的厚度要控制得當(dāng)。為了減少薄層板自身缺點(diǎn)帶來(lái)的檢測(cè)誤差，相關(guān)實(shí)驗(yàn)人員要采用同規(guī)格的制板，相較于TLC 在操作中更加精細(xì)。TLCS 一般應(yīng)用于相關(guān)物質(zhì)的含量測(cè)定[13]。

3.3 氣相色譜法（GC）

GC 通過(guò)移動(dòng)的氣體對(duì)色譜進(jìn)行檢測(cè)分析，在實(shí)際的藥品檢測(cè)當(dāng)中，這種檢測(cè)技術(shù)可以應(yīng)用在氣液色譜法和氣固色譜法中，但需要檢測(cè)的物質(zhì)中的流動(dòng)相和固定相不能互相揮發(fā)、溶解或者解析進(jìn)行相互之間的分離[14]。一般來(lái)說(shuō)，該方法主要用于熱穩(wěn)定性較好且易揮發(fā)的物質(zhì)檢測(cè)，或者用于較難氣化的物質(zhì)的檢測(cè)。它具有用量較少、分析檢測(cè)速度快的優(yōu)點(diǎn)，但是在檢測(cè)的過(guò)程中，必須與相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比才能得出結(jié)論[15]。對(duì)藥材中揮發(fā)性成分的測(cè)定常采用該法，藥品的檢測(cè)過(guò)程也常會(huì)用到該技術(shù)[16]。

4 其他

4.1 顯微鑒定技術(shù)

顯微鏡技術(shù)主要應(yīng)用于中藥鑒別領(lǐng)域，可進(jìn)行相關(guān)的快速檢測(cè)，尤其是對(duì)傳統(tǒng)中藥的測(cè)定。例如，快速測(cè)定藥物中的成分含量和分子結(jié)構(gòu)時(shí)，顯微鏡技術(shù)就可以利用藥物形成的草酸鈣結(jié)晶和氣孔類型對(duì)藥物的微觀結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行鑒定和分析。在一些藥物的花粉檢測(cè)中，也可以利用電子顯微鏡觀測(cè)其立體的微觀結(jié)構(gòu)，得到可靠的鑒定結(jié)果[17]。

4.2 質(zhì)譜法（MS）

MS 體現(xiàn)的分離特性是色譜法自身最為顯著的優(yōu)勢(shì)，但通過(guò)鑒定難以得到相關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息。氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）是一種聯(lián)用技術(shù)，將GC 技術(shù)與MS 技術(shù)進(jìn)行深度融合，深入優(yōu)化相關(guān)檢測(cè)結(jié)果，對(duì)有機(jī)揮發(fā)物進(jìn)行檢測(cè)鑒定[18]。而液相色譜-質(zhì)譜（LCMS）是另一種聯(lián)用技術(shù)，它把質(zhì)譜技術(shù)與液相色譜技術(shù)進(jìn)行了有機(jī)結(jié)合，一方面能夠?qū)崿F(xiàn)藥物分離；另一方面，又能夠在一定程度上對(duì)相關(guān)化合物的信息進(jìn)行檢測(cè)鑒定。除此以外，對(duì)于GC-MS 技術(shù)在相關(guān)化合物測(cè)定時(shí)不能解決的熱不穩(wěn)定性、強(qiáng)極性、難揮發(fā)性等問(wèn)題，可以應(yīng)用LC-MS 技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，LCMS 技術(shù)已經(jīng)在藥品的檢測(cè)和分析中得到了廣泛的應(yīng)用[19]。

4.3 核磁共振技術(shù)（NMR）

電磁波可以對(duì)藥物進(jìn)行準(zhǔn)確可靠的分析檢測(cè)，C 譜和H 譜是這些光譜圖中最為常見(jiàn)的兩種。波譜解析技術(shù)主要應(yīng)用在原子排布規(guī)律的分析中，能夠進(jìn)一步對(duì)藥品的結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)鑒定。在使用NMR技術(shù)對(duì)藥物結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)鑒定時(shí)，通常會(huì)與MS 技術(shù)結(jié)合使用，這通常用于化學(xué)藥物中新化合物的結(jié)構(gòu)檢測(cè)。除了這兩種技術(shù)的應(yīng)用之外，液相-核磁共振連用技術(shù)（LC-NMR）也可被運(yùn)用到藥品的檢測(cè)中，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥品研發(fā)中未知藥物的檢測(cè)與鑒定[20]。

4.4 離子色譜技術(shù)

離子色譜作為藥品檢測(cè)中的一種常用技術(shù)，可以分為3 種類型，即高效離子交換色譜、離子對(duì)色譜和離子排斥色譜。離子色譜分析最初僅適用于陰離子和陽(yáng)離子監(jiān)測(cè)，但通過(guò)技術(shù)的不斷提高，離子色譜技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到蛋白質(zhì)、氨基酸、羥基等的檢測(cè)中。隨著離子色譜法的廣泛應(yīng)用，其理論在逐漸完善，分析技術(shù)水平也在不斷提高。

5 討論

隨著人們健康意識(shí)的不斷增強(qiáng)，社會(huì)對(duì)藥品安全越來(lái)越重視，藥品檢測(cè)在藥品監(jiān)管中發(fā)揮著重要的作用，是保證人民群眾用藥安全的重要手段。選擇合適的檢測(cè)分析技術(shù)在藥品監(jiān)管中的作用尤為突出。藥品檢測(cè)人員在檢測(cè)過(guò)程中一定要熟悉各種藥品的檢測(cè)方法，必要情況下，可以采取聯(lián)合檢測(cè)的方式，保證整個(gè)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)性。